RL95-2 人子宮(gong)內(nei)膜(mo)癌(ai)細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅供科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不得(de)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然後(hou)按 1:2 比(bi)例進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中培養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品介紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適量的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置(zhi)於凍(dong)存管中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管放置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中進(jin)行(xing)長期保(bao)存。使用程(cheng)序(xu)

降溫盒可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存處理(li)僅供參(can)考，具體(ti)操作步驟以隨貨產(chan)品說明書為(wei)主。將含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍存管在 37℃水浴(yu)中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離心3 min，棄去上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中培養(yang)過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜(ye)）。第二(er)天換液(ye)並檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄去培養(yang)上清(qing)，用不含鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消化液(ye)浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶置(zhi)於37℃培養(yang)箱中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回操(cao)作臺(tai)，輕敲幾(ji)下培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培養(yang)基的(de)新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌離心管中，1000 rpm條件(jian)下離心4 min，棄去上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍存管做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍存管放入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌儲存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在出售的產(chan)品：

NAV2： 維(wei)誘導神經(jing)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤蛋白(bai)1抗體(ti) 大鼠(shu)胰腺(xian)外分(fen)泌(mi)腺(xian)細(xi)胞(bao);AR42J

IL15 Protein Human 重(zhong)組人 IL-15 / IL15 / Ierleukin 15 蛋白(bai) (His 標簽(qian)) 大鼠(shu)皮(pi)質酮/腎上腺(xian)酮(CO)ELISA試(shi)劑盒 TPO(Mouse Thyroid-Peroxidase)  小鼠(shu)甲(jia)狀腺(xian)過氧(yang)化物(wu)酶 96T

NELF： 轉(zhuan)錄(lu)延伸因子NELF抗體(ti) IRAK4 Others Human 人 IRAK4 / IRAK-4 桿(gan)狀病毒-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

小(xiao)鼠(shu)牙細(xi)胞(bao)培養(yang)基 100mL 大鼠(shu)皮(pi)質酮/腎上腺(xian)酮(CO)ELISA 試(shi)劑盒 CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin)  人癌(ai)胚鐵(tie)蛋白(bai) 96T

NELL1： 蛋(dan)白(bai)激酶(mei)C結合蛋(dan)白(bai)NELL1抗體(ti) MCF7細(xi)胞(bao)，癌(ai)細(xi)胞(bao) 人肝癌(ai)細(xi)胞(bao),QGY-7701細(xi)胞(bao) T-108B膠原酶(mei)(含100mL酶(mei)解(jie)緩(huan)沖液(ye))10mL

人絨毛間葉成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)cDNAHVMF cDNA 犬雌(ci)激(ji)素(E)ELISA 試劑(ji)盒 NRP-1(neuropilin-1) 神經(jing)纖毛蛋(dan)白(bai)-1(抗原) 0.5mg

IDN3： Bipped B樣蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 人非小細(xi)胞(bao)肺腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao);NCI-H157

YAC-1(小(xiao)鼠(shu)淋(lin)巴瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠(shu)肺腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)系(xi);LA795 犬雌(ci)二(er)醇(chun)(E2)ELISA 試(shi)劑盒 NRP-2(neuropilin-2) 神經(jing)纖毛蛋(dan)白(bai)-2(抗原) 0.5mg

Iduronate 2 sulfatase： 艾杜糖-2-酯酶抗體(ti) DU 145, 人前(qian)列腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)

EFNA1 Protein Rat 重(zhong)組大鼠(shu) Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白(bai) (His 標簽(qian)) 犬白(bai)細(xi)胞(bao)分(fen)化抗原8(CD8)ELISA 試(shi)劑盒 NSBP1(Nucleosome-binding protein 1) 核(he)小(xiao)體(ti)結合蛋(dan)白(bai)1(抗原) 0.5mg

RL95-2 人子宮(gong)內(nei)膜(mo)癌(ai)細(xi)胞(bao)phospho-c-Raf (Ser259)： 0酸(suan)化原(yuan)癌(ai)基因c-Raf抗體(ti) 草魚腎(shen)細(xi)胞(bao);GIK

CM-M022小(xiao)鼠(shu)甲(jia)狀腺(xian)上皮(pi)細(xi)胞(bao)培養(yang)基100mL 大鼠(shu)α幹擾素(IFNα)ELISA試劑(ji)盒 ANG-2(Human Angiopoietin 2)  人血(xue)管生(sheng)成(cheng)素2 96T

phospho-c-Raf(Ser296)： 0酸(suan)化原(yuan)癌(ai)基因c-Raf抗體(ti) IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

間充質幹細(xi)胞(bao)培養(yang)基MSCM 大鼠(shu)α幹擾素(IFN-α)ELISA試劑(ji)盒 ANG-1(Human Angiopoietin 1)  人血(xue)管生(sheng)成(cheng)素1 96T

phospho-c-Raf(Ser338)： 0酸(suan)化原(yuan)癌(ai)基因c-Raf抗體(ti) 95-D(人高轉移(yi)肺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2

三(san)、培養(yang)註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請及時和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說明書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比例、所需 細(xi)胞(bao)因子等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於培養(yang)條件(jian)不壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客戶自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可以消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養(yang)基重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種到新的(de)培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿中，置(zhi)於培養(yang)箱中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相同(tong)條件(jian)的培養(yang)基用於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於和我司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因，個別敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請及時和我們(men)聯(lian)系，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤回訪直(zhi)至問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用的培養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培養(yang)基) 不(bu)能再用來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換用按照說明書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。