轉基因油(you)菜(cai)品(pin)系(xi)DP-073496-4核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒

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 產品(pin)名稱：轉基因油(you)菜(cai)品(pin)系(xi)DP-073496-4核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒
規格(ge)：48T   0.1PCR管
編號：BH-P97123
分類(lei)：PCR-熒光探(tan)針法(fa)
儲存條(tiao)件：-20℃避(bi)光保存，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)。
運輸(shu)：低溫(wen)、避(bi)光，快遞免(mian)費(fei)送(song)貨上門(men)。
產品(pin)特點：
◇高特(te)異(yi)性：與其(qi)他(ta)病毒(du)無交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)，無(wu)非特(te)異性(xing)擴增(zeng)；
◇高靈(ling)敏(min)度(du)：檢測(ce)靈(ling)敏(min)度(du)可達(da)10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操(cao)作簡便：該系(xi)列所(suo)有試(shi)劑(ji)均采(cai)用相同的(de)體系(xi)和條(tiao)件，可(ke)同時進行多(duo)個(ge)檢(jian)測；
◇高通(tong)量(liang)：多(duo)種雙(shuang)重PCR檢測(ce)以(yi)及三(san)重PCR檢測(ce)試(shi)劑盒。

準備(bei)物品(pin)：
清理液（A）                                   毫(hao)升
染色(se)液（t B）                                   微升(sheng)
稀釋液（C）                                   毫(hao)升
溶解液（tD）                                   毫(hao)升
產品(pin)說明書(shu)                                   1份
使(shi)用及效果：
PCR反(fan)應(ying)特(te)點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強(qiang)
PCR反(fan)應(ying)的(de)特異(yi)性決(jue)定因素為(wei)：
①引(yin)物與模(mo)板(ban)DNA特異(yi)正確的(de)結合(he)；
②堿基配對原則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠實性；
④靶基因的(de)特異(yi)性與保(bao)守性(xing)。
其(qi)中(zhong)引(yin)物與模(mo)板(ban)的(de)正確結(jie)合(he)是(shi)關(guan)鍵。引(yin)物與模(mo)板(ban)的(de)結合(he)及引(yin)物鏈(lian)的(de)延(yan)伸(shen)是(shi)遵(zun)循(xun)堿基配對原則(ze)的(de)。聚(ju)合酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠實性及Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐高(gao)溫(wen)性(xing)，使(shi)反(fan)應(ying)中(zhong)模(mo)板(ban)與引(yin)物的(de)結合(he)(復性(xing))可以(yi)在較(jiao)高(gao)的(de)溫(wen)度(du)下進行，結(jie)合(he)的(de)特異(yi)性大大增(zeng)加，被擴增(zeng)的(de)靶基因片段(duan)也就能(neng)保持(chi)很高(gao)的(de)正確度(du)。再通(tong)過(guo)選擇特異(yi)性和(he)保(bao)守性(xing)高(gao)的(de)靶基因區(qu)，其(qi)特(te)異性(xing)程度(du)就更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度(du)高
PCR產物的(de)生成量是以(yi)指數方式(shi)增(zeng)加的(de)，能(neng)將皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起始待測模(mo)板(ban)擴增(zeng)到微克(ke)(ug=10-6g)水平(ping)。能(neng)從100萬個(ge)細(xi)胞中檢出(chu)壹(yi)個(ge)靶細胞(bao)；在病毒(du)的(de)檢測(ce)中，PCR的(de)靈(ling)敏(min)度(du)可達(da)3個(ge)RFU(空(kong)斑(ban)形成單(dan)位)；在細(xi)菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小檢(jian)出(chu)率(lv)為(wei)3個(ge)細(xi)菌(jun)。
(3) 簡便、快速(su)
PCR反(fan)應(ying)用(yong)耐高(gao)溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹(yi)次性地(di)將反(fan)應(ying)液加好後，即在(zai)DNA擴增(zeng)液和(he)水浴鍋(guo)上(shang)進行變(bian)性(xing)-退(tui)火-延(yan)伸(shen)反(fan)應(ying)，壹(yi)般在2～4 小時(shi)完成擴增(zeng)反(fan)應(ying)。擴(kuo)增(zeng)產物壹(yi)般用電泳(yong)分析(xi)，不(bu)壹(yi)定要用同位素，無(wu)放(fang)射(she)性(xing)汙染、易推(tui)廣。
(4) 對標(biao)本的(de)純(chun)度(du)要求(qiu)低
不(bu)需要分離病(bing)毒(du)或(huo)細(xi)菌(jun)及培(pei)養細胞(bao)，DNA 粗制品(pin)及總RNA均可(ke)作為(wei)擴增(zeng)模(mo)板(ban)。可直(zhi)接用臨(lin)床(chuang)標本(ben)如血(xue)液、體腔液、洗(xi)嗽(sou)液、毛(mao)發、細胞(bao)、活PCR技術(shu)概(gai)論。
CD1D & B2M Others Human  CD1D & B2M Heterodimer 細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 1酸鋅(xin)四(si)水(>98%,BR)Zinc phosphate tetrahydrate>98%,BR

非洲(zhou)綠(lv)猴腎(shen)細(xi)胞(bao)系(xi)/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3硫化(hua)鋅(>98%, Ind Grade)Zinc sulfide>98%, Ind Grade

大鼠(shu)癌(ai)細(xi)胞(bao);SHZ-88 肝癌(ai)細(xi)胞(bao)，BEL-7405細胞(bao) MEF細胞(bao)，早(zao)代小(xiao)鼠(shu)胚胎成纖維(wei)細胞(bao)氧(yang)化(hua)鋯(>98%,BC)Zirconium (IV) oxide>98%,BC

MG-63, 骨(gu)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao) Human氯氧(yang)化(hua)鋯八水(>98%,BC)Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate>98%,BC

CEACAM5 Others Human  CEACAM5 / CD66e 細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 氫(qing)氧(yang)化(hua)鋯Zirconium hydroxide hydrateBR
HA Others H5N1 甲(jia)型流(liu)感(gan) H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 鹽酸(suan)鹽(yan)含量(liang)大於98.5%Norfloxacin HCl

(含10mL 酶(mei)解緩(huan)沖(chong)液) 1mL鹽酸(suan)鹽(yan)（）HPLC>98%,Norfloxacin HCl

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病(bing)毒(du)構建(jian)穩定株(zhu))腦神(shen)經(jing)膠質瘤細(xi)胞(bao) U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活(huo)血(xue)清+2μg/ml puromycin丙(bing)谷(gu)二(er)肽(tai),L-丙(bing)-谷(gu)二(er)肽(tai),力肽(tai)>98%,BRAla-Gln

IL21 Protein Rat 重組(zu)大鼠(shu) IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 標簽(qian))L-甲(jia)酯二(er)鹽(yan)酸>99%,BRH-Arg-OMe·2HCl

表皮(pi)角(jiao)質細胞(bao)-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細胞(bao)名稱 種屬(shu)D-丙(bing)氨(an)酰胺(an)鹽(yan)酸鹽>98%,BRD-Alaninamide
轉基因油(you)菜(cai)品(pin)系(xi)DP-073496-4核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒KM小鼠(shu)未分化(hua)神經(jing)膠質瘤瘤株(zhu);B222',3'-雙脫(tuo)氧(yang)腺苷(gan)(ddA)>98%,BRDideoxyadenosine

ZR-75-30細胞(bao)，癌(ai)細(xi)胞(bao) 食管癌(ai)細(xi)胞(bao),TE-11細胞(bao) 中國(guo)倉(cang)鼠(shu)卵巢(chao)細胞(bao)K1(亞系(xi)克隆(long));CHO-K1>98.5%,ARXylitol

小鼠(shu)誘(you)導(dao)性多(duo)潛(qian)能(neng)幹(gan)細(xi)胞;PUMC-mips-B6()HPLC≥98%，Xylitol

ERBB2 Others Human  ErbB2 / HER2 細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 2',3'-二(er)脫(tuo)氧(yang)胸苷(gan)(ddT)>98%,進分2',3'-Dideoxythymidine

內皮(pi)細(xi)胞總(zong)RNAHDLEC NA7,8-二(er)氫(qing)-L-生物蝶呤(ling)美國進(jin)口(kou)7,8-Dihydro-L-biopterin
檢測(ce)步(bu)驟：
壹(yi)、 試劑(ji)的(de)準備(bei)
從試(shi)劑(ji)盒中取出(chu)熒光PCR反(fan)應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合物(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融(rong)化(hua)並振蕩混(hun)勻(yun)後，10000rpm離心10s。
設(she)所(suo)需要的(de)PCR反(fan)應(ying)管管數為(wei)N(N=樣本(ben)數+1管陰性(xing)對照(zhao)+1管陽性(xing)對照(zhao))，每個(ge)測(ce)試反(fan)應(ying)體系(xi)配制如(ru)下表：
試劑(ji) 每個(ge)反(fan)應(ying)加入(ru)的(de)量 N個(ge)反(fan)應(ying)加入(ru)的(de)量
熒光PCR反(fan)應(ying)液 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算好各(ge)試(shi)劑(ji)的(de)使(shi)用量(liang)，加入(ru)壹(yi)適當體積(ji)潔(jie)凈(jing)離心管中，充(chong)分混(hun)勻(yun)，10000rpm離心10s，向設(she)定的(de)N個(ge)PCR反(fan)應(ying)管中分別(bie)加入(ru)15μL熒光PCR反(fan)應(ying)液，向每管中加入(ru)處(chu)理後樣品(pin)或(huo)陰(yin)性對照(zhao)(NTC)和陽(yang)性(xing)對照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離(li)心10秒(miao)。
7.2 qPCR反(fan)應(ying)條(tiao)件
將各(ge)反(fan)應(ying)管放入(ru)定量(liang)PCR儀器的(de)反(fan)應(ying)槽(cao)內。
循(xun)環(huan)條(tiao)件:
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預變(bian)性(xing) 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增(zeng) 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸(shen)時(shi)收(shou)集(ji)熒光信(xin)號。報(bao)告(gao)基團：設(she)置(zhi)為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基團：NONE，請勿選擇ROX參比(bi)熒光。