AGL1 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*10

AGL1 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*10 操作(zuo)方(fang)法(fa)（以(yi)下操作(zuo)均(jun)按無(wu)菌(jun)條件的(de)標準(zhun)進行(xing)）
1 取(qu)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞置於冰(bing)浴(yu)中(zhong)，如需(xu)分(fen)裝(zhuang)可(ke)將(jiang)剛(gang)融(rong)化(hua)細(xi)胞懸液(ye)分(fen)裝(zhuang)到無(wu)菌(jun)預(yu)冷的(de)離(li)心管中(zhong)，置(zhi)於冰(bing)浴(yu)中(zhong)。
●  壹(yi)次(ci)轉(zhuan)化(hua)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞的(de)建議(yi)用量為50-100 μl，可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)實(shi)際情(qing)況分(fen)裝(zhuang)使(shi)用。應(ying)註意(yi)所(suo)用DNA 體(ti)積(ji)不要超過(guo)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞懸液(ye)體積(ji)的(de)十(shi)分(fen)之壹。
以(yi)下實(shi)驗以(yi)100 μl感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞為例。
AGL1 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*102 向感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞懸液(ye)中加(jia)入目(mu)的(de)DNA（100 μl 的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞能(neng)夠(gou)被1 ng 超螺旋(xuan)質(zhi)粒(li)DNA 所(suo)飽(bao)和），輕(qing)輕旋轉離(li)心管以(yi)混勻(yun)內容物，在冰(bing)浴(yu)中(zhong)靜(jing)置30 分(fen)鐘。
3 將(jiang)離(li)心管置(zhi)於42℃水浴(yu)中(zhong)放置(zhi)60-90 秒，然(ran)後快速將(jiang)管轉(zhuan)移(yi)到冰浴(yu)中(zhong)，使(shi)細(xi)胞冷卻(que)2-3 分(fen)鐘，該過(guo)程(cheng)不要搖(yao)動(dong)離(li)心管。
4 向(xiang)每個(ge)離(li)心管中(zhong)加(jia)入900 μl 無(wu)菌(jun)的(de)SOC 或(huo)LB 培養(yang)基(ji)（不含(han)抗生素(su)）， 混勻(yun)後(hou)置(zhi)於37℃搖(yao)床振蕩培(pei)養(yang)1 小(xiao)時(shi)（160-220 轉(zhuan)/分(fen)鐘），目(mu)的(de)是(shi)使(shi)質(zhi)粒(li)上相(xiang)關的(de)抗性標記(ji)基(ji)因(yin)表達(da)，使菌(jun)體(ti)復蘇(su)。
AGL1 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*105 將(jiang)離(li)心管內容物混勻(yun)，吸(xi)取100 μl 已(yi)轉(zhuan)化(hua)的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞加(jia)到含(han)相(xiang)應抗生素(su)的(de)SOB 或(huo)LB 固(gu)體(ti)瓊脂培(pei)養(yang)基(ji)上，用無(wu)菌(jun)的(de)彎頭玻(bo)棒輕輕的(de)將(jiang)細(xi)胞均勻(yun)塗開。將(jiang)平板置於室溫(wen)直(zhi)至(zhi)液(ye)體被吸(xi)收，倒置(zhi)平板，37℃培養(yang)12-16 小(xiao)時(shi)。
●  塗(tu)布用量可(ke)根(gen)據(ju)具體實(shi)驗來(lai)調(tiao)整。如轉(zhuan)化(hua)的(de)DNA 總(zong)量較(jiao)多(duo)，可(ke)取更(geng)少(shao)量轉化(hua)產物塗布平板；反(fan)之(zhi)，如轉(zhuan)化(hua)的(de)DNA 總(zong)量較(jiao)少(shao)，可(ke)取200-300 μl 轉(zhuan)化(hua)產物塗布平板。如果預(yu)計(ji)的(de)克(ke)隆較(jiao)少(shao)，可(ke)通(tong)過(guo)離(li)心（4,000 rpm, 2分(fen)鐘）後吸(xi)除部分(fen)培養(yang)液(ye)，懸浮菌(jun)體(ti)後將(jiang)其塗布於壹(yi)個(ge)平板中。（塗布剩余(yu)的(de)菌(jun)液(ye)可(ke)置於4℃保(bao)存，如果次(ci)日(ri)的(de)轉(zhuan)化(hua)菌(jun)落(luo)數(shu)過(guo)少(shao)可(ke)以(yi)將(jiang)剩下的(de)菌(jun)液(ye)再塗(tu)布新的(de)培(pei)養(yang)板(ban)）
 註意(yi)事(shi)項
1. 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞應保(bao)存在 -70℃，不可(ke)多(duo)次凍融(rong)和放置(zhi)時(shi)間(jian)過(guo)長，以(yi)避免(mian)降(jiang)低(di)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞的(de)轉(zhuan)化(hua)效率。
2. 進行(xing)轉(zhuan)化(hua)操作(zuo)時(shi)，應(ying)根(gen)據(ju)相(xiang)應溫(wen)度(du)及無(wu)菌(jun)條件的(de)要求(qiu)進行(xing)。
3 為防止轉化(hua)實(shi)驗不成(cheng)功(gong)，可(ke)以(yi)保(bao)留(liu)部分(fen)連接反(fan)應(ying)液(ye)，以(yi)重新(xin)轉(zhuan)化(hua)，將(jiang)損(sun)失降(jiang)到低。
以(yi)下是(shi)的(de)相(xiang)關產(chan)品(pin)：

 小(xiao)鼠(shu)絨毛膜(mo)β(β-CG)ELISA試(shi)劑盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得(de)到廣大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心，且我(wo)司(si)有(you)專門的(de)售後部門對您進行(xing)全(quan)線跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)絨毛膜(mo)β(β-CG)ELISA試(shi)劑盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠(shu)絨毛膜(mo)β(β-CG)ELISA試(shi)劑盒(he)報(bao)價 

 小(xiao)鼠(shu)抑制(zhi)素(su)A(INH-A)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Inhibin,INH-A ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得(de)到廣大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心，且我(wo)司(si)有(you)專門的(de)售後部門對您進行(xing)全(quan)線跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)抑制(zhi)素(su)A(INH-A)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠(shu)抑制(zhi)素(su)A(INH-A)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價 

 小(xiao)鼠(shu)甲狀(zhuang)腺球(qiu)蛋白(TG)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Thyroglobulin,TG ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得(de)到廣大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心，且我(wo)司(si)有(you)專門的(de)售後部門對您進行(xing)全(quan)線跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)甲狀(zhuang)腺球(qiu)蛋白(TG)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠(shu)甲狀(zhuang)腺球(qiu)蛋白(TG)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價 

 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白2(AQP-2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得(de)到廣大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心，且我(wo)司(si)有(you)專門的(de)售後部門對您進行(xing)全(quan)線跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白2(AQP-2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白2(AQP-2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價 

 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白0(AQP-0)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得(de)到廣大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心，且我(wo)司(si)有(you)專門的(de)售後部門對您進行(xing)全(quan)線跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白0(AQP-0)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白0(AQP-0)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價 

 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白1(AQP-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得(de)到廣大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心，且我(wo)司(si)有(you)專門的(de)售後部門對您進行(xing)全(quan)線跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白1(AQP-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白1(AQP-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價 

AGL1 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*10 小鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白3(AQP-3)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得(de)到廣大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心，且我(wo)司(si)有(you)專門的(de)售後部門對您進行(xing)全(quan)線跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白3(AQP-3)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)廠(chang)家 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白3(AQP-3)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)報(bao)價 

 小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白4(AQP-4)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) :英文(wen)名稱(cheng);   Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑盒(he)保(bao)證(zheng)質(zhi)量，靈敏性高、特異性(xing)強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)