BJ5183 感(gan)受(shou)態細(xi)胞100ul*10

BJ5183 感受(shou)態細(xi)胞100ul*10以下是(shi)的(de)訂(ding)購信(xin)息(xi)儲存(cun)條(tiao)件：-70℃凍(dong)存
操作(zuo)方(fang)法(fa):
1. 取-80℃保(bao)存的(de)農桿菌感受(shou)態於室溫或手心片(pian)刻待(dai)其(qi)部(bu)分(fen)融(rong)化，處(chu)於冰(bing)水混合狀態時插(cha)入冰(bing)中。
2.每(mei)100 μl感(gan)受(shou)態加入(ru)0.01-1 μg質粒DNA（轉化效(xiao)率較(jiao)高，*次(ci)使用前做預(yu)實驗確定所(suo)加(jia)質粒的(de)量(liang)），用手管底(di)混勻，依次(ci)於(yu)冰(bing)上(shang)靜(jing)置(zhi)5分鐘(zhong)、液(ye)氮(dan)5分(fen)鐘(zhong)、37℃水浴5分鐘(zhong)、冰(bing)浴5分鐘(zhong)。
3. 加入700 μl無(wu)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)，於28℃振(zhen)蕩培養(yang)2~3小(xiao)時(shi)。
BJ5183 感(gan)受(shou)態細(xi)胞100ul*104. 6000 rpm離(li)心壹分鐘(zhong)收菌(jun)，留取100 μl左(zuo)右(you)上清(qing)輕輕吹打重懸(xuan)菌(jun)塊(kuai)塗(tu)布(bu)於含(han)相應(ying)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB平板(ban)上，倒(dao)置(zhi)放於28℃培(pei)養(yang)箱(xiang)培養(yang)2-3天(tian)
註意事(shi)項
1. 加(jia)入質粒時(shi)體(ti)積(ji)不應(ying)大(da)於(yu)感受(shou)態體積(ji)的(de)1/10；質粒不(bu)純或存(cun)在(zai)乙醇等有機(ji)物汙(wu)染(ran)，轉化效(xiao)率急劇下(xia)降；質粒增(zeng)大(da)壹倍，轉化效(xiao)率下降壹個(ge)數(shu)量(liang)級(ji)。
2. 混入質粒時(shi)應(ying)輕柔操作(zuo)。轉化高(gao)濃(nong)度(du)的(de)質粒可相應(ying)減少終用於塗(tu)板(ban)的(de)菌量(liang)。
3. 平板(ban)上陽(yang)性(xing)克隆密(mi)度(du)過大時，由(you)於營(ying)養(yang)不(bu)足，陽性克隆生(sheng)長(chang)變(bian)慢，菌落變小，為了(le)獲得大(da)的(de)菌落，應(ying)減少質粒用量(liang)。
4. 濃(nong)度(du)不(bu)應(ying)高(gao)於(yu)25 μg/ml，過高的(de)濃(nong)度(du)不(bu)利於農(nong)桿菌生(sheng)長(chang)，會降低其(qi)生(sheng)長(chang)速(su)度(du)和轉化效(xiao)率。本公(gong)司感受(shou)態計(ji)算(suan)轉化效(xiao)率時所(suo)用平板(ban)只含(han)有50 μg/ml kan，若(ruo)所(suo)用平板(ban)含(han)有20 μg/ml rif則(ze)轉BJ5183 感受(shou)態細(xi)胞100ul*10化效(xiao)率降低到1/2。
5. 培養(yang)基(ji)中加(jia)入的(de)目(mu)的(de)是防(fang)止雜菌(jun)生(sheng)長(chang)、篩(shai)選農(nong)桿菌；根(gen)據(ju)所(suo)用菌株(zhu)抗(kang)性(xing)加入(ru)Ti質粒篩(shai)選抗(kang)生(sheng)素(su)可防(fang)止Ti質粒丟(diu)失(shi)，但Ti質粒篩(shai)選抗(kang)生(sheng)素(su)不(bu)利於農(nong)桿菌的(de)轉基(ji)因(yin)操作(zuo)，所(suo)以壹般培養(yang)農(nong)桿菌時不考(kao)慮這(zhe)些(xie)抗(kang)生(sheng)素(su)，Ti質粒丟(diu)失(shi)的(de)概率極(ji)低(可以忽略(lve))。

kit 購買我公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證質量(liang)，靈(ling)敏性高、特異(yi)性(xing)強(qiang)、重復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得到廣(guang)大客(ke)戶的(de)認可，您可放心，且(qie)我(wo)司有專(zhuan)門的(de)售後部(bu)門(men)對您進行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑(ji)盒廠家 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑(ji)盒報價(jia) 

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BJ5183 感受(shou)態細(xi)胞100ul*10 大(da)鼠(shu)白(bai)細(xi)胞分(fen)化抗(kang)原(yuan)30(CD30)ELISA試(shi)劑盒 :英文名稱(cheng); Rat Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit 購買我公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證質量(liang)，靈(ling)敏性高、特異(yi)性(xing)強(qiang)、重復性(xing)好(hao)等優點(dian)已(yi)經得到廣(guang)大客(ke)戶的(de)認可，您可放心，且(qie)我(wo)司有專(zhuan)門的(de)售後部(bu)門(men)對您進行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)白(bai)細(xi)胞分(fen)化抗(kang)原(yuan)30(CD30)ELISA試(shi)劑盒廠家 大鼠(shu)白(bai)細(xi)胞分(fen)化抗(kang)原(yuan)30(CD30)ELISA試(shi)劑盒報價(jia) 

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