RF/6A猴(hou)脈(mai)絡(luo)膜-視(shi)網膜內皮細胞

公司產品僅供(gong)科研研究使用、不得用於臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液，用 PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後加入(ru) 5ml 培養(yang)

液終止消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳代(dai)，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

壹、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液，用 PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後加入(ru)培養(yang)液終

止消(xiao)化，輕輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管中；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存。使用程序(xu)

降溫盒可(ke)直接放入(ru)-80℃。

二、細胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以下細胞培養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明書(shu)為(wei)主。將含有1 mL細胞懸(xuan)液的凍存管在 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍，加4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻。在1000 rpm條件下離心(xin)3 min，棄去(qu)上清液，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹勻(yun)。然(ran)後將所(suo)有細胞懸(xuan)液加入(ru)含適量(liang)培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過夜（或將(jiang)細胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中，加入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜）。第(di)二天換液並檢(jian)查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代：如果細胞密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上清，用不含鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤所有細胞，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置於37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在顯微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部分變圓並脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕輕(qing)打(da)勻後裝入(ru)無菌離心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清液，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細胞及(ji)細胞培養(yang)液，裝入無菌離心(xin)管中，1000 rpm條件下離心(xin)4 min，棄去(qu)上清液，用PBS清洗壹遍，棄盡PBS，進(jin)行細胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清細胞凍(dong)存液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管凍存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管做好(hao)標識(shi)。將凍(dong)存(cun)管放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管位置(zhi)以便下次拿(na)取(qu)。

公司(si)正(zheng)在出售(shou)的產品：

NIMP： NOGO相互作(zuo)用線(xian)粒體(ti)蛋白(bai)1抗(kang)體(ti) 原代(dai)上皮細胞培養(yang)特(te)制添(tian)加劑Many types of cells包裝(zhuang)：5/2.5/1ml

3T3-L1小鼠胚(pei)胎成纖(xian)維細胞 3T3-L1 mouse embryonic fibroblasts DMEM+10%FBS 大(da)鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA試劑盒 NGAL(Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin)  人中性粒細胞明膠酶相(xiang)關脂質(zhi)運(yun)載蛋(dan)白(bai) 96T

NLGN4X： 神(shen)經元(yuan)X連鎖蛋白(bai)/兒(er)童(tong)自閉癥相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) EGFR Others Human 人 EGFR / ErbB1 人細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照)

CM-H068人膀胱(guang)上皮細胞培養(yang)基(ji)100mL 大(da)鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 AP12  大鼠apelin 12 96T

NLGN4Y： 神(shen)經元(yuan)Y連鎖蛋白(bai)抗(kang)體(ti) 黃胸(xiong)鼠肺(fei)成纖維細胞;YCR

新生兒(er)表(biao)皮角(jiao)化細胞培養(yang)基(ji) 100mL 犬(quan)狀腺(xian)原酸(T3)ELISA 試劑盒 midnolin isoform Protein 1 中腦(nao)核仁蛋(dan)白1(抗(kang)原) 0.5mg

IGHD： 免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)D重鏈保守(shou)區抗(kang)體(ti) MN-c, 小鼠皮質(zhi)神(shen)經元(yuan) 小鼠脂肪(fang)細胞，3T3-L1細胞 SP2/0(骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細胞)

CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 犬前列腺(xian)特(te)異性抗(kang)原(PSA)ELISA 試劑盒 midnolin isoform Protein 2 中腦(nao)核仁蛋(dan)白2(抗(kang)原) 0.5mg

IGLK： IV型(xing)己(ji)糖激酶抗(kang)體(ti) C57BL/6小鼠T細胞淋(lin)巴(ba)瘤細胞;RMA

CFSC-8B細胞，大(da)鼠肝星(xing)形細胞 L-02(正(zheng)常肝細胞) tTA基(ji)因修(xiu)飾(shi)的(de)小鼠畸胎瘤細胞(B類(lei));F9-CAG-tTA-3E5 犬內皮型(xing)合成(cheng)酶(eNOS)ELISA 試劑盒 MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 壹種細胞應(ying)激分子抗(kang)原 0.5mg

RF/6A猴(hou)脈(mai)絡(luo)膜-視(shi)網膜內皮細胞GES-1 人胃粘(zhan)膜細胞 大(da)鼠β1整(zheng)合素(su)(ITG β1)ELISA試劑盒 HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96)  人熱休(xiu)克(ke)蛋(dan)白糖蛋白(bai)96 96T

RAMP3： 受(shou)體(ti)活性修(xiu)飾(shi)蛋(dan)白3抗(kang)體(ti) L1細胞，卵(luan)巢癌(ai)細胞 急性T細胞白(bai)血(xue)病(bing)細胞),Jurkat細胞 人皮膚(fu)黑色(se)素瘤(liu)細胞;SK-MEL-1

SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 大鼠β-1,4-半(ban)乳糖轉移酶1(β4GALT1)ELISA試劑盒 CT-1(Human cardiotrophln 1)  人心(xin)肌營(ying)養(yang)素1 96T

Rasgrp1： Ras蛋白特(te)異核(he)苷(gan)酸釋(shi)放因子(zi)1抗(kang)體(ti) 人胚肺(fei)成纖維細胞;CCC-HPF-1

CM-M038小鼠肝內膽管上皮細胞培養(yang)基(ji)100mL 大(da)鼠α-血(xue)紅蛋(dan)白(bai)穩(wen)定(ding)蛋白(αHSP)ELISA試劑盒 CP/CER(Human Ceruloplasmin)  人銅藍(lan)蛋白 96T

三、培養(yang)註意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完好(hao)，培養(yang)液是(shi)否(fou)有漏(lou)液、渾濁等現象，若(ruo)有(you)上述現(xian)象 發生請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞說(shuo)明書(shu)，了(le)解細胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如細胞形(xing)態、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需 細胞因子(zi)等，確保(bao)細胞培養(yang)條件壹致，若(ruo)由於培養(yang)條件不壹致而(er)導致細胞出(chu)現問題，責任(ren)由 客(ke)戶自行承擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞瓶(ping)表面(mian)，顯微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸(shu)問題，部分細胞由於溫度 變化及劇烈(lie)碰亡(wang)破碎形成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可(ke)以消(xiao)化，懸浮細胞直接混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿中，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相同(tong)條件的培養(yang)基(ji)用於細胞培養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到(dao)細胞後前 3 天各拍幾(ji)張細胞照片，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便於和(he)我(wo)司(si)技術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會(hui)出現(xian)不穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供(gong)科研使用。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用來(lai)培養(yang)細胞，請(qing)換用按照說明書(shu)細胞培 養(yang)條件新配(pei)制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細胞。     收(shou)到(dao)細胞後第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。