neuro-2a小(xiao)鼠(shu)腦神(shen)經(jing)瘤(liu)細胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅供(gong)科研(yan)研(yan)究使(shi)用、不得(de)用(yong)於臨(lin)床診斷！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然後(hou)按 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

2、細胞凍存：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中(zhong)進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存。使(shi)用(yong)程(cheng)序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養操(cao)作

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養凍存處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品說(shuo)明書為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的凍存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含(han)適(shi)量培養基(ji)的培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代：如果(guo)細胞密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去培(pei)養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸潤所(suo)有細胞，將(jiang)培養瓶置於37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而定(ding)），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞消(xiao)化情(qing)況，若細胞大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕敲幾下培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍存：待(dai)細胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入無菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數。

b、根(gen)據細胞數(shu)量加入(ru)無血(xue)清(qing)細胞凍存液(ye)，使(shi)細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存管(guan)做好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿(na)取。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

NPTN： 間(jian)質(zhi)細胞衍化因(yin)子受(shou)體1抗體 大(da)鼠(shu)腦膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細胞;C6

UM-UC-3(人(ren)膀胱移(yi)行(xing)細胞癌(ai)) 5×106cells/瓶×2 HUM, 正常(chang)人(ren)主動脈(mai)平滑肌(ji)細胞 大(da)鼠(shu)色(se)胺(an)酸(suan)羥(qiang)化(hua)酶(mei)2(TPH2)ELISA試劑盒(he) OLAb  大(da)鼠(shu)氧化(hua)低(di)密度(du)脂(zhi)蛋白抗體 非洲綠(lv)猴腎(shen)細胞;VERO

IL12A & IL12B Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 大(da)鼠(shu)色(se)胺(an)酸(suan)羥(qiang)化(hua)酶(mei)1(TPH1)ELISA試劑盒(he) Orexin A(Human Orexin A)  人(ren)阿立(li)新A 96T

Nuclear Pore Complex Proteins： 核(he)孔復(fu)合體蛋白抗體 EPO Others Rat 大(da)鼠(shu) Erythropoietin / EPO 桿(gan)狀病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

小(xiao)鼠(shu)軟(ruan)骨(gu)細胞培(pei)養基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)三(san)葉因(yin)子(zi)3(TFF3)ELISA試劑盒(he) PEDF(Mouse pigment epithelium-derived factor)  小(xiao)鼠(shu)色(se)素上皮(pi)衍生(sheng)因子(zi) 96T

S-180細胞，小(xiao)鼠(shu)肉瘤(liu)細胞 THP-1(單(dan)核(he)細胞白血(xue)病(bing)) 人(ren)細胞;C-33A 人(ren)B細胞連(lian)接(jie)蛋白(BLNK)ELISA 試劑盒(he) VWF (Von Willebrand Factor) 血(xue)管(guan)假(jia)性(xing)血(xue)友病(bing)因(yin)子/血(xue)管(guan)性(xing)血(xue)友病(bing)因(yin)子抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IL-21R： 白介(jie)素21受體抗體 DLL1 Others Human 人 DLL1 / Delta-1 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

人(ren)骨(gu)骼(ge)肌(ji)衛(wei)星(xing)細胞RNAHSkMSC miRNA5 μg 人(ren)B細胞活化因子(zi)受體(BAFF-R)ELISA 試劑盒(he) Wnt1 信號(hao)通(tong)路Wnt1抗原 0.5mg

IL-22： 白介(jie)素-22抗體 白介(jie)素-2轉染耐VP16絨(rong)癌(ai)細胞;JEG-3/VP16-IL-2

SW579(人(ren)甲狀腺(xian)鱗(lin)癌(ai)細胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型流(liu)感(gan) H1N1 (A/USSR/90/1977) 神(shen)經(jing)酶(mei) (Neuraminidase / NA) 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 人(ren)B細胞分(fen)化因(yin)子(BCDF)ELISA 試劑盒(he) WWOX (WW domain-containing oxidoreductase) 包(bao)含(han)氧化(hua)還原(yuan)酶(mei)的WW域(yu)抗原(yuan) 0.5mg

neuro-2a小(xiao)鼠(shu)腦神(shen)經(jing)瘤(liu)細胞H9c2大(da)鼠(shu)心肌(ji)細胞(ATCC來(lai)源(yuan)) 大(da)鼠(shu)白介(jie)素1β前體(pro-IL1B)ELISA試劑盒(he) DUB(Human deubiquitinating enzyme)  人(ren)泛素分(fen)解(jie)酶(mei) 96T

Phospho-Ret (Tyr1062)： 0酸(suan)化(hua)指(zhi)狀(zhuang)蛋白RET抗體 CLEC4B2 Others Rat 大(da)鼠(shu) CLEC4B2 / mDCAR1 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

CatL2 家貓(mao)肺(fei)成(cheng)纖維(wei)樣細胞 大(da)鼠(shu)白介(jie)素1β前體(IL1B)ELISA試劑盒(he) sPLA2(Human secreted phospholipase A2)  人(ren)分(fen)泌(mi)型0脂(zhi)酶(mei)A2 96T

RANKL： 骨(gu)保護(hu)蛋白配體抗體 XJH細胞，B淋(lin)巴細胞 人(ren)男性(xing)正常細胞系(xi),HS68細胞 人(ren)胎兒(er)胸腺(xian)細胞株;HFT-8810 [HFT8810]

FGFR4 Others Human 人(ren) FGFR4 / FGF Receptor 4 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 大(da)鼠(shu)白介(jie)素1β(IL-1β)ELISA試劑盒(he) E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase)  人(ren)泛素連(lian)接(jie)酶(mei) 96T

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後(hou)首先觀(guan)察細胞瓶是否(fou)完好，培養液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀細胞說(shuo)明書，了(le)解(jie)細胞相(xiang)關(guan)信息，如細胞形態(tai)、所用培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子等(deng)，確(que)保(bao)細胞培(pei)養條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培(pei)養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致細胞出(chu)現問(wen)題，責任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞瓶表面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸問(wen)題，部(bu)分(fen)細胞由(you)於溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎形成(cheng)碎片，是正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新的培(pei)養瓶或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件的培(pei)養基(ji)用(yong)於細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天各(ge)拍(pai)幾張細胞照片，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由於運輸的原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩定(ding)的情(qing)況，請(qing)及(ji)時和我們聯(lian)系，告(gao)知細胞 的具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該細胞僅供(gong)科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照說(shuo)明書細胞培(pei) 養條(tiao)件新配制(zhi)的培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。