NIH/3T3小(xiao)鼠(shu)胚胎細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用、不(bu)得用於臨床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培養

液終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

壹(yi)、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入培養液終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉入液氮中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期保存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降溫盒(he)可(ke)直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具體操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產品說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)主。將含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含適量(liang)培養基的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜）。第(di)二(er)天換液(ye)並檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上清，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使消化液浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培養瓶(ping)置於37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿回操(cao)作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止消(xiao)化。輕輕打(da)勻後裝(zhuang)入無菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入無菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入液氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以便下(xia)次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售的(de)產品(pin)：

NIPA： 間(jian)變(bian)性(xing)淋(lin)巴瘤激酶(mei)核相互(hu)作(zuo)用伴侶蛋白(bai)抗體 TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

CM-R084大(da)鼠(shu)骨骼(ge)肌細(xi)胞(bao)培(pei)養基100mL 大(da)鼠(shu)軟骨(gu)寡聚(ju)基質(zhi)蛋(dan)白(bai)(COMP)ELISA試劑(ji)盒 GP- II b III a/CD41+CD61  大(da)鼠(shu)血(xue)小(xiao)板(ban)膜糖(tang)蛋白(bai)ⅡbⅢa 96T

phospho-NIPA(Ser354)： 0酸化間變(bian)性(xing)淋(lin)巴瘤激酶(mei)核相互(hu)作(zuo)用伴侶蛋白(bai)抗體 大(da)鼠(shu)腎上(shang)腺嗜(shi)鉻細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao);PC-12 [PC12]

WERI-Rb-1(人視(shi)網(wang)膜神(shen)經膠質(zhi)瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 LX-2, 人肝星(xing)形細(xi)胞(bao)株(zhu) 大(da)鼠(shu)乳(ru)鐵傳遞蛋(dan)白(bai)/乳(ru)鐵蛋(dan)白(bai)(LF/LTF)ELISA試劑(ji)盒 ICA(Mouse islet cell antibody)  小(xiao)鼠(shu)胰島細(xi)胞(bao)抗體 婆(po)羅門牛皮(pi)膚(fu)成(cheng)纖維樣細(xi)胞(bao);BOS-4

IL12B Protein Human 重(zhong)組(zu)人 IL12B / P40 蛋白(bai) (His 標(biao)簽) 大(da)鼠(shu)乳(ru)鐵傳遞蛋(dan)白(bai)/乳(ru)鐵蛋(dan)白(bai)(LF/LTF)ELISA 試劑(ji)盒 TSP-1  大(da)鼠(shu)血(xue)小(xiao)板(ban)反(fan)應(ying)蛋白(bai)/敏(min)感(gan)蛋(dan)白(bai)1 96T

人臍(qi)動(dong)脈內皮(pi)細(xi)胞(bao)培(pei)養基 100mL 人Agoi相關蛋白(bai)(AGRP)ELISA 試劑(ji)盒 Beta1-adrenergic receptor 能受(shou)體β1(抗原(yuan)) 0.5mg

IGFL1： 胰(yi)島素生長(chang)因子樣家(jia)族成(cheng)員1抗體 人臍(qi)動(dong)脈平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao) 人肺鱗(lin)狀細(xi)胞(bao)癌，NCI-H2170[H2170]細(xi)胞(bao) L6565(小(xiao)鼠(shu)L6565白(bai)血(xue)病克隆(long)細(xi)胞(bao)系)

SLIK6 Others Human 人 SLIK6 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑(ji)盒 Annexin V 膜粘(zhan)連蛋(dan)白(bai)-5(抗原(yuan)) 0.5mg

IL-17C： 白(bai)介素-17C抗體 中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)卵巢(chao)細(xi)胞(bao)(亞(ya)系克(ke)隆); EPO-CHO-T

BRL-3A細(xi)胞(bao)，大(da)鼠(shu)正(zheng)常肝細(xi)胞(bao) SK-N-SH(神(shen)經(jing)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)) 人髓(sui)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao);Daoy 人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑(ji)盒 AQP4(aquaporin Protein-4) 水通道(dao)蛋(dan)白(bai)-4(抗原(yuan)) 0.5mg

NIH/3T3小(xiao)鼠(shu)胚胎細(xi)胞(bao)支(zhi)原體PCR檢測(ce)試劑(ji)盒MYCO 大(da)鼠(shu)白(bai)介素1α(IL-1α)ELISA 試劑(ji)盒 PP(Human Pepsin)  人 96T

RAR alpha： 維受(shou)體RAR α/RAR α抗體 草(cao)魚(yu)肝(gan)臟(zang)細(xi)胞(bao);L8824

EB病(bing)毒(du)轉化的(de)人B淋(lin)巴細(xi)胞(bao)(傣(dai)族(zu));KM9403 人臍(qi)動(dong)脈平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)白(bai)介素19(IL19)ELISA試劑(ji)盒 HK(Human Hexokinase)  人己(ji)糖(tang)激酶(mei) 96T

RAR Beta： 維受(shou)體β抗體 CL-0409P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小(xiao)鼠(shu)骨髓(sui)瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

NIH/3T3, 小(xiao)鼠(shu)成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)系 大(da)鼠(shu)白(bai)介素18結合(he)蛋白(bai)(IL18BP)ELISA試劑(ji)盒 PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1)  人酸脫(tuo)氫(qing)酶(mei)E1 96T

三(san)、培養註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完好(hao)，培養液是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細(xi)胞(bao)相(xiang)關信息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培(pei)養基、血(xue)清比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養條件壹(yi)致，若(ruo)由於培(pei)養條件不(bu)壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責(ze)任由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常現(xian)象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可(ke)以消化，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培養瓶(ping)或(huo)培養皿中(zhong)，置於培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用相(xiang)同條件(jian)的(de)培養基用於細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建議客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和(he)我司(si)技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流。由(you)於運輸的(de)原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請及(ji)時(shi)和我們(men)聯(lian)系，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具體情(qing)況，以便我們(men)的(de)技術(shu)人員跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的(de)培養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不(bu)能再(zai)用來培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按照說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養條件新(xin)配(pei)制的(de)培養基來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。