概念:由(you)單(dan)個B淋巴細(xi)胞進(jin)行(xing)無(wu)性繁(fan)殖形成(cheng)的細(xi)胞系(xi)所產(chan)生(sheng)出(chu)的化(hua)學性質(zhi)單(dan)壹(yi)、特異(yi)性強(qiang)的抗體。
特點:化(hua)學性質(zhi)單(dan)壹(yi),特異(yi)性強(qiang),靈(ling)敏度高(gao)。
壹(yi)、單(dan)抗的制(zhi)備過程(cheng):
1.動(dong)物免(mian)疫:註(zhu)射特定(ding)抗原蛋(dan)白
2.分(fen)離脾淋巴細(xi)胞:與(yu)培(pei)養好(hao)的骨(gu)髓瘤細(xi)胞混合(he),人工(gong)誘導(dao)細(xi)胞融合(he)。
3.細(xi)胞融合(he):淋(lin)巴細(xi)胞雜交瘤(liu)的制(zhi)備
4.雜交瘤(liu)細(xi)胞的篩(shai)選:HAT選擇(ze)培(pei)養基篩(shai)選出(chu)雜交瘤(liu)細(xi)胞。(含次(ci)黃(huang)嘌(piao)ling (H)、氨基喋呤(ling)(A)及胸(xiong)腺(xian)嘧(mi)啶核(he)苷(T)的壹(yi)種(zhong)培養基,其中(zhong)三種(zhong)成(cheng)分與(yu)細(xi)胞DNA合(he)成(cheng)有(you)關,骨髓瘤細(xi)胞遺(yi)傳缺(que)陷型(xing),不(bu)能利(li)用,被淘汰)
5.培養雜(za)交瘤(liu)細(xi)胞:體外(wai)培(pei)養雜(za)交瘤(liu)細(xi)胞,從培養液(ye)中(zhong)分離(li)提取單(dan)克(ke)隆(long)抗體。或者,將(jiang)雜交瘤(liu)細(xi)胞移植到(dao)小(xiao)鼠腹(fu)腔內(nei),從小(xiao)鼠腹(fu)水(shui)中(zhong)分離(li)提取單(dan)克(ke)隆(long)抗體。
6.單(dan)克(ke)隆(long)抗體的制(zhi)備和凍存(cun)、純化(hua)。
二、單(dan)克(ke)隆(long)抗體的應用:
1、診(zhen)斷(duan)疾(ji)病(bing):診(zhen)斷(duan)病(bing)毒(du)引(yin)起(qi)的疾(ji)病(bing)和用(yong)癌(ai)細(xi)胞抗原制(zhi)備的單(dan)克(ke)隆(long)抗體定(ding)位(wei)診(zhen)斷(duan)。
2、藥(yao)物導(dao)向(xiang)治療(liao):運(yun)用藥(yao)物與(yu)單(dan)克(ke)隆(long)抗體連(lian)接(jie)在壹起(qi)制成(cheng)“生(sheng)物導(dao)"
3、分(fen)離和純化(hua)抗原分(fen)子(zi)。