GV3101（pJlC SA-rep）感(gan)受態細胞(bao)100ul*10

 GV3101（pJlC SA-rep）感(gan)受態細胞(bao)100ul*10操作方(fang)法（以(yi)下操作均(jun)按無菌條(tiao)件的(de)標(biao)準(zhun)進(jin)行(xing)）
1 取(qu)感(gan)受態細胞(bao)置(zhi)於(yu)冰浴中(zhong)，如(ru)需(xu)分裝可將(jiang)剛(gang)融化(hua)細胞(bao)懸(xuan)液分裝到無菌預(yu)冷(leng)的離(li)心管中(zhong)，置於(yu)冰浴中(zhong)。
●  壹次(ci)轉化感(gan)受態細胞(bao)的(de)建議用量(liang)為50-100 μl，可以(yi)根據(ju)實際(ji)情況分裝使(shi)用。應註意所(suo)用DNA 體積不(bu)要(yao)超過感(gan)受態細胞(bao)懸(xuan)液體積的(de)十(shi)分(fen)之壹。
以(yi)下實驗(yan)以(yi)100 μl感(gan)受態細胞(bao)為例(li)。
 GV3101（pJlC SA-rep）感(gan)受態細胞(bao)100ul*10 GV3101（pJlC SA-rep）感(gan)受態細胞(bao)100ul*102 向(xiang)感(gan)受態細胞(bao)懸(xuan)液中(zhong)加入(ru)目(mu)的DNA（100 μl 的(de)感(gan)受態細胞(bao)能(neng)夠被(bei)1 ng 超螺旋質粒(li)DNA 所(suo)飽和(he)），輕(qing)輕(qing)旋轉離(li)心管以(yi)混(hun)勻(yun)內(nei)容物(wu)，在(zai)冰浴中(zhong)靜(jing)置(zhi)30 分(fen)鐘。
3 將(jiang)離(li)心管置(zhi)於(yu)42℃水浴(yu)中(zhong)放置(zhi)60-90 秒(miao)，然(ran)後快(kuai)速(su)將(jiang)管轉移到冰浴中(zhong)，使細胞(bao)冷(leng)卻2-3 分鐘，該過程不要搖動(dong)離(li)心管。
 GV3101（pJlC SA-rep）感(gan)受態細胞(bao)100ul*104 向(xiang)每個(ge)離(li)心管中(zhong)加入(ru)900 μl 無菌的SOC 或(huo)LB 培(pei)養(yang)基（不(bu)含(han)抗(kang)生(sheng)素(su)）， 混(hun)勻(yun)後置(zhi)於(yu)37℃搖床(chuang)振蕩培(pei) GV3101（pJlC SA-rep）感(gan)受態細胞(bao)100ul*10養(yang)1 小時（160-220 轉/分鐘），目(mu)的是使(shi)質粒(li)上(shang)相關的(de)抗(kang)性標記基因(yin)表(biao)達，使菌體復蘇。
5 將(jiang)離(li)心管內(nei)容物(wu)混(hun)勻(yun)，吸取(qu)100 μl 已(yi)轉化的感(gan)受態細胞(bao)加(jia)到含(han)相(xiang)應抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)SOB 或(huo)LB 固體(ti)瓊(qiong)脂培(pei)養(yang)基上(shang)，用無菌的彎(wan)頭(tou)玻棒輕(qing)輕(qing)的將(jiang)細胞(bao)均(jun)勻(yun)塗(tu)開。將(jiang)平板(ban)置(zhi)於(yu)室(shi)溫直至(zhi)液體(ti)被(bei)吸收(shou)，倒(dao)置平板(ban)，37℃培(pei)養(yang)12-16 小時。
●  塗(tu)布(bu)用(yong)量(liang)可根據(ju)具體(ti)實驗(yan)來(lai)調整。如(ru)轉化的DNA 總(zong)量較多(duo)，可取(qu)更少(shao)量(liang)轉化產物(wu)塗(tu)布(bu)平板(ban)；反(fan)之(zhi)，如(ru)轉化的DNA 總(zong)量較少(shao)，可取(qu)200-300 μl 轉化產物(wu)塗(tu)布(bu)平板(ban)。如(ru)果預(yu)計的克隆(long)較少(shao)，可通(tong)過離(li)心（4,000 rpm, 2分鐘）後吸除(chu)部分(fen)培(pei)養(yang)液，懸(xuan)浮(fu)菌體後將(jiang)其塗(tu)布(bu)於(yu)壹(yi)個(ge)平板(ban)中(zhong)。（塗(tu)布(bu)剩余的菌液可置(zhi)於4℃保(bao)存(cun)，如(ru)果次(ci)日(ri)的(de)轉化菌落(luo)數過少可以(yi)將(jiang)剩下的(de)菌液再(zai)塗(tu)布(bu)新的培(pei)養(yang)板(ban)）
 註(zhu)意事(shi)項(xiang)
1. 感(gan)受態細胞(bao)應保(bao)存(cun)在(zai) -70℃，不可多(duo)次(ci)凍融和(he)放置(zhi)時間過長(chang)，以避免降低感(gan)受態細胞(bao)的(de)轉化效率。
2. 進(jin)行(xing)轉化操作時(shi)，應根據(ju)相應溫度(du)及(ji)無菌條(tiao)件的(de)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
3 為防止轉化實驗(yan)不(bu)成(cheng)功，可以(yi)保(bao)留(liu)部分(fen)連(lian)接(jie)反(fan)應液，以(yi)重(zhong)新轉化，將(jiang)損(sun)失降到低。
以下是的(de)相(xiang)關產(chan)品(pin)：

malondialchehyche,MDA ELISA Kit 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得到廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且我司有(you)專門的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全線跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠(shu)丙二醛(quan)(MDA)ELISA試(shi)劑盒廠家 小鼠(shu)丙二醛(quan)(MDA)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價 

 小鼠(shu)熱(re)休克(ke)蛋白(bai)60(Hsp-60)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱;   heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得到廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且我司有(you)專門的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全線跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠(shu)熱(re)休克(ke)蛋白(bai)60(Hsp-60)ELISA試(shi)劑盒廠家 小鼠(shu)熱(re)休克(ke)蛋白(bai)60(Hsp-60)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價 

 小鼠(shu)血(xue)管緊(jin)張(zhang)素(su)原(yuan)(aGT)ELISA試劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱;   angiotensinogen,aGT ELISA Kit 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得到廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且我司有(you)專門的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全線跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠(shu)血(xue)管緊(jin)張(zhang)素(su)原(yuan)(aGT)ELISA試劑盒廠家 小鼠(shu)血(xue)管緊(jin)張(zhang)素(su)原(yuan)(aGT)ELISA試劑盒報(bao)價 

 小鼠(shu)酯(zhi)轉移蛋白(bai)(CETP)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱;   cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得到廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且我司有(you)專門的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全線跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠(shu)酯(zhi)轉移蛋白(bai)(CETP)ELISA試(shi)劑盒廠家 小鼠(shu)酯(zhi)轉移蛋白(bai)(CETP)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價 

 小鼠(shu)內(nei)皮(pi)型壹氧化氮(dan)合成(cheng)酶(mei)3(eNOS-3)ELISA試劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱;   Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得到廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且我司有(you)專門的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全線跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠(shu)內(nei)皮(pi)型壹氧化氮(dan)合成(cheng)酶(mei)3(eNOS-3)ELISA試劑盒廠家 小鼠(shu)內(nei)皮(pi)型壹氧化氮(dan)合成(cheng)酶(mei)3(eNOS-3)ELISA試劑盒報(bao)價 

 小鼠(shu)α1酸性糖蛋白(bai)(α1-AGP)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱;   α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得到廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且我司有(you)專門的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全線跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠(shu)α1酸性糖蛋白(bai)(α1-AGP)ELISA試(shi)劑盒廠家 小鼠(shu)α1酸性糖蛋白(bai)(α1-AGP)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價 

 GV3101（pJlC SA-rep）感(gan)受態細胞(bao)100ul*10 小鼠(shu)16α羥(qiang)基(ji)雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱;   16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得到廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且我司有(you)專門的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全線跟蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠(shu)16α羥(qiang)基(ji)雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試(shi)劑盒廠家 小鼠(shu)16α羥(qiang)基(ji)雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價 

 小鼠(shu)結(jie)合珠(zhu)蛋白(bai)/觸(chu)珠(zhu)蛋白(bai)(Hpt/HP)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱;   Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT 購買(mai)我公(gong)司ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈(ling)敏性高、特(te)異(yi)性強、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)