PK-15豬腎細胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科研研究使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後加入 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基重懸，然(ran)後按 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱中培(pei)養；

壹、商品(pin)介紹(shao)：

2、細胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後加入培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍存管(guan)中；

4）先(xian)將細胞(bao)凍存管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保存。使用程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直接放入-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操作(zuo)

1) 復蘇細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍存處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步驟以隨(sui)貨產品(pin)說明(ming)書為(wei)主。將含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速(su)搖(yao)晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養基後吹勻。然後將所有細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含適(shi)量培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二天換液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清，用不(bu)含鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養箱中消化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變圓並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養基終止消化(hua)。輕輕(qing)打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹勻。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分到新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態良好(hao)時(shi)，可進(jin)行細胞(bao)凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，用PBS清洗壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數(shu)量加入無(wu)血清細胞(bao)凍存液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍存管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位置(zhi)以便(bian)下(xia)次(ci)拿取。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

NADPH oxidase 4： NADPH氧(yang)化(hua)酶4抗(kang)體(ti) CDH1 Others Human 人(ren) Cadherin-1 / CDH1 / CD324 / E-cadherin 人細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照)

CM-H132人小(xiao)梁網(wang)細胞(bao)培(pei)養基100mL 大鼠鞘(qiao)醇(chun)-1-0酸0酸酶1(SGPP1)ELISA試劑(ji)盒(he) Cr(Mouse Crosslaps)  小(xiao)鼠(shu)骨(gu)膠原交(jiao)聯 96T

NDE1： 核分布(bu)基因E同源(yuan)蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti) 大(da)鼠(shu)腎上(shang)腺(xian)嗜鉻細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao);PC-12 [PC12]

人小(xiao)腦顆粒細胞(bao) (HCGC)( 5×105 ) 人(ren)骨(gu)髓(sui)間充(chong)質幹細胞(bao)(hMSCs) EC109，人(ren)食(shi)管(guan)癌細胞(bao) 大(da)鼠(shu)羥(qiang)烷(wan)基脫氫酶β(HADHβ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) CED-3(Human caenorhabditis elegans death gene)  人美麗線蟲(chong)雕(diao)亡(wang)基因 96T

NEK9： 絲(si)酸/蘇酸蛋白(bai)激酶NEK9抗(kang)體(ti) 家(jia)貓(mao)肺(fei)細胞(bao);FCA-L2

Insulin Receptor： 胰島素受體(ti)抗(kang)體(ti) 人(ren)導管(guan)癌細胞(bao);ZR-75-1

U-2 OS(人骨(gu)肉(rou)瘤細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小(xiao)鼠(shu)胚胎成(cheng)纖維細胞(bao);3T6-Swiss albino 人(ren)17-酮(tong)類(lei)(17-KS)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) GHR (growth hormone receptor) 生長激素受體(ti)(抗(kang)原) 0.5mg

Insulin Receptor Alpha： 胰島素受體(ti)α抗(kang)體(ti) 肺(fei)成(cheng)纖維細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

EFNA4 Protein Human 重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白(bai) (Fc 標(biao)簽) 人(ren)17羥(qiang)(17-OHP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) GLUT1(Glucose transporter type 1) 葡萄糖轉(zhuan)運蛋(dan)白(bai)1(抗(kang)原) 0.5mg

Insulin Receptor Beta： 胰島素受體(ti)β抗(kang)體(ti) SMAD5 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) Smad5 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照)

PK-15豬腎細胞(bao)ST6GAL1 Others Human 人 ST6GAL1 / SIAT1 人細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠γ幹擾素(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒(he) AQP-5(Human Aquaporin 5)  人水(shui)通道(dao)蛋白(bai)5 96T

RXR beta： 核受體RXRβ抗體 人(ren)羊(yang)膜細胞(bao);WISH

T-103B I型膠原酶(含100mL酶解緩沖(chong)液(ye))10mL 大(da)鼠(shu)γ幹擾素(IFN-γ)ELISA試劑(ji)盒(he) AQP-3(Human Aquaporin 3)  人水(shui)通道(dao)蛋白(bai)3 96T

RAR gamma： 維受體γ抗體(ti) SELE Others Human 人(ren) E-Selectin / CD62E 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照)

少突膠質前(qian)體分化(hua)生長添(tian)加(jia)物OPCDS 大鼠γ幹擾素(IFN-γ)ELISA 試劑(ji)盒(he) AQP-2(Human Aquaporin 2)  人水(shui)通道(dao)蛋白(bai)2 96T

三、培(pei)養註意事(shi)項 

1. 收到細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培(pei)養液(ye)是(shi)否有漏液(ye)、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生請及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信息，如(ru)細胞(bao)形態、所用培(pei)養基、血清比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子等，確(que)保細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸(shu)問題(ti)，部分細胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎片，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直接混勻(yun)收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基重懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中進(jin)行培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養基用於(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到細胞(bao)後前 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的(de)原因，個別敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員(yuan)跟蹤回(hui)訪直至問題(ti)解決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使(shi)用。

8. 備註：運輸(shu)用的(de)培(pei)養基 (灌液培(pei)養基) 不(bu)能再用來培(pei)養細胞(bao)，請換用按照說明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養基來培(pei)養細胞(bao)。     收到細胞(bao)後第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。