更新時間:2025-11-29
*0 感(gan)受態(tai)細胞(bao)100ul*20是采用(yong)大(da)腸桿(gan)菌經(jing)特殊工(gong)藝處(chu)理(li)得(de)到的感(gan)受態(tai)細胞(bao),可用於(yu)DNA 的化(hua)學轉(zhuan)化(hua)。使(shi)用(yong)pUC19 質(zhi)粒(li)檢測(ce),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)可達108個轉(zhuan)化(hua)子(zi)/μg質(zhi)粒(li)DNA,-70℃保存3個月轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)可保持(chi)在90%以上。
*0 感(gan)受態(tai)細胞(bao)100ul*20以下(xia)是的訂購(gou)信息(xi)儲(chu)存條(tiao)件:-70℃凍(dong)存
操(cao)作(zuo)方法(fa):
1. 取(qu)-80℃保存的農(nong)桿(gan)菌感(gan)受態(tai)於(yu)室(shi)溫(wen)或手心片(pian)刻待其部分融(rong)化(hua),處(chu)於(yu)冰(bing)水(shui)混(hun)合狀態(tai)時插(cha)入(ru)冰(bing)中(zhong)。
2.每(mei)100 μl感(gan)受態(tai)加(jia)入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒(li)DNA(轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)較高(gao),*次使用前(qian)做(zuo)預(yu)實(shi)驗確定所(suo)加(jia)質(zhi)粒(li)的量),用手管(guan)底(di)混(hun)勻(yun),依次於(yu)冰(bing)上靜(jing)置(zhi)5分(fen)鐘(zhong)、液(ye)氮(dan)5分鐘(zhong)、37℃水浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)、冰(bing)浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)。
3. 加(jia)入(ru)700 μl無(wu)抗生素(su)的LB或YEB液(ye)體培(pei)養基(ji),於(yu)28℃振蕩培(pei)養2~3小時。
4. 6000 rpm離(li)心(xin)壹分(fen)鐘(zhong)收菌,留(liu)取100 μl左(zuo)右上清(qing)輕(qing)輕吹(chui)打重(zhong)懸菌塊塗布於(yu)含(han)相(xiang)應抗生素(su)的LB或YEB平板(ban)上,倒(dao)置(zhi)放於(yu)28℃培(pei)養箱(xiang)培(pei)養2-3天
*0 感(gan)受態(tai)細胞(bao)100ul*20註意(yi)事(shi)項
1. 加(jia)入(ru)質(zhi)粒(li)時體積不(bu)應大於(yu)感(gan)受態(tai)體積的1/10;質(zhi)粒(li)不純或(huo)存在乙醇等(deng)有(you)機(ji)物(wu)汙(wu)染(ran),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)急劇下(xia)降(jiang);質(zhi)粒(li)增大(da)壹倍(bei),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)下(xia)降(jiang)壹個數(shu)量級。
2. 混(hun)入(ru)質(zhi)粒(li)時應輕柔(rou)操(cao)作(zuo)。轉(zhuan)化(hua)高(gao)濃度(du)的質(zhi)粒(li)可相(xiang)應減(jian)少終用於(yu)塗板(ban)的菌量。
3. 平板(ban)上陽(yang)性(xing)克(ke)隆(long)密(mi)度(du)過大(da)時,由(you)於(yu)營(ying)養(yang)不足(zu),陽(yang)性(xing)克(ke)隆(long)生長(chang)變(bian)慢(man),菌落變(bian)小(xiao),為了獲得(de)大的菌落,應減(jian)少質(zhi)粒(li)用量。
4. 濃度(du)不(bu)應高(gao)於(yu)25 μg/ml,過(guo)高(gao)的濃度(du)不(bu)利於(yu)農(nong)桿(gan)菌生長(chang),會(hui)降(jiang)低其生長(chang)速(su)度(du)和(he)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)。本公司(si)感(gan)受態(tai)計(ji)算(suan)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)時所(suo)用(yong)平板(ban)只(zhi)含(han)有(you)50 μg/ml kan,若所(suo)用平板(ban)含有(you)20 μg/ml rif則(ze)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)降(jiang)低到1/2。
*0 感(gan)受態(tai)細胞(bao)100ul*205. 培(pei)養基(ji)中(zhong)加(jia)入(ru)的目的是防(fang)止雜(za)菌生長(chang)、篩(shai)選(xuan)農(nong)桿(gan)菌;根(gen)據(ju)所用(yong)菌株抗(kang)性(xing)加(jia)入(ru)Ti質(zhi)粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生素(su)可防(fang)止Ti質(zhi)粒(li)丟失,但(dan)Ti質(zhi)粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生素(su)不利於(yu)農(nong)桿(gan)菌的轉(zhuan)基(ji)因(yin)操作(zuo),所以(yi)壹般培(pei)養農(nong)桿(gan)菌時(shi)不(bu)考慮這些(xie)抗(kang)生素(su),Ti質(zhi)粒(li)丟失的概率(lv)極低(可以忽(hu)略(lve))。
性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶的認可,您(nin)可放心,且(qie)我(wo)司有(you)專門的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 兔主(zhu)要(yao)組織相(xiang)容性(xing)復(fu)合體Ⅱ類(lei)(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 兔主(zhu)要(yao)組織相(xiang)容性(xing)復(fu)合體Ⅱ類(lei)(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒報價
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*0 感(gan)受態(tai)細胞(bao)100ul*20 兔子(zi)白(bai)介素(su)3(IL-3)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rabbit Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司(si)ELISA試劑盒保證(zheng)質(zhi)量,靈敏性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶的認可,您(nin)可放心,且(qie)我(wo)司有(you)專門的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全線跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 兔子(zi)白(bai)介素(su)3(IL-3)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 兔子(zi)白(bai)介素(su)3(IL-3)ELISA試劑盒報價
兔子(zi)白(bai)介素(su)4(IL-4)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; rabbit Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司(si)ELISA試劑盒保證(zheng)質(zhi)量,靈敏性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶的認可