GC-1 spg小(xiao)鼠(shu)精(jing)原(yuan)細胞系

公司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商(shang)品介紹：

1、細胞傳代：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打細胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以下細胞培(pei)養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅(jin)供(gong)參(can)考，具體(ti)操(cao)作步驟以隨貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基(ji)的(de)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞密度(du)。

2) 細胞傳代：如果細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液(ye)浸潤(run)所(suo)有細胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然(ran)後在顯微鏡下(xia)觀(guan)察細胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞大部分變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作臺，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞生長(chang)狀態(tai)良(liang)好時，可進行(xing)細胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細胞計數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量加(jia)入(ru)無血清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以便下(xia)次拿取(qu)。

三(san)、培(pei)養註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞後首先觀(guan)察細胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好，培(pei)養液(ye)是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾濁等現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象 發生請及(ji)時和我們聯系。

2. 仔(zai)細閱讀細胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解細胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如細胞形態(tai)、所用培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所需 細胞因子等(deng)，確(que)保細胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由(you)於培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導(dao)致細胞出現問題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由(you)於溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常現(xian)象。觀(guan)察好細胞狀態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培(pei)養。

5. 請客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養基(ji)用於細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞後前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細胞照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞狀態(tai)，便於和我司(si)技術部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細胞會出現不(bu)穩定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和我們聯系，告(gao)知細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我們的(de)技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的(de)培(pei)養基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培(pei)養細胞，請換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞。     收(shou)到細胞後第(di)壹次傳代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司(si)正(zheng)在出售的(de)產(chan)品(pin)：

Methamphetamine(4D2)： 甲基(ji)單(dan)克隆(long)抗體(ti) INHBB Others Human 人(ren) Activin B 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

原(yuan)代(dai)骨細胞特制基(ji)礎(chu)無(wu)血清(qing)培(pei)養基(ji)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：500/100ml 大鼠(shu)血(xue)清(qing)(NO)ELISA 試劑(ji)盒(he) (NF-KapB) 大鼠(shu)核(he)因子κB 96T

Mitoferrin 1： 線粒(li)體(ti)鐵(tie)轉運蛋(dan)白1抗體(ti) 615小(xiao)鼠(shu)肺(fei)癌(ai)瘤(liu)株;HP615

MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠(shu)顱(lu)頂前(qian)骨細胞亞克(ke)隆(long)14) 5×106cells/瓶(ping)×2 CHO(中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞) 大鼠(shu)血(xue)清(qing)素受(shou)體(ti)2A/5-羥(qiang)色胺受體(ti)2A(5-HT-2A)ELISA試(shi)劑盒 MCP-4/CCL13(Human monocyte chemotactic protein 4)  人(ren)單(dan)核(he)細胞趨(qu)化(hua)蛋(dan)白4 96T

phospho Met (Tyr1365)： 0酸化(hua)原(yuan)癌(ai)基(ji)因c-Met抗體(ti) 興國鯉(li)尾鰭(qi)細胞;XGL

Rhesus antibody Rh C9orf114 9號(hao)染色體(ti)開放(fang)閱讀框(kuang)114抗體(ti) 豬腎細胞;PK-15 子宮(gong)內膜腺(xian)癌(ai)細胞，HEC-1-B細胞 Fc細胞，615小鼠(shu)前(qian)胃(wei)癌(ai)瘤(liu)株

CFHR1 Others Human 人(ren) CFHR1 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 人(ren)環(huan)孢(bao)A(CsA)ELISA 試劑盒 Cdc2/P34CDC2/CDK1(Cell division control protein 2) 周期(qi)素(su)依賴激酶1抗原(yuan) 0.5mg

HIPK4： 同源(yuan)相(xiang)互(hu)作(zuo)用蛋(dan)白激酶4抗體(ti) CL-0210SiHa(人(ren)子宮(gong)頸(jing)鱗癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

MV3細胞，人(ren)黑(hei)色素(su)瘤(liu)細胞 嗜酸乳桿(gan)菌(jun) 人(ren)骨肉(rou)瘤(liu)細胞;HOS 人(ren)踝(huai)蛋(dan)白(talin)ELISA 試劑(ji)盒(he) Cdc34 peptide 細胞周期(qi)調(tiao)控因子34抗原(yuan) 0.5mg

HCF2： 肝素(su)輔(fu)助(zhu)因子II抗體(ti) HA Others H1N1 甲(jia)型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

GC-1 spg小鼠(shu)精(jing)原(yuan)細胞系SHH Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) SHH / Sonic hedgehog 蛋(dan)白 (aa 198-462, His 標簽(qian)) 大鼠(shu)S轉(zhuan)移酶Mu1(GSTM1)ELISA試劑(ji)盒 EP(Human epidemic parotitis)  人(ren)流(liu)行(xing)性(xing)腮腺(xian)炎(yan) 96T

PCDHGB1： 原(yuan)鈣粘蛋(dan)白γB1抗體(ti) COL9A1 Others Human 人(ren) COL9A1 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

LOVO 人(ren)結(jie)腸癌細胞 大鼠(shu)S轉(zhuan)移酶(GSTs)ELISA試劑(ji)盒 bFGF-4  大鼠(shu)堿性成(cheng)纖維(wei)細胞生長(chang)因子4 96T

PCDHGB2： 原(yuan)鈣粘蛋(dan)白γB2抗體(ti) BLO-11細胞，小鼠(shu)骨骼(ge)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞 人(ren)腎癌(ai)Wilms細胞,G401細胞 人(ren)膀(pang)胱(guang)平滑肌細胞HBdSMC

CD80 Others Mouse 小鼠(shu) CD80 / B7-1 / CD28LG 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 大鼠(shu)(GSH)ELISA試(shi)劑盒(he) EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody)  人(ren)抗流行(xing)性(xing)出血熱(re)病毒抗體(ti) CM-R085大鼠(shu)表(biao)皮(pi)角(jiao)化(hua)細胞培(pei)養基(ji)100mL