COR-L105細胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科研研究使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止消(xiao)化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹打細胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進行(xing)分瓶傳(chuan)代，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

壹、商(shang)品介紹：

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入培養(yang)液(ye)終

止消(xiao)化(hua)，輕輕(qing)吹打細胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)中進(jin)行(xing)長期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程序

降(jiang)溫盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細(xi)胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參考，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將含有(you)1 mL細(xi)胞懸液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中迅(xun)速(su)搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸液(ye)加入含適量培養(yang)基的培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)懸液加入10 cm皿(min)中，加(jia)入約8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細(xi)胞密度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞，將培養(yang)瓶置於37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若細胞(bao)大部(bu)分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅速拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕(qing)打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到新的(de)含8 mL培養(yang)基的新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收集細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量加(jia)入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿取。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

植物過氧(yang)化(hua)氫(qing)（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒(ying)光定量檢(jian)測試劑盒

植物甲基化(hua)組(zu)蛋白(bai)H3-K9染色質(zhi)免(mian)疫(yi)沈(chen)澱分析（CHIP）試劑盒

通用(yong)型HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒定性檢(jian)測試劑盒

冰(bing)凍(dong)切片(pian)組(zu)織(zhi)NF KAPPA B P65蛋白表達熒(ying)光顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測試劑盒

牛奶（lactulose）含量酶(mei)連(lian)續(xu)反(fan)應(ying)光譜(pu)法(fa)定量檢(jian)測試劑盒

活體細胞組(zu)織(zhi)L（CATHEPSIN L）活性原位(wei)熒(ying)光染色檢(jian)測試劑盒

組(zu)織(zhi)SYK激酶(mei)活(huo)性定量檢(jian)測試劑盒（A/B/C）

ETHIDIME BROMIDE簡易細胞(bao)核形態(tai)染色試劑盒

石蠟切片(pian)結(jie)締(di)組(zu)織(zhi)（CONNECTIVE TISSUE）格莫瑞(rui)（Gomori）染色試劑盒

組(zu)織(zhi)檸檬酸(suan)合成酶(mei)活(huo)性比色(se)法(fa)定量檢(jian)測試劑盒

細菌(jun)銅ATP酶(mei)（Cu＋＋ －ATPase）活性比色(se)法(fa)量檢(jian)測試劑盒

水中大(da)腸菌(jun)群（coliform）基因定性檢(jian)測試劑盒

石蠟切片(pian)組(zu)織(zhi)IP3R受體蛋白表達熒(ying)光顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測試劑盒

細胞基質(zhi)金屬(shu)（MMP-1）活性比色(se)法(fa)定量檢(jian)測試劑盒

動物肝組(zu)織(zhi)細胞(bao)分離培養(yang)試劑盒

早期生(sheng)長應(ying)答(da)蛋(dan)白(bai)1抗體

鈣粘蛋(dan)白(bai)相(xiang)關(guan)神(shen)經(jing)受體8抗體

驅動蛋白(bai)家(jia)族成(cheng)員9抗體

kappa型阿片(pian)受體抗體

細胞核受體Rev-Erbα抗體

ZCCHC18蛋白抗體

跨(kua)膜蛋白(bai)Orai2抗體

COR-L105細胞(bao)APC標(biao)記(ji)小鼠(shu)CD31單克隆(long)抗(kang)體

鋅(xin)指蛋白799抗體

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞後(hou)首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶是否完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是否有(you)漏(lou)液、渾濁等現象(xiang)，若有(you)上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基、血清(qing)比(bi)例、所(suo)需 細(xi)胞因子(zi)等，確保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細胞由(you)於溫度(du) 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培養(yang)基重懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到新的(de)培養(yang)瓶或培養(yang)皿(min)中，置於培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客戶用(yong)相(xiang)同條件(jian)的(de)培養(yang)基用(yong)於細胞(bao)培養(yang)。

6. 建議客戶收到細(xi)胞後(hou)前 3 天各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於運輸(shu)的(de)原因，個(ge)別敏感細胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩(wen)定的情況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的具體情況(kuang)，以便(bian)我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回訪直(zhi)至問題解決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研使用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用(yong)的培養(yang)基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用(yong)來培養(yang)細(xi)胞，請換用(yong)按照說(shuo)明(ming)書細(xi)胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來培養(yang)細(xi)胞。     收到細(xi)胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。