BL21 Star（DE3） 感受(shou)態細胞(bao)100ul*10

BL21 Star(DE3) 感受(shou)態細胞(bao)100ul*10以(yi)下是(shi)的(de)訂購(gou)信(xin)息(xi)儲存(cun)條(tiao)件(jian)：-70℃凍(dong)存(cun)
操(cao)作方法:
1. 取(qu)-80℃保存(cun)的(de)農桿菌感受(shou)態於室溫(wen)或(huo)手心(xin)片刻(ke)待(dai)其(qi)部(bu)分(fen)融化(hua)，處(chu)於(yu)冰(bing)水(shui)混合狀(zhuang)態時插(cha)入冰中(zhong)。
BL21 Star(DE3) 感受(shou)態細胞(bao)100ul*102.每(mei)100 μl感受(shou)態加(jia)入0.01-1 μg質粒(li)DNA（轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率較高，*次使(shi)用(yong)前做(zuo)預實(shi)驗(yan)確定(ding)所(suo)加(jia)質粒的(de)量），用手管(guan)底混勻，依次於冰上(shang)靜(jing)置5分(fen)鐘、液氮5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴5分(fen)鐘、冰(bing)浴5分(fen)鐘。
3. 加(jia)入700 μl無(wu)抗(kang)生素(su)的(de)LB或YEB液體(ti)培(pei)養基，於(yu)28℃振(zhen)蕩培養(yang)2~3小(xiao)時。
4. 6000 rpm離心(xin)壹分(fen)鐘收(shou)菌(jun)，留(liu)取(qu)100 μl左右上清(qing)輕輕吹打(da)重(zhong)懸(xuan)菌(jun)塊(kuai)塗(tu)布於含(han)相(xiang)應(ying)抗(kang)生素(su)的(de)LB或YEB平(ping)板上，倒置放(fang)於28℃培養(yang)箱培(pei)養2-3天
註(zhu)意(yi)事項(xiang)
BL21 Star(DE3) 感受(shou)態細胞(bao)100ul*101. 加(jia)入質粒(li)時(shi)體積(ji)不應(ying)大(da)於(yu)感受(shou)態體積(ji)的(de)1/10；質粒(li)不純(chun)或存(cun)在乙醇等有機物汙(wu)染(ran)，轉化(hua)效(xiao)率急(ji)劇下降；質粒(li)增(zeng)大(da)壹倍(bei)，轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率下降壹個(ge)數量級。
2. 混入質(zhi)粒時(shi)應(ying)輕柔操作。轉化(hua)高(gao)濃(nong)度(du)的(de)質粒(li)可(ke)相(xiang)應(ying)減少(shao)終用(yong)於塗板的(de)菌量。
3. 平板上陽(yang)性(xing)克(ke)隆密(mi)度過(guo)大(da)時(shi)，由於營養不足(zu)，陽(yang)性(xing)克(ke)隆生長(chang)變(bian)慢，菌落(luo)變(bian)小(xiao)，為了(le)獲(huo)得大(da)的(de)菌落(luo)，應(ying)減少(shao)質(zhi)粒用(yong)量。
4. 濃(nong)度(du)不應(ying)高於(yu)25 μg/ml，過(guo)高(gao)的(de)濃(nong)度(du)不利(li)於農桿菌生長(chang)，會(hui)降低(di)其(qi)生長(chang)速(su)度和轉化(hua)效(xiao)率。本(ben)公司感受(shou)態計(ji)算轉化(hua)效(xiao)率時(shi)所用(yong)平板只含(han)有50 μg/ml kan，若所用平板含(han)有20 μg/ml rif則(ze)轉化(hua)效(xiao)率降(jiang)低(di)到(dao)1/2。
5. 培養(yang)基中(zhong)加(jia)入的(de)目的(de)是(shi)防止(zhi)雜菌(jun)生長(chang)、篩(shai)選農桿菌；根(gen)據所(suo)用(yong)菌株(zhu)抗(kang)性(xing)加(jia)入Ti質粒(li)篩(shai)選抗(kang)生素(su)可防止(zhi)Ti質粒(li)丟失，但Ti質(zhi)粒篩選抗(kang)生素(su)不利(li)於農桿菌的(de)轉基因(yin)操作，所以(yi)壹般(ban)培(pei)養(yang)農桿菌時(shi)不考(kao)慮這些(xie)抗(kang)生素(su)，Ti質粒丟(diu)失的(de)概率(lv)極(ji)低(di)(可(ke)以(yi)忽略(lve))。

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 大(da)鼠(shu)前(qian)列(lie)腺(xian)素(su)E1(PGE1)ELISA試劑盒(he) :英文名(ming)稱; rat Prostaglandin E1,PG-E1 Elisa kit 購買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒(he)保證(zheng)質(zhi)量，靈敏(min)性(xing)高(gao)、特異性強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經得到(dao)廣大(da)客戶(hu)的(de)認可(ke)，您可(ke)放(fang)心，且(qie)我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部門(men)對(dui)您進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)前(qian)列(lie)腺(xian)素(su)E1(PGE1)ELISA試劑盒(he)廠家 大(da)鼠(shu)前(qian)列(lie)腺(xian)素(su)E1(PGE1)ELISA試劑盒(he)報(bao)價 

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