EL-4小(xiao)鼠(shu)淋巴(ba)瘤(liu)細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品僅供科(ke)研研究(jiu)使(shi)用、不得(de)用於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消化，再輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液(ye)終

止(zhi)消化，輕輕(qing)吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並放(fang)置於凍(dong)存管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品介紹：

二、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存處(chu)理僅供參考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上清(qing)，用不含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然(ran)後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終止(zhi)消化。輕輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新的含(han)8 mL培養基的新皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進行(xing)細(xi)胞(bao)凍存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支凍存管凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存管做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記錄凍存管位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品：

大隱靜(jing)脈(mai)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(fang)(1ml) 大(da)鼠(shu)血(xue)小(xiao)板衍(yan)生(sheng)生(sheng)長(chang)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒(he) CX3CR1(Human CX3C-chemokine receptor 1)  人(ren)CX3C趨(qu)化因子受體(ti)1 96T

phospho-MYF5 (phospho Ser49)： 0酸化生肌(ji)決(jue)定(ding)因子Myf5抗體 正常(chang)小(xiao)鼠(shu)Leydig細(xi)胞(bao);TM3

K7M2 wt(小(xiao)鼠(shu)骨(gu)肉瘤(liu)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 溶(rong)組織梭菌(jun)Closidium histolyticum 大(da)鼠(shu)血(xue)小(xiao)板衍(yan)生(sheng)生(sheng)長(chang)因子BB(PDGF-BB)ELISA 試劑盒(he) Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP  魚(yu)類(lei)超(chao)敏C反應蛋白(bai) 96T

MRAP2： 黑(hei)素皮質(zhi)素2受體輔助(zhu)蛋白2抗體 CM-H038人(ren)直(zhi)結腸(chang)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)培養基100mL

IFNA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹(xie)猴 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽) 大鼠(shu)血(xue)小(xiao)板衍(yan)生(sheng)生(sheng)長(chang)因子B(PDGF-B)ELISA試劑盒(he) RANKL (Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand)  兔核(he)因子κB受體(ti)活(huo)化因子配(pei)基 96T

HT-29(人(ren)結(jie)腸(chang)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 NCI-N87 [N87]人(ren)胃癌細(xi)胞(bao) EB病毒轉化的人(ren)B淋巴(ba)細(xi)胞(bao);KMYM 人(ren)基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒(he) CCR-7(CC chemokine receptor 7) CC趨化因子受體(ti)7(多肽) 0.5mg

HCE： 5’-三0酸(suan)聚(ju)核(he)苷(gan)酸抗體 人(ren)顱(lu)骨(gu)造骨(gu)細(xi)胞(bao)cDNAHCO cDNA

U14-GFP(小(xiao)鼠(shu)子細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)9/明(ming)膠酶(mei)B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA 試劑盒(he) CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/幹擾(rao)素(su)誘(you)導(dao)蛋白(bai)10抗原 0.5mg

HINT1： 組酸(suan)三(san)聚(ju)體核(he)苷(gan)結合蛋白(bai)1抗體 FAM171B Others Human 人(ren) FAM171B / KIAA1946 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照)

骨(gu)髓間質(zhi)幹細(xi)胞(bao) Adult bone marrow mesenchymal stem cells 人(ren)基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)8/中(zhong)性粒(li)細(xi)胞(bao)膠原(yuan)酶(MMP-8)ELISA 試劑盒(he) VEGF(Vascular endothelial growth factor) 血(xue)管內(nei)皮生(sheng)長(chang)因子(多肽抗原) 0.5mg

EL-4小(xiao)鼠(shu)淋巴(ba)瘤(liu)細(xi)胞(bao)IFNG Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) IFNG / Ierferon Gamma 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照) 大(da)鼠(shu)骨(gu)鈣素(su)(OT)ELISA試劑盒(he) TRAIL-R4  大鼠(shu)壞(huai)死(si)因子相關(guan)雕(diao)亡誘(you)導(dao)配(pei)體(ti)4 96T

PAP2c： 0脂酸(suan)0酸(suan)酶2C抗體 CM-M024小(xiao)鼠(shu)淋巴(ba)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)培養基100mL

HEC-1-B人(ren)子宮(gong)內(nei)膜(mo)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao) HEC-1-B human endomeial adenocarcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)骨(gu)鈣素(su)(OC)ELISA試劑盒(he) sTRAIL  大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性壞死(si)因子相關(guan)雕(diao)亡誘(you)導(dao)配(pei)體(ti) 96T

PAX1： 配(pei)對(dui)盒基因1抗體 PDGFRA Others Human 人(ren) PDGFRa / CD140a 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照)

大鼠(shu)胰(yi)島細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao);INS-1 大鼠(shu)骨(gu)成型蛋白(bai)受(shou)體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒(he) PEA(Human Pseudomonas Exotoxin A)  人(ren)綠膿(nong)桿菌(jun)外(wai)毒素(su)A 96T

三、培(pei)養註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否完(wan)好，培(pei)養液(ye)是否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現象，若(ruo)有(you)上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所用培養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因子等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培養條件壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培(pei)養條件不壹(yi)致而導(dao)致細(xi)胞(bao)出現(xian)問題，責任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運輸問題，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度 變化及劇烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正常(chang)現象(xiang)。觀察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培(pei)養基重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到(dao)新的培養瓶(ping)或培養皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中進行(xing)培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用相同條件的培(pei)養基用於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天(tian)各拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸的原因，個(ge)別(bie)敏感細(xi)胞(bao)會出(chu)現不穩定(ding)的情況(kuang)，請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的培(pei)養基 (灌液(ye)培養基) 不能(neng)再用來培(pei)養細(xi)胞(bao)，請換用按(an)照說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養條件新配(pei)制的培養基來培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。