更新時間(jian):2025-11-29
DH5α 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*100菌株(zhu)壹(yi)種(zhong)常(chang)用於質(zhi)粒克隆(long)的(de)菌(jun)株。其φ80lacZΔM15基(ji)因(yin)的(de)產(chan)物可與(yu)pUC載體(ti)編(bian)碼的(de)b-半(ban)乳糖苷酶氨基(ji)端(duan)實(shi)現(xian)a互(hu)補,可用於藍(lan)白斑(ban)篩選。recA1和endA1 的(de)突(tu)變有利於克隆(long)DNA 的(de)穩定和高(gao)純度(du)質(zhi)粒DNA的(de)提(ti)取(qu)。
以下是(shi)DH5α 感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*100的(de)訂購(gou)信(xin)息(xi)儲存條件(jian):-70℃凍(dong)存
操(cao)作(zuo)方(fang)法:
1. 取(qu)-80℃保存的(de)農(nong)桿菌感受(shou)態於室溫或手心(xin)片刻(ke)待(dai)其部分(fen)融化,處(chu)於冰水(shui)混(hun)合狀(zhuang)態時插(cha)入(ru)冰中。
2.每(mei)100 μl感(gan)受(shou)態加入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒DNA(轉化(hua)效率較(jiao)高(gao),*次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)做(zuo)預(yu)實驗確(que)定所加質(zhi)粒的(de)量(liang)),用手管(guan)底(di)混(hun)勻(yun),依次(ci)於冰上(shang)靜(jing)置5分鐘、液氮5分鐘(zhong)、37℃水(shui)浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)、冰浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)。
3. 加入(ru)700 μl無抗生素(su)的(de)LB或YEB液體(ti)培(pei)養基(ji),於28℃振蕩(dang)培養2~3小(xiao)時。
4. 6000 rpm離(li)心(xin)壹(yi)分(fen)鐘(zhong)收菌(jun),留(liu)取(qu)100 μl左(zuo)右上(shang)清(qing)輕輕吹(chui)打(da)重(zhong)懸(xuan)菌(jun)塊(kuai)塗布(bu)於含相(xiang)應(ying)抗生素(su)的(de)LB或YEB平板上(shang),倒(dao)置放於28℃培養箱(xiang)培養2-3天(tian)
DH5α 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*100註(zhu)意(yi)事項
1. 加入(ru)質(zhi)粒時體(ti)積不(bu)應(ying)大於感受(shou)態體(ti)積的(de)1/10;質(zhi)粒不(bu)純或存在(zai)乙醇(chun)等有機(ji)物汙(wu)染(ran),轉化(hua)效率急(ji)劇(ju)下降;質(zhi)粒增大壹(yi)倍,轉化效率下降壹(yi)個(ge)數(shu)量級(ji)。
2. 混(hun)入(ru)質(zhi)粒時應(ying)輕柔操(cao)作(zuo)。轉化(hua)高(gao)濃度(du)的(de)質(zhi)粒可相(xiang)應(ying)減少終(zhong)用(yong)於塗板的(de)菌(jun)量。
3. 平板上(shang)陽(yang)性(xing)克隆(long)密(mi)度(du)過(guo)大時,由(you)於營養不(bu)足,陽性(xing)克隆(long)生(sheng)長變慢,菌落(luo)變小(xiao),為(wei)了獲(huo)得大的(de)菌(jun)落(luo),應(ying)減少質(zhi)粒用量(liang)。
4. 濃度(du)不(bu)應(ying)高(gao)於25 μg/ml,過高(gao)的(de)濃度(du)不(bu)利於農(nong)桿菌生長,會(hui)降低(di)其生(sheng)長速(su)度(du)和轉化(hua)效率。本(ben)公(gong)司(si)感(gan)受(shou)態計算(suan)轉(zhuan)化(hua)效率時所(suo)用平板只(zhi)含有(you)50 μg/ml kan,若所用平板含(han)有20 μg/ml rif則(ze)轉(zhuan)化(hua)效率降低(di)到1/2。
5. 培(pei)養基(ji)中加入(ru)的(de)目的(de)是(shi)防(fang)止(zhi)雜菌(jun)生(sheng)長、篩(shai)選農(nong)桿菌;根(gen)據(ju)所用(yong)菌株(zhu)抗性(xing)加入(ru)Ti質(zhi)粒篩選抗生素可(ke)防(fang)止(zhi)Ti質(zhi)粒丟失,但Ti質(zhi)粒篩選抗生素不(bu)利於農(nong)桿菌的(de)轉(zhuan)基(ji)因(yin)操(cao)作(zuo),所以壹(yi)般(ban)培(pei)養農(nong)桿菌時不(bu)考慮這些(xie)抗生(sheng)素,Ti質(zhi)粒丟失的(de)概(gai)率極(ji)低(di)(可以忽略)。
載脂(zhi)蛋(dan)白C3抗(kang)體(ti) CTSH ELISA Kit 組織蛋(dan)白酶H(CTSH)ELISA試劑盒
載脂(zhi)蛋(dan)白E4抗(kang)體(ti) Cath G Ab ELISA Kit 組織蛋(dan)白酶G自身抗體(Cath G Ab)ELISA試劑盒
自噬相關(guan)基(ji)因(yin)AMBRA1抗(kang)體 cath-G ELISA Kit 組織蛋(dan)白酶G(cath-G)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化自噬相關(guan)蛋(dan)白4C抗(kang)體(ti) cath-D ELISA Kit 組織蛋(dan)白酶D(cath-D)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化自噬相關(guan)蛋(dan)白4C抗(kang)體(ti) CTSC ELISA Kit 組織蛋(dan)白酶C(CTSC)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化細胞(bao)雕亡(wang)信(xin)號(hao)調節激(ji)酶1抗體(ti) HAT ELISA Kit 組蛋(dan)白乙(yi)酰化酶(HAT)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化失調癥蛋(dan)白1抗(kang)體(ti) HDAC2 ELISA Kit 組蛋(dan)白脫(tuo)乙酰化酶2(HDAC2)ELISA試劑盒
脊(ji)髓小(xiao)腦失調癥蛋(dan)白1抗(kang)體(ti) HDAC3 ELISA Kit 組蛋(dan)白去(qu)乙(yi)酰化酶3(HDAC3)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化APP澱粉(fen)樣(yang)肽(tai)前(qian)體(ti)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) HDAC ELISA Kit 組蛋(dan)白去(qu)乙(yi)酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化細胞(bao)雕亡(wang)信(xin)號(hao)調節激(ji)酶1抗體(ti) SETD7 ELISA Kit 組蛋(dan)白賴氨酸N-甲基(ji)轉(zhuan)移(yi)酶SETD7(SETD7)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化細胞(bao)雕亡(wang)信(xin)號(hao)調節激(ji)酶1抗體(ti) H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B ELISA Kit 組蛋(dan)白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化活化(hua)復制因(yin)子(zi)2抗(kang)體 histon-H2b ELISA Kit 組蛋(dan)白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化鈉鉀(jia)ATP酶蛋(dan)白a1抗(kang)體(ti) HIS ELISA Kit 組胺(HIS)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化鈉鉀(jia)ATP酶蛋(dan)白a1抗(kang)體(ti) PCX ELISA Kit 足細(xi)胞標記(ji)蛋(dan)白/足(zu)盂(yu)蛋(dan)白(PCX)ELISA試劑盒
乙(yi)酰羧(suo)化酶抗體(ti) tPSA ELISA Kit 總(zong)前(qian)列(lie)腺(xian)特異抗(kang)原(tPSA)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化乙酰羧(suo)化酶抗體(ti) TPS ELISA Kit 總(zong)蛋(dan)白S(TPS)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化Ack1抗體(ti) TPC ELISA Kit 總(zong)蛋(dan)白C(TPC)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化腺(xian)苷(gan)單磷酸(suan)活化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶α1抗體(ti) TBA ELISA Kit 總(zong)膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化腺(xian)苷(gan)單磷酸(suan)活化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶β1抗體(ti) NK ELISA Kit 自然殺傷細(xi)胞(bao)(NK)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化間變型淋巴(ba)瘤激酶抗體(ti) NRAMP-2 ELISA Kit 自然抗性(xing)相關(guan)巨噬細胞蛋(dan)白2(NRAMP-2)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化毛細(xi)血管(guan)擴張(zhang)性(xing)共濟失調癥突變蛋(dan)白抗(kang)體(ti) NRAMP-1 ELISA Kit 自然抗性(xing)相關(guan)巨噬細胞蛋(dan)白1(NRAMP-1)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化三磷酸(suan)腺(xian)檸(ning)檬酸(suan)裂解酶抗體(ti) Pax ELISA Kit 樁(zhuang)蛋(dan)白(Pax)ELISA試劑盒
磷酸(suan)化ATR抗體(ti) TF ELISA Kit 轉(zhuan)移(yi)因(yin)子(zi)(TF)ELISA試劑盒
細(xi)胞核(he)重(zhong)定位(wei)及紡(fang)錘(chui)體檢查(zha)點蛋(dan)白AMN1抗(kang)體(ti) TFR/CD71 ELISA Kit 轉鐵(tie)蛋(dan)白受(shou)體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
天(tian)連接(jie)糖基(ji)化(hua)11抗(kang)體(ti) TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B ELISA Kit 轉錄中介(jie)因(yin)子(zi)1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)ELISA試劑盒
ACTR2 激(ji)活素(su)受(shou)體2A抗(kang)體
Activin Receptor Type IIB 激活素(su)受(shou)體2B抗(kang)體
C2orf88 2號(hao)染(ran)色體(ti)開放閱讀(du)框(kuang)88抗體
ARHGEF18 G蛋(dan)白偶聯(lian)受(shou)體ARHGEF18抗(kang)體
Activin A Receptor Type IB 激活素(su)受(shou)體1B抗(kang)體
ARA24 雄(xiong)激(ji)素(su)受(shou)體相(xiang)關(guan)蛋(dan)白24抗(kang)體(ti)
Amyloid Precursor Protein 澱粉(fen)樣(yang)肽(tai)前(qian)體(ti)蛋(dan)白抗(kang)體(ti)
ADCY2 腺(xian)苷(gan)酸環(huan)化(hua)酶2抗體(ti)
APOC3 載脂(zhi)蛋(dan)白C3抗(kang)體(ti)
Apolipoprotein E4 載脂(zhi)蛋(dan)白E4抗(kang)體(ti)
AMBRA1 自噬相關(guan)基(ji)因(yin)AMBRA1抗(kang)體
Phospho-ATG4C 磷酸(suan)化自噬相關(guan)蛋(dan)白4C抗(kang)體(ti)
Phospho-ATG4C 磷酸(suan)化自噬相關(guan)蛋(dan)白4C抗(kang)體(ti)
phospho-ASK1 磷酸(suan)化細胞(bao)雕亡(wang)信(xin)號(hao)調節激(ji)酶1抗體(ti)
phospho-ATXN1 磷酸(suan)化失調癥蛋(dan)白1抗(kang)體(ti)
DH5α 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*100phospho-Amyloid Precursor Protein 磷酸(suan)化APP澱粉(fen)樣(yang)肽(tai)前(qian)體(ti)蛋(dan)白抗(kang)體(ti)
phospho-ASK1 磷酸(suan)化細胞(bao)雕亡(wang)信(xin)號(hao)調節激(ji)酶1抗體(ti)
phospho-ASK1 磷酸(suan)化細胞(bao)雕亡(wang)信(xin)號(hao)調節激(ji)酶1抗體(ti)
phospho-ATF2 磷酸(suan)化活化(hua)復制因(yin)子(zi)2抗(kang)體
Phospho-ATP1A1 磷酸(suan)化鈉鉀(jia)ATP酶蛋(dan)白a1抗(kang)體(ti)
Phospho-ATP1A1 磷酸(suan)化鈉鉀(jia)ATP酶蛋(dan)白a1抗(kang)體(ti)