Sp2/0-Ag14小(xiao)鼠骨(gu)髓(sui)瘤細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得用於臨床診(zhen)斷！

1、細胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止消化(hua)，再輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

壹(yi)、商品(pin)介紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培養(yang)液終(zhong)

止消化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並放置(zhi)於凍存管中(zhong)；

4）先將細(xi)胞凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮中(zhong)進(jin)行長期保存。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加4 mL培養(yang)基混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養(yang)基的培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜）。第二天換液並檢查(zha)細(xi)胞密度(du)。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上(shang)清，用不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將培養(yang)瓶置(zhi)於37℃培養(yang)箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情況而定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)消化(hua)情況，若細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並脫落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作臺(tai)，輕敲幾下培養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培養(yang)基終(zhong)止消化(hua)。輕輕打勻後(hou)裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新的含8 mL培養(yang)基的新皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態良好時，可(ke)進(jin)行細胞凍存。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞培養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞計數。

b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加入(ru)無(wu)血(xue)清細(xi)胞凍(dong)存液，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意凍(dong)存管做(zuo)好標識。將凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲存。記錄凍(dong)存管位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿取。

公司(si)正在(zai)出售(shou)的產(chan)品(pin)：

膠(jiao)原酶(mei)(含10mL酶(mei)解緩沖液) 1mL 大鼠內皮(pi)型(xing)合成(cheng)酶(mei)3(eNOS-3)ELISA 試劑盒(he) PHC(Human primary hepatic carcinoma)  人肝癌抗原 96T

NSPL2： 神(shen)經(jing)內(nei)分(fen)泌特異(yi)白2抗體(ti) H9c2細胞(bao)，大鼠心肌細胞(bao) 人肝癌細胞(bao),HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

DKKL1 Others Human 人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 人細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠內皮(pi)型(xing)合成(cheng)酶(mei)(eNOS/NOS3)ELISA試劑盒(he) Apaf-1(Human apoptosis protease activating factor-1)  人雕(diao)亡蛋(dan)白酶(mei)激活因子(zi)1 96T

NOX5： 還(hai)原型(xing)輔(fu)酶(mei)Ⅱ氧化(hua)酶(mei)5/酰胺(an)腺嘌(piao)呤二核(he)苷(gan)酸0酸抗體(ti) 臍(qi)帶(dai)單核細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105次(ci)方(1ml)

SW620-EGFP-puro(慢(man)病(bing)毒構(gou)建穩(wen)定株(zhu))人結腸癌細胞(bao) SW620-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human colon cancer cells L-15+10%Hyclone 滅(mie)活血(xue)清+2μg/ml puromycin 大鼠內皮(pi)型(xing)合成(cheng)酶(mei)(eNOS)ELISA試劑盒(he) TFPI(Mouse Tissue factor pathway inhibitor)  小鼠組織因子(zi)途(tu)徑(jing)抑(yi)制(zhi)物(wu) 96T

VEGFA Others Human 人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 人細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 綿(mian)羊(yang)血(xue)管內(nei)皮(pi)細胞(bao)生長因子(zi)(VEGF)ELISA 試(shi)劑盒(he) CRP (C-reactive protin) C-反(fan)應蛋(dan)白(抗原) 0.5mg

KLMW Kininogen： 高(gao)分子(zi)量(liang)激肽(tai)原重鏈抗(kang)體(ti) 人Burkkit淋巴瘤細(xi)胞;Daudi

NRK-49F細(xi)胞，大鼠腎成(cheng)纖微(wei)細(xi)胞(bao) RT4(膀(pang)胱(guang)癌細胞(bao)) 豹(bao)貓肺(fei)成(cheng)纖維(wei)樣(yang)細(xi)胞(bao);LCL3 綿(mian)羊(yang)褪黑素(su)(MT/MLT)ELISA試(shi)劑盒(he) Clenbuterol/BSA 克(ke)侖(lun)特(te)羅偶(ou)聯(lian)血(xue)清白蛋(dan)白 1mg

KCTD11： 通(tong)道四(si)聚體(ti)結構(gou)域蛋(dan)白11抗體(ti) SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人膀胱(guang)基質成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)物(wu)HBdSFL 綿(mian)羊(yang)瘦(shou)素(su)(leptin)ELISA試(shi)劑盒(he) Clenbuterol/KLH 克(ke)侖(lun)特(te)羅偶(ou)聯(lian)血(xue)藍蛋(dan)白 1mg

Sp2/0-Ag14小(xiao)鼠骨(gu)髓(sui)瘤細胞(bao)SIX2： 轉(zhuan)錄因子(zi)同源框蛋(dan)白SIX2抗體(ti) CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

HMy2.CIR 人 B 淋巴母(mu)細胞(bao) 大鼠N-乙酰(xian)基-絲酰-天門(men)冬(dong)酰(xian)-賴(lai)酰(xian)-脯酸(AcSDKP)ELISA 試劑盒(he) SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot)  人特異性(xing)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞武裝因子(zi) 96T

SUMF1： 酯(zhi)酶(mei)修飾因子(zi)1抗(kang)體(ti) P3X63-Ag8.653細胞(bao)，鼠骨(gu)髓(sui)瘤細胞(bao) 人Butt`s淋巴瘤細(xi)胞,NAMALWA細(xi)胞(bao) 小(xiao)鼠網織(zhi)細(xi)胞肉(rou)瘤(liu);M5076

SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠N-乙酰(xian)β-D-基葡(pu)萄糖(tang)苷(gan)酶(mei)(NAGase)ELISA試劑盒(he) MF/MPF(Human maturation promoting factor)  人促有(you)絲分裂因子(zi) 96T

Stanniocalcin 2： 斯(si)鈣素(su)2抗(kang)體(ti) 兔主(zhu)動脈(mai)平滑(hua)肌細胞(bao);CCC-SMC-1

三(san)、培養(yang)註意事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液是否(fou)有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上述現(xian)象(xiang) 發生請及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關信息，如細胞形(xing)態、所(suo)用培養(yang)基、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確保細胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由於培養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責任(ren)由 客戶自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)狀態。因運輸問題(ti)，部分細胞由於溫度 變(bian)化(hua)及劇烈碰(peng)亡破碎形成(cheng)碎片(pian)，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好細胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的培養(yang)基重懸(xuan) 細(xi)胞，並接種(zhong)到新的培養(yang)瓶或培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培養(yang)基用於細胞培養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收到細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾張(zhang)細胞(bao)照片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於和我(wo)司(si)技術部溝通 交流(liu)。由於運輸的原因，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出現(xian)不(bu)穩(wen)定的情況，請及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技術(shu)人員跟蹤回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用。

8. 備註：運輸用的培養(yang)基 (灌(guan)液培養(yang)基) 不(bu)能再(zai)用來培養(yang)細(xi)胞，請換用按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制(zhi)的培養(yang)基來培養(yang)細(xi)胞。     收到細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。