DH10Bac 感受態細(xi)胞(bao)100ul*10

DH10Bac 感受態細(xi)胞(bao)100ul*10以下是(shi)的(de)訂(ding)購信(xin)息(xi)儲存(cun)條(tiao)件(jian)：-70℃凍存(cun)
操作方(fang)法(fa):
1. 取(qu)-80℃保存(cun)的(de)農桿(gan)菌(jun)感(gan)受態於室(shi)溫或(huo)手(shou)心(xin)片刻待其(qi)部分融(rong)化(hua)，處(chu)於冰(bing)水混合(he)狀(zhuang)態時(shi)插(cha)入(ru)冰(bing)中。
2.每(mei)100 μl感受態加入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒DNA（轉化(hua)效率(lv)較高(gao)，*次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)做(zuo)預實驗(yan)確(que)定所(suo)加質粒的(de)量(liang)），用手管(guan)底混勻，依次(ci)於冰(bing)上靜(jing)置(zhi)5分(fen)鐘(zhong)、液(ye)氮(dan)5分(fen)鐘、37℃水浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)、冰(bing)浴5分(fen)鐘。
DH10Bac 感受態細(xi)胞(bao)100ul*103. 加入(ru)700 μl無(wu)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或(huo)YEB液體培(pei)養基，於28℃振(zhen)蕩(dang)培(pei)養2~3小時(shi)。
4. 6000 rpm離心壹分鐘收(shou)菌(jun)，留(liu)取(qu)100 μl左右上清(qing)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打重懸(xuan)菌(jun)塊(kuai)塗布於含(han)相應抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或(huo)YEB平板上，倒置(zhi)放於28℃培(pei)養箱(xiang)培(pei)養2-3天(tian)
註(zhu)意事(shi)項
1. 加入(ru)質(zhi)粒時體(ti)積不應大於感(gan)受態體(ti)積(ji)的(de)1/10；質(zhi)粒不純或存(cun)在(zai)乙醇等有機物汙(wu)染(ran)，轉(zhuan)化(hua)效率(lv)急劇下(xia)降(jiang)；質(zhi)粒增大壹倍，轉化(hua)效率(lv)下降(jiang)壹個數量級(ji)。
2. 混入(ru)質(zhi)粒時應(ying)輕柔(rou)操作。轉(zhuan)化(hua)高(gao)濃度的(de)質(zhi)粒可相應減(jian)少終用(yong)於塗(tu)板的(de)菌(jun)量(liang)。
DH10Bac 感受態細(xi)胞(bao)100ul*103. 平板上陽性克(ke)隆密度過(guo)大時，由於營(ying)養不足，陽性克(ke)隆生(sheng)長(chang)變(bian)慢，菌(jun)落(luo)變小(xiao)，為(wei)了(le)獲(huo)得(de)大的(de)菌(jun)落(luo)，應減(jian)少質(zhi)粒用量(liang)。
4. 濃度不應高(gao)於25 μg/ml，過(guo)高(gao)的(de)濃度不利於農桿(gan)菌(jun)生(sheng)長(chang)，會(hui)降(jiang)低(di)其(qi)生(sheng)長(chang)速(su)度和轉(zhuan)化(hua)效率(lv)。本(ben)公(gong)司(si)感受態計算轉(zhuan)化(hua)效率(lv)時所(suo)用平板只含(han)有50 μg/ml kan，若(ruo)所(suo)用(yong)平(ping)板含(han)有20 μg/ml rif則轉化(hua)效率(lv)降(jiang)低(di)到(dao)1/2。
5. 培(pei)養基中(zhong)加入(ru)的(de)目(mu)的(de)是(shi)防(fang)止雜(za)菌(jun)生(sheng)長(chang)、篩(shai)選(xuan)農桿(gan)菌(jun)；根據(ju)所(suo)用菌(jun)株(zhu)抗性加入(ru)Ti質(zhi)粒篩選(xuan)抗生(sheng)素(su)可防(fang)止(zhi)Ti質粒丟失(shi)，但(dan)Ti質粒篩選(xuan)抗生(sheng)素(su)不利於農桿(gan)菌(jun)的(de)轉(zhuan)基因(yin)操作，所(suo)以壹般培(pei)養農桿(gan)菌(jun)時(shi)不考慮這(zhe)些抗(kang)生(sheng)素(su)，Ti質粒丟失(shi)的(de)概(gai)率極低(di)(可以忽(hu)略)。

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DH10Bac 感受態細(xi)胞(bao)100ul*10 大鼠(shu)基質(zhi)金屬蛋白(bai)酶抑(yi)制因(yin)子2(TIMP-2)ELISA試(shi)劑盒 :英文名(ming)稱; Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit 購買(mai)我(wo)公(gong)司(si)ELISA試(shi)劑盒保證(zheng)質(zhi)量，靈敏性(xing)高(gao)、特異(yi)性(xing)強(qiang)、重復性好(hao)等(deng)優點已(yi)經得到(dao)廣大客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可，您(nin)可放心，且(qie)我(wo)司(si)有專門的(de)售(shou)後部門對您(nin)進行全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格; 96T/48T 大鼠(shu)基質(zhi)金屬蛋白(bai)酶抑(yi)制因(yin)子2(TIMP-2)ELISA試(shi)劑盒廠家(jia) 大鼠(shu)基質(zhi)金屬蛋白(bai)酶抑(yi)制因(yin)子2(TIMP-2)ELISA試(shi)劑盒報價 

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