更(geng)新(xin)時(shi)間(jian):2025-11-29
BL21 電(dian)感受態(tai)細(xi)胞50ul*20菌株壹種(zhong)常(chang)用(yong)於(yu)質(zhi)粒(li)克隆的(de)菌株。其(qi)φ80lacZΔM15基(ji)因(yin)的(de)產物可與pUC載(zai)體編(bian)碼的(de)b-半乳糖苷(gan)酶氨(an)基(ji)端(duan)實現(xian)a互補,可用(yong)於(yu)藍(lan)白斑篩(shai)選(xuan)。recA1和endA1 的(de)突變有(you)利於(yu)克隆DNA 的(de)穩(wen)定和高(gao)純(chun)度質(zhi)粒(li)DNA的(de)提取。
BL21 電感(gan)受態(tai)細(xi)胞50ul*20以(yi)下是(shi)的(de)訂(ding)購信(xin)息(xi)儲(chu)存(cun)條(tiao)件:-70℃凍存(cun)
操(cao)作(zuo)方(fang)法(fa):
1. 取-80℃保(bao)存(cun)的(de)農桿菌感(gan)受(shou)態(tai)於(yu)室(shi)溫或(huo)手心(xin)片(pian)刻待(dai)其(qi)部(bu)分(fen)融化(hua),處(chu)於(yu)冰水混(hun)合狀態(tai)時(shi)插(cha)入(ru)冰中。
2.每100 μl感受(shou)態(tai)加(jia)入(ru)0.01-1 μg質粒DNA(轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率較(jiao)高(gao),*次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)做(zuo)預(yu)實驗(yan)確(que)定(ding)所(suo)加質粒(li)的(de)量),用(yong)手(shou)管底混勻(yun),依(yi)次(ci)於(yu)冰上(shang)靜(jing)置5分(fen)鐘(zhong)、液(ye)氮5分(fen)鐘(zhong)、37℃水浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)、冰浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)。
BL21 電(dian)感受態(tai)細(xi)胞50ul*203. 加(jia)入(ru)700 μl無抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或(huo)YEB液體(ti)培(pei)養基(ji),於(yu)28℃振(zhen)蕩培養(yang)2~3小(xiao)時(shi)。
4. 6000 rpm離心(xin)壹分(fen)鐘(zhong)收(shou)菌,留(liu)取100 μl左右(you)上清輕(qing)輕(qing)吹打(da)重(zhong)懸(xuan)菌塊塗(tu)布於(yu)含(han)相應(ying)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或(huo)YEB平板(ban)上(shang),倒置放(fang)於(yu)28℃培(pei)養(yang)箱培養(yang)2-3天
註(zhu)意事項(xiang)
1. 加(jia)入(ru)質粒時(shi)體(ti)積不應(ying)大(da)於(yu)感(gan)受(shou)態(tai)體(ti)積的(de)1/10;質(zhi)粒不(bu)純(chun)或(huo)存(cun)在(zai)乙(yi)醇(chun)等有(you)機(ji)物(wu)汙(wu)染(ran),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率急(ji)劇(ju)下降;質(zhi)粒增(zeng)大壹倍(bei),轉(zhuan)化效(xiao)率下降壹個數(shu)量級(ji)。
2. 混(hun)入(ru)質粒時(shi)應(ying)輕(qing)柔(rou)操(cao)作(zuo)。轉(zhuan)化(hua)高(gao)濃(nong)度(du)的(de)質(zhi)粒可相應(ying)減(jian)少(shao)終用(yong)於(yu)塗(tu)板的(de)菌量。
3. 平板(ban)上陽性克隆密度過大時(shi),由(you)於(yu)營(ying)養(yang)不(bu)足,陽性克隆生長變慢,菌落(luo)變小(xiao),為了(le)獲(huo)得大(da)的(de)菌落(luo),應(ying)減(jian)少(shao)質(zhi)粒(li)用(yong)量。
BL21 電感(gan)受態(tai)細(xi)胞50ul*204. 濃(nong)度不(bu)應(ying)高(gao)於(yu)25 μg/ml,過高(gao)的(de)濃(nong)度不(bu)利於(yu)農桿菌生(sheng)長(chang),會(hui)降低(di)其(qi)生(sheng)長(chang)速(su)度(du)和轉(zhuan)化效(xiao)率。本公(gong)司(si)感受(shou)態(tai)計(ji)算轉(zhuan)化效(xiao)率時(shi)所(suo)用(yong)平(ping)板只含(han)有(you)50 μg/ml kan,若所用(yong)平(ping)板含(han)有(you)20 μg/ml rif則(ze)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率降低(di)到1/2。
5. 培養基(ji)中加入(ru)的(de)目的(de)是(shi)防(fang)止(zhi)雜(za)菌生(sheng)長(chang)、篩(shai)選(xuan)農桿菌;根(gen)據所(suo)用(yong)菌株抗(kang)性(xing)加(jia)入(ru)Ti質粒篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)可防(fang)止(zhi)Ti質(zhi)粒(li)丟(diu)失(shi),但(dan)Ti質(zhi)粒篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)不(bu)利於(yu)農桿菌的(de)轉(zhuan)基(ji)因(yin)操(cao)作(zuo),所(suo)以(yi)壹般(ban)培養(yang)農桿菌時(shi)不(bu)考(kao)慮這(zhe)些(xie)抗(kang)生(sheng)素(su),Ti質(zhi)粒(li)丟失的(de)概(gai)率極低(di)(可以(yi)忽略(lve))。
高(gao)、特(te)異(yi)性(xing)強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經(jing)得(de)到廣大客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放(fang)心(xin),且我司(si)有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您(nin)進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)6(VB6)ELISA試(shi)劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠(shu)6(VB6)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價
大(da)鼠(VC)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat Vitamin C,VC ELISA Kit 購買我公(gong)司(si)ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高(gao)、特(te)異(yi)性(xing)強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經(jing)得(de)到廣大客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放(fang)心(xin),且我司(si)有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您(nin)進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)(VC)ELISA試(shi)劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠(shu)(VC)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價
大(da)鼠25羥(qiang)3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 購買我公(gong)司(si)ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高(gao)、特(te)異(yi)性(xing)強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經(jing)得(de)到廣大客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放(fang)心(xin),且我司(si)有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您(nin)進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)25羥(qiang)3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試(shi)劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠(shu)25羥(qiang)3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價
大(da)鼠透(tou)明(ming)質酸(HA)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 購買我公(gong)司(si)ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高(gao)、特(te)異(yi)性(xing)強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經(jing)得(de)到廣大客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放(fang)心(xin),且我司(si)有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您(nin)進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)透(tou)明(ming)質酸(HA)ELISA試(shi)劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠(shu)透(tou)明(ming)質酸(HA)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價
大(da)鼠骨成(cheng)型(xing)蛋白7(BMP-7)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 購買我公(gong)司(si)ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高(gao)、特(te)異(yi)性(xing)強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經(jing)得(de)到廣大客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放(fang)心(xin),且我司(si)有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您(nin)進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)骨成(cheng)型(xing)蛋白7(BMP-7)ELISA試(shi)劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠(shu)骨成(cheng)型(xing)蛋白7(BMP-7)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價
大(da)鼠淋巴細(xi)胞功(gong)能相關(guan)抗(kang)原3(LFA-3/CD58)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 購買我公(gong)司(si)ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高(gao)、特(te)異(yi)性(xing)強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經(jing)得(de)到廣大客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放(fang)心(xin),且我司(si)有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您(nin)進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)淋巴細(xi)胞功(gong)能相關(guan)抗(kang)原3(LFA-3/CD58)ELISA試(shi)劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠(shu)淋巴細(xi)胞功(gong)能相關(guan)抗(kang)原3(LFA-3/CD58)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價
BL21 電(dian)感受態(tai)細(xi)胞50ul*20 大(da)鼠糖化血(xue)紅蛋(dan)白A1c(GHbA1c)ELISA試(shi)劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 購買我公(gong)司(si)ELISA試(shi)劑盒保(bao)證(zheng)質(zhi)量,靈(ling)敏性高(gao)、特(te)異(yi)性(xing)強、重復(fu)性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已經(jing)得(de)到廣大客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放(fang)心(xin),且我司(si)有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您(nin)進(jin)行(xing)全線跟(gen)蹤。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)糖化血(xue)紅蛋(dan)白A1c(GHbA1c)ELISA試(shi)劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠(shu)糖化血(xue)紅蛋(dan)白A1c(GHbA1c)ELISA試(shi)劑盒報(bao)價