GM12878人B淋(lin)巴(ba)細胞

公(gong)司產(chan)品(pin)僅(jin)供科研研究使用、不得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹次；

2）添加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培養(yang)箱中(zhong)培(pei)養；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹次；

2）添加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入培養(yang)液(ye)終

止消(xiao)化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並放(fang)置(zhi)於凍存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞凍存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序

降溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yang)凍存(cun)處理(li)僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品(pin)說明書(shu)為主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸液(ye)的凍存(cun)管在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培養基混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下離心(xin)3 min，棄(qi)去上清液(ye)，加1-2 mL培養基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞懸液(ye)加入含適(shi)量培養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細胞懸液(ye)加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜）。第(di)二天(tian)換(huan)液(ye)並檢查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如果細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培養上清，用不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於37℃培養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情況而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯微鏡下觀(guan)察(cha)細胞消化(hua)情況，若(ruo)細胞大部分(fen)變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸液(ye)按1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍存(cun)：待細胞生長(chang)狀態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行細胞凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細胞及細胞培養(yang)液(ye)，裝入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下離心(xin)4 min，棄(qi)去上清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞計數(shu)。

b、根據細胞數量加入無血(xue)清細胞凍存(cun)液(ye)，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支凍存管凍存1mL細胞懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌儲存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置(zhi)以便下次拿取。

公(gong)司正(zheng)在出售的產(chan)品(pin)：

腎(shen)動(dong)脈內(nei)皮(pi)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml) 大鼠吲(yin)哚胺2,3-雙(shuang)加氧酶(IDO)ELISA試劑(ji)盒 HBeAg(立可讀) 乙(yi)型肝(gan)炎(yan)e抗原 96T

MyoGEF： 肌球(qiu)蛋(dan)白相(xiang)互作(zuo)用(yong)G蛋(dan)白交換因子(zi)抗體(ti) 小鼠肺(fei)腺癌(ai)細胞系;LA795

HCC38(人導(dao)管癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 前脂(zhi)肪細胞培養(yang)基PAM 大鼠音(yin)猬(wei)因子(zi)(SHH)ELISA試劑(ji)盒 HBeAb(立可讀) 乙(yi)型肝(gan)炎(yan)e抗體(ti) CM-R086大鼠真(zhen)皮(pi)成纖維細胞培養(yang)基100mL

IGF2BP2 Protein Human 重(zhong)組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋(dan)白 (His & GST 標(biao)簽(qian)) 大鼠抑(yi)制(zhi)素結(jie)合蛋白(INHBP)ELISA試劑(ji)盒 HBcAb(立可讀) 乙(yi)型肝(gan)炎(yan)核(he)心(xin)抗體(ti) VDR Others Human 人 VDR / NR1I1 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

大鼠腎(shen)足(zu)突細胞培養(yang)基 100mL 大鼠抑(yi)制(zhi)素結(jie)合蛋白(INHBP)ELISA 試劑(ji)盒 HBcAb(IgM) 乙(yi)型肝(gan)炎(yan)核(he)心(xin)抗體(ti) Caki-1, 人腎(shen)透(tou)明細胞癌(ai)皮膚(fu)轉移(yi)細胞 肌母(mu)細胞,L-6TG細胞 Cates-1B(人淋(lin)巴(ba)胚(pei)胎性癌(ai)細胞)

SF767(人腦瘤(liu)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人抗副流(liu)感(gan)病(bing)毒IgG抗體(ti)(ai-PIV IgG )ELISA 試劑(ji)盒 NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 合成酶-3(抗原) 0.5mg

HPV18 E6 protein： 人類(lei)狀瘤(liu)病(bing)毒18 E6抗體(ti) CD40LG Others Canine 狗(gou) CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

SD大鼠骨髓間(jian)質(zhi)幹(gan)細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells 人抗風疹病(bing)毒IgM抗體(ti)(ai-RV IgM)ELISA 試劑(ji)盒 NPY ( Neuropeptide Y) 神(shen)經(jing)肽 Y(抗原) 0.5mg

HPV16-E7： 人類(lei)狀瘤(liu)病(bing)毒16-E7抗體(ti) 兔(tu)腎細胞;RK-13 白血(xue)病(bing)細胞，KG-1細胞 MFC-GFP細胞，綠色熒光蛋白標(biao)記(ji)小鼠前(qian)胃(wei)癌(ai)細胞

IL25 Others Rat 大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 人抗風疹病(bing)毒IgG抗體(ti)(ai-RV IgG)ELISA 試劑(ji)盒 NR2B (Glutamate receptor) 谷酸受體(ti)(抗原) 0.5mg

GM12878人B淋(lin)巴(ba)細胞大鼠海馬(ma)趾星(xing)形(xing)膠(jiao)質(zhi)細胞(RAh)(5×105) ACHN, 人腎(shen)細胞腺癌(ai)細胞 Human 大鼠肌鈣(gai)蛋(dan)白Ⅰ(CTnⅠ)ELISA試劑(ji)盒 RNP-Ab(Human anti-ribonucleo protein Antibody)  人抗核糖核蛋白抗體(ti) 人毛(mao)細胞裂解(jie)物(wu)HHDPCL

FIGF Protein Mouse 重(zhong)組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽(qian)) 大鼠饑(ji)餓(e)素/肥胖抑制(zhi)素前激素原(GHRL)ELISA試劑(ji)盒 n-DNA-Ab(Human natural deoxyribonucleic acid antibody)  人抗天(tian)然(ran)脫氧核(he)糖核酸抗體(ti) DDC Others Human 人 DOPA Decarboxylase / DDC 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

Hs 578T 人癌(ai)細胞 大鼠饑(ji)餓(e)素(GHRL)ELISA試劑(ji)盒 RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand)  小鼠核(he)因子(zi)κB受(shou)體(ti)活(huo)化(hua)因子(zi)配基 96T

PTPH1： 蛋(dan)白酪酸(suan)0酸酶H1抗體(ti) EB-3[EB3]細胞，人淋(lin)巴(ba)樣(yang)Butt淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細胞 人腎(shen)透(tou)明細胞腺癌(ai)細胞,786-O細胞 前脂(zhi)肪細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

SLC3A2 Others Mouse 小鼠 SLC3A2 / CD98 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠饑(ji)餓(e)激素(GHRL)ELISA試劑(ji)盒 PF-4/CXCL4  大鼠血(xue)小板(ban)因子(zi)4 96T

三、培養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到細胞後(hou)首先觀察(cha)細胞瓶(ping)是否完好(hao)，培養(yang)液(ye)是否有漏(lou)液(ye)、渾濁等現象，若(ruo)有上述(shu)現象 發(fa)生請及(ji)時(shi)和(he)我們聯(lian)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書(shu)，了解(jie)細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培養(yang)基、血(xue)清比例、所需 細胞因子(zi)等，確(que)保(bao)細胞培養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培(pei)養(yang)條件不(bu)壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞出現問題，責(ze)任(ren)由 客戶自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細胞瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題，部分(fen)細胞由於溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成碎片(pian)，是正(zheng)常現象。觀(guan)察好(hao)細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以消化(hua)，懸浮(fu)細胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的培(pei)養(yang)基重(zhong)懸 細胞，並接(jie)種到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同條件的(de)培養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收到(dao)細胞後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細胞照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便於(yu)和(he)我司技(ji)術部溝(gou)通 交流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的原因，個別敏感(gan)細胞會出現不穩(wen)定(ding)的情況，請及(ji)時(shi)和(he)我們聯(lian)系，告知(zhi)細胞 的具(ju)體(ti)情況，以便我(wo)們的技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪直(zhi)至問題解(jie)決。

7. 該細胞僅(jin)供科研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的(de)培養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來培(pei)養(yang)細胞，請換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明書(shu)細胞培 養(yang)條件新(xin)配制的培養(yang)基來培(pei)養(yang)細胞。     收到(dao)細胞後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。