豬免疫(yi)球蛋白(bai)Eelisa試(shi)劑(ji)盒(he)哪個牌(pai)子(zi)好(hao)

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     動(dong)物(wu)血清(qing)：內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)血清(qing)、GIBCO胎(tai)牛清、HyClone。動(dong)物(wu)血清(qing)：內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)血清(qing)、GIBCO胎(tai)牛清、HyClone。
     細胞(bao)：*細(xi)胞(bao)、正常細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)耐藥細(xi)胞(bao)。細(xi)胞(bao)：*細(xi)胞(bao)、正常細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)耐藥細(xi)胞(bao)。
豬免疫(yi)球蛋白(bai)Eelisa試(shi)劑(ji)盒(he)哪個牌(pai)子(zi)好(hao)註(zhu)意事(shi)項
1.試(shi)劑(ji)盒(he)從冷(leng)藏(zang)環(huan)境中(zhong)取出應(ying)在室溫平(ping)衡(heng) 15-30 分鐘(zhong)後方可(ke)使用，酶標(biao)包(bao)被板開(kai)封後如(ru)未(wei)用完，板(ban)條(tiao)應(ying)裝入(ru)密封袋(dai)中(zhong)保存。
2.濃洗滌液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)有結(jie)晶析出，稀釋時可(ke)在水浴中(zhong)加溫(wen)助(zhu)溶，洗滌時不影(ying)響(xiang)結(jie)果。
3.各(ge)步(bu)加(jia)樣(yang)均(jun)應(ying)使用加樣(yang)器(qi)，並經(jing)常(chang)校對其(qi)準確性(xing)，以(yi)避(bi)免試(shi)驗(yan)誤(wu)差(cha)。壹(yi)次加(jia)樣時間(jian)控制(zhi)在 5 分鐘(zhong)內，如標(biao)本(ben)數(shu)量多，使用排(pai)槍(qiang)加樣(yang)。
4.請每次測(ce)定(ding)的同時做標(biao)準(zhun)曲線，做復孔。如標(biao)本(ben)中(zhong)待測(ce)物質(zhi)含量過高（樣本(ben)OD 值(zhi)大(da)於(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)孔*孔(kong)的OD 值(zhi)），請(qing)先(xian)用樣品(pin)稀釋液(ye)稀釋壹定(ding)倍(bei)數(shu)（n 倍(bei)）後(hou)再測(ce)定(ding)，計(ji)算(suan)時請後乘(cheng)以(yi)總稀釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。
5.封板膜(mo)只(zhi)限(xian)壹(yi)次性(xing)使用，以(yi)避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。
6.底物請避(bi)光(guang)保存。
7.嚴格按照(zhao)說(shuo)明書的操作(zuo)進(jin)行，試(shi)驗(yan)結(jie)果判(pan)定(ding)必(bi)須(xu)以(yi)酶標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)為(wei)準.
8.所(suo)有樣(yang)品(pin)，洗滌液(ye)和(he)各(ge)種廢(fei)棄(qi)物都應(ying)按(an)傳(chuan)染物處(chu)理。
操作(zuo)步(bu)驟
1.標(biao)準(zhun)品(pin)的稀釋：本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)提(ti)供(gong)原倍(bei)標(biao)準(zhun)品(pin)壹支(zhi)，用戶可(ke)按(an)照(zhao)下(xia)列圖(tu)表在小(xiao)試(shi)管中(zhong)進(jin)行稀釋。
2.加樣(yang)：分別(bie)設(she)空白(bai)孔（空白對照(zhao)孔(kong)不加樣(yang)品(pin)及酶標(biao)試(shi)劑(ji)，其(qi)余各(ge)步(bu)操作(zuo)相(xiang)同）、標(biao)準(zhun)孔、待測(ce)樣品(pin)孔。在酶標(biao)包(bao)被板上(shang)標(biao)準(zhun)品(pin)準確加樣(yang) 50µl，待測(ce)樣品(pin)孔中(zhong)先加(jia)樣(yang)品(pin)稀釋液(ye) 40µl，然(ran)後(hou)再加待測(ce)樣品(pin) 10µl（樣品(pin)終稀釋度為(wei) 5 倍(bei)）。加(jia)樣將(jiang)樣品(pin)加於(yu)酶標(biao)板(ban)孔底部(bu)，盡量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕晃動(dong)混(hun)勻(yun)。
3.溫育(yu)：用封板膜(mo)封板後(hou)置(zhi) 37℃溫育(yu) 30 分鐘(zhong)。
4.配(pei)液(ye)：將(jiang) 30 倍(bei)濃(nong)縮洗滌液(ye)用蒸(zheng)餾(liu)水 30 倍(bei)稀釋後備用
5.洗滌：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封板膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體，甩幹，每孔加滿洗滌液(ye)，靜(jing)置(zhi) 30 秒後(hou)棄去，如此(ci)重復 5 次，拍幹。
6.加酶：每孔加(jia)入酶標(biao)試(shi)劑(ji) 50µl，空(kong)白孔(kong)除(chu)外。
7.溫育(yu)：操作(zuo)同 3。
8.洗滌：操作(zuo)同 5。
9.顯(xian)色：每(mei)孔(kong)先(xian)加入顯(xian)色劑 A50µl，再加入(ru)顯色(se)劑(ji) B50µl，輕(qing)輕(qing)震蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光(guang)顯色(se)
15 分鐘(zhong).
10.終止(zhi)：每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液(ye) 50µl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)（此(ci)時藍(lan)色立轉(zhuan)黃(huang)色）。
11.測(ce)定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調零，450nm 波長依序測(ce)量各(ge)孔(kong)的吸光(guang)度（OD 值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加終(zhong)止(zhi)液(ye)後(hou) 15 分鐘(zhong)以(yi)內(nei)進(jin)行。
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