PT-K75豬(zhu)鼻甲黏(nian)膜(mo)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品僅(jin)供(gong)科研(yan)研究(jiu)使用、不得用於(yu)臨床診斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀察，待細胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再輕(qing)輕吹打(da)細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按 1:2 比例(li)進行分瓶傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

壹(yi)、商品(pin)介紹：

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀察，待細胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕輕(qing)吹打(da)細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存管中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮中進行長(chang)期(qi)保(bao)存。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養(yang)操作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考，具體(ti)操作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書為主。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸液的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適量培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜（或將(jiang)細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可進行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中，使消(xiao)化液浸(jin)潤所(suo)有細胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況而定(ding)），然後在(zai)顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消化情況，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回(hui)操作臺，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕(qing)打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比例分(fen)到新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態良好時，可進行細胞凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無血(xue)清細(xi)胞凍(dong)存液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做好標識。將(jiang)凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮灌儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿取。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品：

小(xiao)鼠視網(wang)膜(mo)色素(su)上皮細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠前(qian)心(xin)肽(tai)(Pro-ANP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 PCX(Human Podocalyxin)  人足(zu)細胞標記(ji)蛋白(bai)/足(zu)盂(yu)蛋(dan)白 96T

Nebulette： 肌(ji)動蛋白(bai)結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai)Z盤狀蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 3T6-Swiss albino細胞(bao)，胚胎成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao) 人胰腺(xian)癌細胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2細胞(bao) CM-M040小(xiao)鼠肝竇內(nei)皮細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)100mL

SIRPA Others Mouse 小(xiao)鼠 SIRP alpha / CD172a 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠前(qian)列(lie)腺(xian)特異(yi)性(xing)抗(kang)原(PSA)ELISA試劑(ji)盒 CC16  大(da)鼠克(ke)拉(la)拉(la)細胞(bao)蛋(dan)白(bai) 96T

NFAT5： 活化T細胞(bao)核因(yin)子(zi)5蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) 人脈(mai)絡叢(cong)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)HCPF

RAW 264.7小(xiao)鼠單(dan)核(he)巨(ju)噬細胞白(bai)血病細胞(bao) RAW 264.7 macrophages in leukemia cells DMEM+10% FBS 大(da)鼠前(qian)列(lie)腺(xian)特異(yi)性(xing)抗(kang)原(PSA)ELISA 試劑(ji)盒 EPI  大(da)鼠 96T

IL-17RD： 白介素(su)17受(shou)體(ti)D抗(kang)體(ti) 大(da)鼠胚(pei)胎心(xin)肌(ji)細胞(bao);H9c2(2-1)

CHO-AA8細胞(bao)，轉入(ru)Tet-off調控(kong)含(han)EGFP基(ji)因的(de)CHO細胞 H9c2(2-1)(大(da)鼠心(xin)肌(ji)細胞(bao)) 615小(xiao)鼠前(qian)胃(wei)癌瘤株;Fc 人1,3-二(er)0酸甘(gan)油酸(1,3-DPG)ELISA 試劑(ji)盒 histone H3-like protein 組蛋(dan)白H3樣蛋白(C端多肽(tai)) 0.5mg

IL-17B： 白介素(su)-17B抗(kang)體(ti) CD97 Others Human 人 CD97 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

人小(xiao)氣道上皮細(xi)胞(bao)總RNAHSAEpiC NA 人1,3-βD葡葡糖(tang)苷(gan)酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 histone H3-like protein 組蛋(dan)白H3樣蛋白(N端多肽(tai)) 0.5mg

IAA： 吲哚(duo)乙酸/植(zhi)物(wu)生長(chang)素(su)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti) 人黑(hei)色素(su)瘤(liu)細(xi)胞(bao);A875

PT-K75豬(zhu)鼻甲黏(nian)膜(mo)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)CWbRL 刺毛鼠肺(fei)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細(xi)胞 大(da)鼠β細(xi)胞(bao)素(su)(BTC)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 TBM(Human tubular basement membrane antibogy)  人抗(kang)腎(shen)小(xiao)管基(ji)底膜抗(kang)體(ti) P3-X63-Ag8細胞(bao)，骨髓(sui)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 人T細胞白血(xue)病(bing)細胞,A3細胞(bao) EB病(bing)毒轉化的(de)人B淋巴(ba)細(xi)胞(bao);KMY0909

KIRREL3 Others Mouse 小(xiao)鼠 KIRREL3 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠β-位(wei)澱(dian)粉樣(yang)前體(ti)蛋白(bai)裂(lie)解(jie)酶2(βACE2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 AP13(Human apelin 13)  人apelin 13 96T

Robo3： 軸突(tu)導(dao)向(xiang)受(shou)體(ti)蛋白(bai)3抗(kang)體(ti) 人正(zheng)常肺上皮細(xi)胞(bao);BEAS-2B

CM-M116小(xiao)鼠視網(wang)膜(mo)色素(su)上皮細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)100mL 大(da)鼠β位(wei)澱(dian)粉樣(yang)前體(ti)蛋白(bai)裂(lie)解(jie)酶2(BACE2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 AP36(Human Apelin 36)  人Apelin 36 96T

RABX5： G蛋白(bai)相(xiang)關(guan)RABX5抗(kang)體(ti) FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是否(fou)完好，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述現象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時和(he)我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞(bao)說明書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血清比例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培(pei)養(yang)條件不壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，責任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面，顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫度 變化及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常現象(xiang)。觀(guan)察好細胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中進行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條件的(de)培養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到細胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍幾張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流。由(you)於運輸(shu)的(de)原因，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩定(ding)的(de)情況，請(qing)及(ji)時和(he)我們聯(lian)系，告知(zhi)細胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研(yan)使用。

8. 備註：運輸(shu)用的(de)培養(yang)基(ji) (灌液培養(yang)基(ji)) 不能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新(xin)配制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收到細胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。