COR-L95細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅供(gong)科研研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變圓後加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變圓後加入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期保存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理僅供(gong)參考，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以隨貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃解凍，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄去上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含(han)適量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第二天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化液浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回操作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上(shang)清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良(liang)好時(shi)，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心4 min，棄去上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加入(ru)無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註意凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌儲存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司(si)正(zheng)在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品：

組(zu)織二胺(an)氧(yang)化酶(mei)（DAO）活(huo)性(xing)熒(ying)光(guang)定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

組(zu)織乙酰化組蛋白H4染色(se)質免(mian)疫(yi)沈(chen)澱(dian)分(fen)析(xi)（CHIP）試劑(ji)盒(he)

組(zu)織HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒

細(xi)胞(bao)NF KAPPA B P65蛋白表達熒光(guang)定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

植(zhi)物(wu)脯（proline）含(han)量比(bi)色法定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

通用(yong)免(mian)疫化學(xue)固(gu)著溶液

組(zu)織TRKB激酶(mei)活性(xing)定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)（A/B/C）

熒(ying)光(guang)標(biao)記法組(zu)織端粒(li)酶(mei)活性(xing)TRAP電(dian)泳(yong)分(fen)析(xi)試劑(ji)盒(he)

石(shi)蠟(la)切(qie)片(pian)彈性(xing)纖(xian)維(wei)（ELASTIC）偉(wei)郝(hao)夫範(fan)吉(ji)森(sen)

細(xi)菌(jun)磷脂酶(mei)D（Phospholipase D）總(zong)活(huo)性(xing)比(bi)色法定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

食(shi)物(wu)鈣(gai)離(li)子(zi)濃(nong)度(du)比(bi)色法定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

水(shui)質汞元素(su)熒光(guang)定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

IP3R受(shou)體(ti)蛋白表達西(xi)方雜(za)交分(fen)析(xi)試劑(ji)盒(he)

細(xi)胞(bao)基質金(jin)屬(shu)（MMP-2）活(huo)性(xing)比(bi)色法定(ding)量檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

動(dong)物胰(yi)腺組(zu)織細(xi)胞(bao)分(fen)離培(pei)養(yang)試劑(ji)盒(he)

造(zao)血(xue)蛋白1抗(kang)體(ti)

鈣(gai)粘樣蛋白28抗(kang)體(ti)

驅(qu)動(dong)蛋白結(jie)合(he)蛋白1抗(kang)體(ti)

KBP蛋白抗(kang)體(ti)

細(xi)胞(bao)核因子(zi)/k基(ji)因(yin)結(jie)合(he)核因子(zi)抗(kang)體(ti)

ZCCHC8蛋白抗(kang)體(ti)

跨(kua)膜蛋白SEMA4F抗(kang)體(ti)

COR-L95細(xi)胞(bao)APC標(biao)記小鼠CD45.2單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)

鋅(xin)指(zhi)蛋白813抗(kang)體(ti)

三、培(pei)養(yang)註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否完好，培(pei)養(yang)液是否有漏(lou)液、渾濁等(deng)現(xian)象，若有(you)上(shang)述現(xian)象 發生請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用培(pei)養(yang)基、血(xue)清比(bi)例、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致，若(ruo)由於(yu)培(pei)養(yang)條件不(bu)壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責任由(you) 客戶自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因運輸(shu)問(wen)題(ti)，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變(bian)化及劇烈碰亡(wang)破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現(xian)象。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可以消化，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶用相(xiang)同(tong)條件的(de)培(pei)養(yang)基用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技術部溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運輸(shu)的(de)原因，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術人(ren)員跟蹤回訪直(zhi)至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新(xin)配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第壹次(ci)傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。