更(geng)新(xin)時間(jian):2025-11-29
BJ5183 電感受態(tai)細胞50ul*5是(shi)采用大(da)腸桿(gan)菌經特殊工藝處理(li)得到(dao)的(de)感受態(tai)細胞,可(ke)用於DNA 的(de)化學(xue)轉(zhuan)化。使用pUC19 質粒檢測,轉化(hua)效(xiao)率(lv)可(ke)達108個轉化子/μg質(zhi)粒DNA,-70℃保存3個月轉化效(xiao)率(lv)可(ke)保持(chi)在90%以上。
BJ5183 電感受態(tai)細胞50ul*5以下是的(de)訂購信(xin)息(xi)儲存條件(jian):-70℃凍存(cun)
操(cao)作方法:
1. 取(qu)-80℃保(bao)存的(de)農(nong)桿(gan)菌(jun)感受態(tai)於室溫或(huo)手(shou)心片(pian)刻(ke)待其(qi)部(bu)分(fen)融化,處(chu)於(yu)冰(bing)水(shui)混(hun)合(he)狀(zhuang)態(tai)時插(cha)入(ru)冰(bing)中(zhong)。
2.每(mei)100 μl感受態(tai)加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率(lv)較高(gao),*次(ci)使(shi)用前做(zuo)預(yu)實(shi)驗確(que)定(ding)所(suo)加(jia)質粒的(de)量),用手(shou)管(guan)底混(hun)勻(yun),依(yi)次(ci)於(yu)冰(bing)上(shang)靜(jing)置5分(fen)鐘、液氮5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴(yu)5分(fen)鐘、冰(bing)浴(yu)5分(fen)鐘。
BJ5183 電感受態(tai)細胞50ul*53. 加(jia)入700 μl無抗(kang)生(sheng)素的(de)LB或YEB液體培(pei)養基,於28℃振(zhen)蕩培(pei)養2~3小(xiao)時。
4. 6000 rpm離心壹(yi)分(fen)鐘收(shou)菌,留取100 μl左右上清(qing)輕輕(qing)吹打(da)重(zhong)懸(xuan)菌(jun)塊(kuai)塗(tu)布於含相應抗(kang)生(sheng)素的(de)LB或YEB平(ping)板(ban)上,倒(dao)置放(fang)於(yu)28℃培(pei)養箱培(pei)養2-3天(tian)
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 加(jia)入質(zhi)粒時體(ti)積(ji)不應(ying)大(da)於(yu)感受態(tai)體積的(de)1/10;質粒不純(chun)或(huo)存(cun)在(zai)乙(yi)醇等有(you)機(ji)物(wu)汙染(ran),轉化效率(lv)急(ji)劇(ju)下降(jiang);質粒增大(da)壹(yi)倍,轉化(hua)效(xiao)率(lv)下降(jiang)壹(yi)個數量級。
BJ5183 電感受態(tai)細胞50ul*52. 混(hun)入質(zhi)粒時應(ying)輕(qing)柔(rou)操(cao)作。轉化高(gao)濃(nong)度(du)的(de)質粒可相應減少終(zhong)用於塗(tu)板的(de)菌量(liang)。
3. 平(ping)板(ban)上陽性克(ke)隆(long)密(mi)度(du)過大(da)時,由於(yu)營(ying)養不(bu)足,陽性克(ke)隆(long)生(sheng)長(chang)變慢(man),菌落(luo)變(bian)小(xiao),為了(le)獲得大(da)的(de)菌落(luo),應(ying)減少質(zhi)粒用量。
4. 濃(nong)度(du)不應(ying)高(gao)於25 μg/ml,過高(gao)的(de)濃(nong)度(du)不利(li)於(yu)農(nong)桿(gan)菌(jun)生(sheng)長(chang),會(hui)降(jiang)低其(qi)生(sheng)長(chang)速度和轉化效率(lv)。本(ben)公(gong)司(si)感受態(tai)計算轉化(hua)效率(lv)時所(suo)用平(ping)板(ban)只含有(you)50 μg/ml kan,若所(suo)用平(ping)板(ban)含有(you)20 μg/ml rif則轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)降(jiang)低到(dao)1/2。
5. 培(pei)養基中加(jia)入的(de)目(mu)的(de)是防(fang)止(zhi)雜菌生長(chang)、篩選(xuan)農(nong)桿(gan)菌(jun);根(gen)據(ju)所(suo)用菌株(zhu)抗性(xing)加(jia)入(ru)Ti質(zhi)粒篩選(xuan)抗生(sheng)素可(ke)防止Ti質粒丟(diu)失,但Ti質粒篩選(xuan)抗生(sheng)素不(bu)利於農(nong)桿(gan)菌(jun)的(de)轉基因操(cao)作,所(suo)以壹(yi)般培(pei)養農(nong)桿(gan)菌(jun)時不(bu)考(kao)慮這(zhe)些(xie)抗(kang)生(sheng)素,Ti質粒丟(diu)失的(de)概率(lv)極低(可(ke)以忽略)。
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大(da)鼠(shu)白(bai)細(xi)胞分(fen)化(hua)抗(kang)原30(CD30)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱(cheng); Rat Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit 購買我(wo)公(gong)司(si)ELISA試劑盒保(bao)證質(zhi)量(liang),靈(ling)敏性高(gao)、特異性強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優(you)點已經得到廣(guang)大(da)客戶的(de)認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放心,且我(wo)司(si)有專(zhuan)門(men)的(de)售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)白(bai)細(xi)胞分(fen)化(hua)抗(kang)原30(CD30)ELISA試劑盒廠(chang)家 大(da)鼠(shu)白(bai)細(xi)胞分(fen)化(hua)抗(kang)原30(CD30)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)可(ke)溶(rong)性血管(guan)內皮細(xi)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱(cheng); Rat soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit 購買我(wo)公(gong)司(si)ELISA試劑盒保(bao)證質(zhi)量(liang),靈(ling)敏性高(gao)、特異性強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優(you)點已經得到廣(guang)大(da)客戶的(de)認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放心,且我(wo)司(si)有專(zhuan)門(men)的(de)售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)可(ke)溶(rong)性血管(guan)內皮細(xi)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒廠(chang)家 大(da)鼠(shu)可(ke)溶(rong)性血管(guan)內皮細(xi)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)1,3-βD葡(pu)葡(pu)糖(tang)苷(gan)酶(mei)(1,3-βD glucosidase)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱(cheng); Rat 1,3-βD glucosidase ELISA Kit 購買我(wo)公(gong)司(si)ELISA試劑盒保(bao)證質(zhi)量(liang),靈(ling)敏性高(gao)、特異性強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優(you)點已經得到廣(guang)大(da)客戶的(de)認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放心,且我(wo)司(si)有專(zhuan)門(men)的(de)售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)1,3-βD葡(pu)葡(pu)糖(tang)苷(gan)酶(mei)(1,3-βD glucosidase)ELISA試劑盒廠(chang)家 大(da)鼠(shu)1,3-βD葡(pu)葡(pu)糖(tang)苷(gan)酶(mei)(1,3-βD glucosidase)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)內(nei)分(fen)泌腺來源(yuan)的(de)血管(guan)內皮生(sheng)長(chang)因子(zi)(EG-VEGF)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱(cheng); Rat Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit 購買我(wo)公(gong)司(si)ELISA試劑盒保(bao)證質(zhi)量(liang),靈(ling)敏性高(gao)、特異性強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優(you)點已經得到廣(guang)大(da)客戶的(de)認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放心,且我(wo)司(si)有專(zhuan)門(men)的(de)售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)內(nei)分(fen)泌腺來源(yuan)的(de)血管(guan)內皮生(sheng)長(chang)因子(zi)(EG-VEGF)ELISA試劑盒廠(chang)家 大(da)鼠(shu)內(nei)分(fen)泌腺來源(yuan)的(de)血管(guan)內皮生(sheng)長(chang)因子(zi)(EG-VEGF)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒細胞趨(qu)化因子(zi)(ECF)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱(cheng); Rat eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit 購買我(wo)公(gong)司(si)ELISA試劑盒保(bao)證質(zhi)量(liang),靈(ling)敏性高(gao)、特異性強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優(you)點已經得到廣(guang)大(da)客戶的(de)認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放心,且我(wo)司(si)有專(zhuan)門(men)的(de)售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒細胞趨(qu)化因子(zi)(ECF)ELISA試劑盒廠(chang)家 大(da)鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒細胞趨(qu)化因子(zi)(ECF)ELISA試劑盒報(bao)價
BJ5183 電感受態(tai)細胞50ul*5 大(da)鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒細胞趨(qu)化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱(cheng); Rat Eotaxin 1 ELISA Kit 購買我(wo)公(gong)司(si)ELISA試劑盒保(bao)證質(zhi)量(liang),靈(ling)敏性高(gao)、特異性強、重(zhong)復性(xing)好(hao)等優(you)點已經得到廣(guang)大(da)客戶的(de)認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放心,且我(wo)司(si)有專(zhuan)門(men)的(de)售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒細胞趨(qu)化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒廠(chang)家 大(da)鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒細胞趨(qu)化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒報(bao)價
esion molecule 1,VCAM-1 ELISA :規(gui)格(ge);