CEM/C1人急(ji)性(xing)淋(lin)巴細胞白血病(bing)細胞

公司產品僅(jin)供科研研究(jiu)使用、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再輕(qing)輕吹(chui)打細胞使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細胞用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細胞凍存：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru)培養液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕(qing)吹打細胞使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並放置(zhi)於(yu)凍存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞凍存管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期保(bao)存。使用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可直接(jie)放入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品(pin)介紹(shao)：

二(er)、細胞培養操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處(chu)理僅(jin)供參考，具體(ti)操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產品說明書(shu)為主。將含有(you)1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍存管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培養基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹勻(yun)。然後將所有(you)細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含適量(liang)培養基(ji)的培養瓶中(zhong)培養過夜（或將細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第二(er)天換液(ye)並檢查細胞密度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上清，用不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞，將培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞情況(kuang)而定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞消(xiao)化情況(kuang)，若細胞大部分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿(na)回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後加2-3ml培養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕(qing)打勻後裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將細胞懸液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新的含8 mL培養基(ji)的新皿中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細胞凍存：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可進行(xing)細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細胞計數。

b、根據(ju)細胞數量(liang)加入(ru)無血清細胞凍存液(ye)，使細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻(yun)，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細胞懸液(ye)，註(zhu)意凍存管(guan)做(zuo)好標識。將凍存管(guan)放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的產品：

Hep B1.2(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 痢疾(ji)誌賀(he)氏菌 大鼠(shu)乙酰(xian)受(shou)體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 PSA 前列(lie)腺特(te)異性(xing)抗(kang)原 96T

MGLUR3： 代(dai)謝型谷(gu)酸(suan)受體(ti)-3抗(kang)體(ti) CM-R054大鼠(shu)子宮成纖維(wei)細胞培養基(ji)100mL

IGFBP4 Protein Human 重(zhong)組人 IGFBP4 蛋(dan)白 (His 標簽) 大鼠(shu)乙酰(xian)受(shou)體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 CA50 上皮類(lei)癌相(xiang)關(guan)抗原 96T

MGLUR2 + MGLUR3： 促(cu)代謝型谷(gu)酸(suan)受體(ti)2+3抗(kang)體(ti) XCL1 Others Human 人 XCL1 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

大鼠(shu)輸尿管上皮細胞培養基(ji) 100mL 大鼠(shu)乙酰(xian)(Ach)ELISA試(shi)劑盒 CA125 卵巢(chao)癌相(xiang)關(guan)抗原 96T

HHLA1： HHLA1蛋(dan)白抗體(ti) 人胚(pei)肺(fei)成纖維(wei)細胞;MRC-5

HEC-1-B(人子(zi)宮內膜腺癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡(jing)鯉(li)尾(wei)鰭細胞;YZ21 人抗(kang)Sa抗體(ai-Sa-Ab)ELISA 試劑盒 PADI4 (HL-60 PAD)(Protein-arginine deiminase type IV，PADI 4，PAD I4 ) 關(guan)節(jie)炎(yan)相(xiang)關(guan)基(ji)因 0.5mg

heavy chain cardiac Myosin： 心(xin)肌肌(ji)球(qiu)蛋白重(zhong)鏈(lian)抗體 人臍靜(jing)脈平滑肌細胞總RNAHUVSMC NA

SK-NEP-1(人腎(shen)母(mu)細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人抗(kang)Q熱(re)抗(kang)體(ti)(ai-Q-Ab)ELISA 試(shi)劑盒 PDGF-A 血小板源(yuan)性(xing)生(sheng)長(chang)因子-1(抗原) 0.5mg

hnRNP M： 異(yi)質性(xing)核(he)糖(tang)核(he)蛋白M抗體(ti) EPHA3 Others Mouse 小鼠(shu) EphA3 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

CEM/C1人急(ji)性(xing)淋(lin)巴細胞白血病(bing)細胞U-118 MG人腦(nao)星形(xing)膠(jiao)質母(mu)細胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養基(ji)+10%FBS 大鼠(shu)環(huan)0酸(suan)腺苷(gan)(cAMP)ELISA 試(shi)劑盒 sPECAM-1/sCD31(Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1)  小鼠(shu)可溶性(xing)血(xue)小板內(nei)皮細胞粘附(fu)分(fen)子(zi)1 96T

P2X2： 三(san)0酸(suan)腺苷(gan)受(shou)體(ti)受(shou)體P2X2抗(kang)體 SFRP4 Others Mouse 小鼠(shu) sFRP4 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

家(jia)豬皮(pi)膚(fu)細胞;SSC-S1 大鼠(shu)環(huan)0酸(suan)鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 IL-17  大鼠(shu)白介素17 96T

Phospho-Paxillin(Ser83)： 0酸(suan)化樁蛋(dan)白Paxillin抗體(ti) 家(jia)兔骨(gu)髓(sui)間(jian)充(chong)質幹細胞;2012083MSC

大鼠(shu)間(jian)骨(gu)髓(sui)間(jian)充(chong)質幹細胞(RMSC-bm)(5×105) MCF-7 [MCF7], 人癌(ai)細胞系(xi) Human 大鼠(shu)環(huan)0酸(suan)鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 GP(Human anti-glycoprotein antibody)  人抗(kang)糖(tang)蛋(dan)白抗體(ti) 細胞雕亡(wang)蛋白酶(mei)-3分(fen)析(xi)試劑盒CAS

三(san)、培養註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首先(xian)觀(guan)察細胞瓶是否(fou)完(wan)好，培養液(ye)是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若有(you)上述現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞說明書(shu)，了解(jie)細胞相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細胞形態、所(suo)用培養基(ji)、血清比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因子等，確(que)保細胞培養條件(jian)壹致(zhi)，若由(you)於(yu)培養條件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導致細胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶表面，顯微鏡(jing)下觀(guan)察細胞狀態。因運(yun)輸(shu)問題，部分細胞由於溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察好細胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以消(xiao)化，懸浮細胞直接混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並接(jie)種(zhong)到(dao)新的培養瓶或培養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條件(jian)的培養基(ji)用於(yu)細胞培養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到(dao)細胞後前 3 天各(ge)拍幾(ji)張細胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態，便(bian)於和(he)我(wo)司技術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的原因，個別敏感細胞會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的情況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)，告知(zhi)細胞 的具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們的技(ji)術(shu)人員跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至問題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅(jin)供科研使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來(lai)培養細胞，請換用按(an)照說明書(shu)細胞培 養條件(jian)新配制的培養基(ji)來培養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。