更新(xin)時(shi)間:2025-11-29
EHA101 電(dian)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)50ul*10菌株壹(yi)種常用於(yu)質(zhi)粒克(ke)隆的菌株。其φ80lacZΔM15基(ji)因(yin)的產(chan)物可(ke)與pUC載體(ti)編碼(ma)的b-半乳糖苷(gan)酶氨(an)基(ji)端(duan)實(shi)現a互(hu)補(bu),可(ke)用於(yu)藍(lan)白(bai)斑(ban)篩(shai)選(xuan)。recA1和endA1 的突(tu)變有(you)利於(yu)克(ke)隆DNA 的穩定和高純(chun)度質(zhi)粒DNA的(de)提(ti)取。
EHA101 電感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)50ul*10 操(cao)作(zuo)方法(以(yi)下操作(zuo)均(jun)按無菌條(tiao)件(jian)的(de)標(biao)準(zhun)進(jin)行(xing))
1 取感受(shou)態(tai)細胞(bao)置(zhi)於(yu)冰浴(yu)中(zhong),如(ru)需(xu)分裝(zhuang)可將剛融化細胞(bao)懸(xuan)液分裝(zhuang)到無菌預(yu)冷的(de)離(li)心管(guan)中(zhong),置(zhi)於(yu)冰浴(yu)中(zhong)。
● 壹(yi)次轉化感受(shou)態(tai)細胞(bao)的(de)建(jian)議(yi)用量(liang)為50-100 μl,可以(yi)根(gen)據(ju)實際情況分裝(zhuang)使用。應(ying)註意(yi)所(suo)用DNA 體(ti)積不(bu)要(yao)超(chao)過(guo)感受(shou)態(tai)細胞(bao)懸(xuan)液體(ti)積的十(shi)分之(zhi)壹(yi)。
以(yi)下實驗(yan)以(yi)100 μl感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)為例。
EHA101 電感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)50ul*102 向(xiang)感受(shou)態(tai)細胞(bao)懸(xuan)液中(zhong)加(jia)入(ru)目的DNA(100 μl 的(de)感受(shou)態(tai)細胞(bao)能(neng)夠(gou)被1 ng 超(chao)螺旋質(zhi)粒DNA 所(suo)飽和),輕(qing)輕(qing)旋轉離心管(guan)以(yi)混勻內(nei)容物,在(zai)冰浴(yu)中(zhong)靜(jing)置30 分鐘(zhong)。
3 將離心管(guan)置(zhi)於(yu)42℃水(shui)浴(yu)中(zhong)放(fang)置(zhi)60-90 秒,然後(hou)快速(su)將管轉移到冰浴(yu)中(zhong),使細胞(bao)冷(leng)卻(que)2-3 分鐘(zhong),該過程(cheng)不(bu)要(yao)搖動(dong)離心管(guan)。
4 向(xiang)每個(ge)離心管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)900 μl 無菌的(de)SOC 或LB 培(pei)養(yang)基(ji)(不(bu)含(han)抗(kang)生素), 混勻後(hou)置於(yu)37℃搖床振(zhen)蕩(dang)培養(yang)1 小(xiao)時(shi)(160-220 轉/分鐘(zhong)),目的是(shi)使質(zhi)粒上(shang)相關(guan)的(de)抗性標(biao)記(ji)基(ji)因(yin)表(biao)達(da),使菌體(ti)復蘇(su)。
5 將離心管(guan)內(nei)容物混勻,吸(xi)取100 μl 已轉化的感受(shou)態(tai)細胞(bao)加(jia)到含(han)相應(ying)抗生素的SOB 或LB 固(gu)體(ti)瓊脂(zhi)培養(yang)基(ji)上(shang),用無(wu)菌的(de)彎頭(tou)玻(bo)棒(bang)輕(qing)輕(qing)的將細胞(bao)均(jun)勻(yun)塗開(kai)。將平(ping)板置於(yu)室(shi)溫(wen)直(zhi)至(zhi)液體(ti)被吸(xi)收(shou),倒(dao)置(zhi)平(ping)板,37℃培養(yang)12-16 小(xiao)時(shi)。
EHA101 電感受(shou)態(tai)細胞(bao)50ul*10● 塗布用量(liang)可(ke)根(gen)據(ju)具體(ti)實驗(yan)來調整(zheng)。如轉化的DNA 總(zong)量(liang)較多(duo),可(ke)取更少量轉化產物塗布平(ping)板;反之(zhi),如轉化的DNA 總(zong)量(liang)較少(shao),可(ke)取200-300 μl 轉化產物塗布平(ping)板。如果(guo)預(yu)計的(de)克(ke)隆較少(shao),可(ke)通過(guo)離心(4,000 rpm, 2分鐘(zhong))後(hou)吸(xi)除(chu)部分培(pei)養(yang)液,懸(xuan)浮(fu)菌體(ti)後(hou)將其塗布於(yu)壹(yi)個(ge)平(ping)板中(zhong)。(塗布剩余(yu)的(de)菌液可置(zhi)於(yu)4℃保(bao)存(cun),如(ru)果(guo)次日(ri)的(de)轉化菌落數過少可(ke)以(yi)將剩下的菌液再(zai)塗布新(xin)的(de)培(pei)養(yang)板)
註意(yi)事項(xiang)
1. 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)應(ying)保存(cun)在(zai) -70℃,不(bu)可(ke)多次凍(dong)融和放(fang)置(zhi)時間過(guo)長(chang),以(yi)避(bi)免(mian)降(jiang)低(di)感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)的(de)轉化效率。
2. 進(jin)行(xing)轉化操作時(shi),應(ying)根據(ju)相應(ying)溫(wen)度及(ji)無菌條(tiao)件(jian)的(de)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
3 為防止(zhi)轉化實驗不(bu)成(cheng)功(gong),可以(yi)保(bao)留(liu)部分連(lian)接反應(ying)液,以(yi)重(zhong)新(xin)轉化,將損失(shi)降(jiang)到低(di)。
以(yi)下是的(de)相關(guan)產(chan)品:
保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠β甘露(lu)糖(tang)苷(gan)酶(β Manase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠β甘露(lu)糖(tang)苷(gan)酶(β Manase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠β內(nei)酰(xian)胺(an)酶抑制(zhi)劑(ji)(BLI)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; β-Lactamase inhibitors,BLI ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠β內(nei)酰(xian)胺(an)酶抑制(zhi)劑(ji)(BLI)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠β內(nei)酰(xian)胺(an)酶抑制(zhi)劑(ji)(BLI)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; Beta-naphthol ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠β葡糖(tang)苷(gan)酶(β-glucosidase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; β-glucosidase ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠β葡糖(tang)苷(gan)酶(β-glucosidase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠β葡糖(tang)苷(gan)酶(β-glucosidase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠β葡萄糖(tang)醛(quan)酸苷(gan)酶(βGD)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; β-glucuronidase,βGD ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠β葡萄糖(tang)醛(quan)酸苷(gan)酶(βGD)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠β葡萄糖(tang)醛(quan)酸苷(gan)酶(βGD)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; galactose-6-sulphate sulphatase,Gal-6S ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠苯(LPA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; L-phenylalanine,LPA ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠苯(LPA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠苯(LPA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
EHA101 電(dian)感受(shou)態(tai)細胞(bao)50ul*10 小(xiao)鼠丙(bing)酮酸激酶(PK)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; pyruvate kinase,PK ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重復性好(hao)等(deng)優(you)點(dian)已經得(de)到廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認可,您可放(fang)心,且(qie)我司(si)有(you)專(zhuan)門的售(shou)後(hou)部門對您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠丙(bing)酮酸激酶(PK)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠丙(bing)酮酸激酶(PK)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠腫(zhong)瘤標(biao)誌物(wu)(CA724)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英(ying)文(wen)名(ming)稱; b)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價(jia)