MSU440 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10

MSU440 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10 操作方法(fa)（以下操作均按(an)無菌條件的(de)標準(zhun)進(jin)行(xing)）
1 取(qu)感受(shou)態(tai)細胞(bao)置(zhi)於冰(bing)浴(yu)中，如需(xu)分裝(zhuang)可(ke)將剛融(rong)化(hua)細(xi)胞(bao)懸液(ye)分裝(zhuang)到(dao)無菌預(yu)冷的(de)離心(xin)管中，置於冰(bing)浴(yu)中。
●  壹(yi)次轉(zhuan)化(hua)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)的(de)建議(yi)用量(liang)為(wei)50-100 μl，可以根(gen)據(ju)實際(ji)情(qing)況(kuang)分(fen)裝(zhuang)使(shi)用(yong)。應註(zhu)意所(suo)用DNA 體(ti)積(ji)不要超(chao)過感受(shou)態(tai)細胞(bao)懸液(ye)體(ti)積(ji)的(de)十(shi)分之壹(yi)。
以下實驗以100 μl感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)為(wei)例。
MSU440 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*102 向(xiang)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)懸液(ye)中加(jia)入(ru)目(mu)的(de)DNA（100 μl 的(de)感受(shou)態(tai)細胞(bao)能(neng)夠被1 ng 超螺(luo)旋質粒DNA 所飽和），輕(qing)輕(qing)旋(xuan)轉(zhuan)離(li)心(xin)管以混勻(yun)內(nei)容物(wu)，在冰浴中靜(jing)置30 分鐘(zhong)。
3 將離心(xin)管置於42℃水(shui)浴(yu)中放(fang)置(zhi)60-90 秒(miao)，然後快(kuai)速(su)將管轉移到(dao)冰浴(yu)中，使細(xi)胞(bao)冷(leng)卻(que)2-3 分(fen)鐘(zhong)，該(gai)過程(cheng)不要搖(yao)動(dong)離心(xin)管。
4 向每個離(li)心(xin)管中加(jia)入(ru)900 μl 無菌的(de)SOC 或LB 培養(yang)基（不含抗(kang)生素(su)）， 混勻(yun)後置於37℃搖(yao)床(chuang)振蕩培養(yang)1 小時(shi)（160-220 轉(zhuan)/分(fen)鐘(zhong)），目(mu)的(de)是使質粒上(shang)相(xiang)關(guan)的(de)抗(kang)性標(biao)記(ji)基(ji)因表達，使菌體(ti)復(fu)蘇(su)。
5 將離心(xin)管內容物(wu)混勻(yun)，吸(xi)取(qu)100 μl 已(yi)轉化(hua)的(de)感受(shou)態(tai)細胞(bao)加(jia)到(dao)含相(xiang)應抗(kang)生素(su)的(de)SOB 或LB 固(gu)體(ti)瓊(qiong)脂(zhi)培養(yang)基上(shang)，用無(wu)菌的(de)彎(wan)頭(tou)玻(bo)棒(bang)輕(qing)輕(qing)的(de)將細胞(bao)均(jun)勻(yun)塗(tu)開(kai)。將平板置(zhi)於室溫直至液(ye)體(ti)被(bei)吸收(shou)，倒置平板，37℃培養(yang)12-16 小時(shi)。
MSU440 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10●  塗(tu)布(bu)用(yong)量(liang)可根據具(ju)體(ti)實驗來調(tiao)整。如轉(zhuan)化(hua)的(de)DNA 總量(liang)較(jiao)多(duo)，可取(qu)更(geng)少量(liang)轉化(hua)產(chan)物(wu)塗(tu)布(bu)平板；反(fan)之，如轉(zhuan)化(hua)的(de)DNA 總量(liang)較(jiao)少，可(ke)取(qu)200-300 μl 轉化(hua)產(chan)物(wu)塗(tu)布(bu)平板。如果(guo)預(yu)計的(de)克隆(long)較(jiao)少，可(ke)通(tong)過離心(xin)（4,000 rpm, 2分(fen)鐘）後吸除(chu)部分(fen)培養(yang)液(ye)，懸浮(fu)菌體(ti)後將其塗布於壹(yi)個平板中(zhong)。（塗布(bu)剩余(yu)的(de)菌液(ye)可置(zhi)於4℃保(bao)存(cun)，如果(guo)次日(ri)的(de)轉化(hua)菌落(luo)數過少可(ke)以將剩下的(de)菌液(ye)再塗(tu)布新的(de)培養(yang)板）
MSU440 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10 註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 感受(shou)態(tai)細胞(bao)應保(bao)存在 -70℃，不可多(duo)次凍(dong)融(rong)和(he)放置時(shi)間過長，以避免降低(di)感受(shou)態(tai)細胞(bao)的(de)轉化(hua)效(xiao)率(lv)。
2. 進(jin)行(xing)轉(zhuan)化(hua)操作時，應根(gen)據相(xiang)應溫(wen)度及(ji)無(wu)菌條件的(de)要求進(jin)行(xing)。
3 為(wei)防止轉(zhuan)化(hua)實驗不成功(gong)，可(ke)以保(bao)留(liu)部分(fen)連(lian)接反(fan)應液(ye)，以重新轉化(hua)，將損(sun)失降到(dao)低(di)。
以下是的(de)相(xiang)關(guan)產(chan)品：

 ET 大(da)鼠內毒素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 TCC C5b-9 大(da)鼠末端(duan)補(bu)體(ti)復(fu)合物(wu)C5b-9 規(gui)格： 48T/96T

 ANX-Ⅴ 大(da)鼠膜聯(lian)蛋(dan)白Ⅴ 規(gui)格： 48T/96T

 MIS/AMH 大(da)鼠繆勒(le)管抑制(zhi)物(wu)質/抗(kang)繆勒(le)管激素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 IgM 大(da)鼠免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)M 規(gui)格： 48T/96T

 IgG 大(da)鼠免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)G 規(gui)格： 48T/96T

 IgE 大(da)鼠免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)E 規(gui)格： 48T/96T

 IgA 大(da)鼠免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)A 規(gui)格： 48T/96T

 OVA sIgE 大(da)鼠卵清(qing)蛋(dan)白(bai)特異性IgE 規(gui)格： 48T/96T

大(da)鼠卵巢(chao)癌(ai)標(biao)誌物(wu)CA125ELISA Kit，48T/96T 大(da)鼠卵巢(chao)癌(ai)標(biao)誌物(wu)CA125ELISA Kit，48T/96T 規(gui)格： 48T/96T

 TrxR 大(da)鼠硫氧還蛋白(bai)還(hai)原(yuan)酶 規(gui)格： 48T/96T

 Trx 大(da)鼠硫氧化(hua)還(hai)原(yuan)蛋(dan)白(bai) 規(gui)格： 48T/96T

 PI Ab-IgG/IgM 大(da)鼠磷脂(zhi)酰肌(ji)醇抗(kang)體(ti)IgG/IgM 規(gui)格： 48T/96T

 PL-A2 大(da)鼠磷脂(zhi)酶A2 規(gui)格： 48T/96T

 PI3K 大(da)鼠磷酸(suan)肌(ji)醇3激(ji)酶 規(gui)格： 48T/96T

 pACCase 大(da)鼠磷酸(suan)化(hua)乙(yi)酰羧(suo)化(hua)酶 規(gui)格： 48T/96T

 AMPK 大(da)鼠磷酸(suan)化(hua)腺(xian)苷酸(suan)活化(hua)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶 規(gui)格： 48T/96T

 pERK 大(da)鼠磷酸(suan)化(hua)細(xi)胞(bao)外(wai)信(xin)號(hao)調(tiao)節激(ji)酶 規(gui)格： 48T/96T

 P-PKC 大(da)鼠磷酸(suan)化(hua)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶C 規(gui)格： 48T/96T

大(da)鼠淋(lin)巴細胞(bao)因子(zi)ELISA Kit，48T/96T 大(da)鼠淋(lin)巴細胞(bao)因子(zi)ELISA Kit，48T/96T 規(gui)格： 48T/96T

 Lptn/LTN/XCL1 大(da)鼠淋(lin)巴細胞(bao)趨(qu)化(hua)因子(zi) 規(gui)格： 48T/96T

 LFA-3/CD58 大(da)鼠淋(lin)巴細胞(bao)功(gong)能(neng)相(xiang)關(guan)抗(kang)原(yuan)3 規(gui)格： 48T/96T

 GM-CSF 大(da)鼠粒細胞(bao)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)集(ji)落(luo)刺(ci)激因子(zi) 規(gui)格： 48T/96T

 G-CSF 大(da)鼠粒細胞(bao)集(ji)落(luo)刺(ci)激因子(zi) 規(gui)格： 48T/96T

 CC16 大(da)鼠克拉拉細胞(bao)蛋(dan)白(bai) 規(gui)格： 48T/96T

 sTRAIL 大(da)鼠可溶性腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子(zi)相(xiang)關(guan)雕(diao)亡(wang)誘導(dao)配(pei)體(ti) 規(gui)格： 48T/96T

 sPECAM-1 大(da)鼠可溶性血(xue)小(xiao)板內(nei)皮(pi)細胞(bao)粘(zhan)附(fu)分(fen)子1 規(gui)格： 48T/96T

 sVCAM-1 大(da)鼠可溶性血(xue)管細胞(bao)粘(zhan)附(fu)分(fen)子1 規(gui)格： 48T/96T

MSU440 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10 sEPCR 大(da)鼠可溶性血(xue)管內皮(pi)細胞(bao)蛋(dan)白(bai)C受(shou)體(ti) 規(gui)格： 48T/96T

 sICAM-1 大(da)鼠可溶性細(xi)胞(bao)間粘(zhan)附(fu)分(fen)子1 規(gui)格： 48T/96T

 sLR 大(da)鼠可溶性瘦素(su)受(shou)體(ti) 規(gui)格： 48T/96T