panc02小鼠胰(yi)腺癌(ai)細(xi)胞

公司產品(pin)僅(jin)供科(ke)研研究使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待細胞回縮變圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使之(zhi)脫落，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待細胞回縮變圓後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存管中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞凍(dong)存管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保存。使用程序(xu)

降溫(wen)盒可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅(jin)供參考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品(pin)說(shuo)明書為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的凍(dong)存管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而定），然(ran)後在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞消化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大部分(fen)變圓並(bing)脫落，迅速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細胞生長狀(zhuang)態良(liang)好時，可進(jin)行細(xi)胞凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集細胞及細胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去上清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞計數。

b、根(gen)據細(xi)胞數量加(jia)入(ru)無(wu)血清細(xi)胞凍(dong)存液，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌儲存。記錄凍(dong)存管位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的產品(pin)：

Phospho-eNOS (Ser1176)： 0酸化(hua)合成(cheng)酶3(內(nei)皮型)抗(kang)體 IL20RA Others Human 人 IL20Rα 人細胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

CM-R036大鼠小(xiao)腸血管(guan)內(nei)皮(pi)細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL 大鼠熱休克蛋(dan)白(bai)47(HSP47)ELISA試劑盒 P-gp(Human permeability glycoprotein)  人P糖蛋(dan)白(bai)/滲透(tou)性(xing)糖蛋(dan)白(bai) 96T

Nesfatin-1： 新的飽食分(fen)子(zi)蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 大鼠腎(shen)上腺嗜鉻細(xi)胞瘤細胞(高分(fen)化(hua));PC-12(高(gao)分(fen)化(hua))

人脈(mai)絡(luo)絲內皮(pi)細(xi)胞 (HCPEC)( 5×105 ) 人臍動(dong)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細胞 Raji，人Butt's淋巴瘤(liu)細(xi)胞 大鼠熱休克蛋(dan)白(bai)40(HSP-40)ELISA試劑盒 TAT(Mouse thrombin-antithrombin complex)  小鼠(shu)抗(kang)復(fu)合物(wu) 96T

Nectin 4： 脊髓灰(hui)質炎病毒(du)受(shou)體相(xiang)關蛋(dan)白(bai)4抗體(ti) 盤羊皮(pi)膚(fu)細胞;OAM-S1

TE-1(人食管癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠(shu)原B細(xi)胞株;BaF3 人6-羥多(duo)巴胺(an)(6-OHDA)ELISA 試劑盒 CXCR1 (CXC-chemokine receptor 1) 細胞表(biao)面趨化因子(zi)受(shou)體1抗(kang)原 0.5mg

phospho-IGF1R (Tyr1165 + Tyr1166)： 0酸化(hua)1受(shou)體抗體(ti) 肝實(shi)質細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

CSF1 Protein Human 重組(zu)人(ren) / 食蟹猴(hou) M-CSF / CSF-1 蛋(dan)白(bai) (His 標簽) 人6-羥多(duo)巴胺(an)(6-OHDA)ELISA 試劑盒 COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2) 前列(lie)腺素(su)氧(yang)化(hua)環化酶2(抗(kang)原) 0.5mg

phospho-ITGB3(Tyr773)： 0酸化(hua)整(zheng)合素β3抗(kang)體(ti) PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / PTPT 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

人髂(qia)動(dong)脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人(ren)5脂(zhi)加(jia)氧(yang)酶(5-LO/LOX)ELISA 試劑盒 c-phycocyanin(C-PC) C-藻藍(lan)素(su)(藻藍(lan)蛋(dan)白(bai)) 0.5mg

panc02小鼠(shu)胰(yi)腺癌(ai)細(xi)胞RGS14： G蛋(dan)白(bai)信(xin)號(hao)調(tiao)節(jie)因子(zi)14抗(kang)體 人(ren)整合SV40基因的上皮(pi)細胞;HBL-100 [HBL100]

CL-0022AGS(人胃(wei)腺癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大鼠白(bai)介(jie)素10(IL-10)ELISA試劑盒 PGDS(Human Prostaglandin D Synthase)  人前(qian)列(lie)腺合成(cheng)酶 96T

RANK： 核轉錄因子(zi)NF-κB受(shou)體/核因子(zi)kB受(shou)體活化(hua)因子(zi)抗(kang)體 NBL1 Others Human 人(ren) DAN 人細胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

間充(chong)質幹細胞生長添加(jia)物(wu)-無血清MSCGS-2 大鼠白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒 PG-C(Human Pepsinogen C)  人原(yuan)C 96T

phospho-RUNX1 (Ser266)： 0酸化(hua)急(ji)性(xing)髓細胞白(bai)血病(bing)1蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 高背鯽魚尾鰭(qi)細胞;GBJd

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞後首先觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞說(shuo)明書，了(le)解細胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞形態、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細(xi)胞出現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸問(wen)題，部分(fen)細(xi)胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇烈碰亡破碎形成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細胞狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件的培(pei)養(yang)基(ji)用於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片(pian)，記錄細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我司技術(shu)部溝通(tong) 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸的原因，個別敏感細(xi)胞會出現(xian)不(bu)穩(wen)定的情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知細胞 的具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我們的技術(shu)人員跟(gen)蹤回訪直(zhi)至問(wen)題解決。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科(ke)研使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請換用按(an)照(zhao)說(shuo)明書細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新配(pei)制(zhi)的培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後第壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。