LEC-1倉(cang)鼠卵(luan)巢細胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研究(jiu)使用(yong)、不得用於臨(lin)床診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆蓋(gai)培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終止消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基(ji)重懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱中培養；

壹(yi)、商(shang)品介紹：

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆蓋(gai)培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru)培養液終

止消(xiao)化，輕輕吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並放置於凍存(cun)管(guan)中；

4）先將細胞(bao)凍存(cun)管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期保存。使用程序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培養凍存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體操(cao)作步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品說明書為(wei)主(zhu)。將含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養基(ji)的培養瓶中培養過夜（或將細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第二(er)天換(huan)液(ye)並檢查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄去培養上清(qing)，用不含鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞(bao)，將培養瓶置於37℃培養箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓並脫落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養瓶後加2-3ml培養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養液後吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到新的(de)含8 mL培養基(ji)的新(xin)皿(min)中或者瓶中(zhong)，置於(yu)培養箱中培養。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標(biao)識。將凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置以便下(xia)次拿取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出售的產品：

MIP4： 巨(ju)噬細(xi)胞(bao)炎癥蛋白(bai)18抗(kang)體 人(ren)低(di)分(fen)化肺(fei)腺癌細(xi)胞(bao);SK-LU-1

CLCF1 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) N1 / CLCF1 / CLC 蛋白(bai) (Fc 標(biao)簽) 大鼠透明質酸(suan)結合(he)蛋白(bai)1(HABP1)ELISA試劑盒(he) omentin(Mouse omentin)  小鼠(shu)網膜(mo)素(su) 96T

MITF： MITF相(xiang)關轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子抗體 IL17RB Others Human 人 IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

小(xiao)鼠(shu)腸(chang)平滑肌(ji)細(xi)胞(bao)培養基(ji) 100mL 大鼠透明質酸(suan)結合(he)蛋白(bai)(HABP)ELISA試劑盒(he) GHRP-Ghrelin  大鼠生長激(ji)素(su)釋(shi)放肽ghrelin 96T

MTOR： 雷(lei)帕靶蛋白(bai)抗(kang)體 HO-8910細(xi)胞(bao)，卵巢(chao)癌細(xi)胞(bao) 人胃(wei)腺(xian)癌細(xi)胞(bao),MCG803細胞(bao) 大耳山羊肺(fei)細胞(bao);LDG-1

CCL20 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠(shu) CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白(bai) (His 標(biao)簽) 人(ren)鼻(bi)咽(yan)癌(NPC)ELISA 試劑盒(he) MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 層粘(zhan)連蛋白(bai)受體(ti)1抗(kang)體(ti) DPYS Others Human 人(ren) DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

人(ren)小(xiao)腸(chang)粘(zhan)膜(mo)上(shang)皮細胞(bao)培養基(ji) 100mL 人鼻(bi)病毒(du)(RhV)ELISA試劑盒(he) MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘(zhan)連蛋白(bai)受體(ti)1抗(kang)原(yuan)(C端(duan)) 0.5mg

IGFBP3： 結合(he)蛋白(bai)3抗(kang)體 非(fei)洲綠猴腎細胞(bao)(SV40轉化);COS-1 [COS1] 轉(zhuan)染腺病(bing)毒(du)E1A基(ji)因(yin)的人(ren)腎上皮細胞(bao)，293細胞(bao) QGY-7703(肝癌細(xi)胞(bao))

TNFSF13 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) TNFSF13 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 人苯並-DNA(PAH-DNA)ELISA試劑盒(he) MK(Midkine) 中期(qi)因(yin)子/肝素(su)結合(he)生長因(yin)子抗原 0.5mg

IL-6R Beta/CD130/gp130： 白(bai)細(xi)胞(bao)介素(su)6受體(ti)β抗(kang)體(ti) CM-H135人(ren)脈(mai)絡膜微(wei)血(xue)管(guan)細胞(bao)培養基(ji)100mL

LEC-1倉(cang)鼠卵(luan)巢細胞(bao)phospho-c-Raf(Ser471)： 0酸(suan)化原(yuan)癌基(ji)因(yin)c-Raf抗體(ti) 猴(hou)脈(mai)絡膜-視(shi)網膜(mo)(內皮)細胞(bao);RF/6A

人(ren)胚腎上皮細胞(bao)系;KiMA 人(ren)直腸(chang)粘(zhan)膜(mo)上(shang)皮細胞(bao)培養基(ji) 100mL 大鼠雌三醇(chun)(E3)ELISA 試劑盒(he) 17-KS(Human 17-ketosteroids)  人17-酮類(lei) 96T

phospho-c-Raf(Tyr341)： 0酸(suan)化原(yuan)癌基(ji)因(yin)c-Raf抗體(ti) 冠(guan)狀(zhuang)動脈(mai)平滑肌(ji)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

MN-c, 小(xiao)鼠(shu)皮質神經元 大鼠雌激(ji)素(su)轉移(yi)酶(SULT1E1)ELISA試劑盒(he) 17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids)  人17羥皮質類(lei) 96T

phospho-c-Raf(Thr269)： 0酸(suan)化原(yuan)癌基(ji)因(yin)c-Raf抗體(ti) FGFR1 Others Cynomolgus 食(shi)蟹(xie)猴 FGFR1 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

三(san)、培養註意事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首(shou)先觀察細胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培養液是(shi)否(fou)有漏液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時和我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說明書，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確保細胞(bao)培養條(tiao)件壹(yi)致，若由於(yu)培養條(tiao)件不壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸(shu)問(wen)題(ti)，部分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇烈(lie)碰亡(wang)破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶置於(yu) 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的培養基(ji)重懸(xuan) 細胞(bao)，並接種到新的(de)培養瓶或培養皿(min)中，置於(yu)培養箱中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件的培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由(you)於運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個別敏感細胞(bao)會出(chu)現不穩定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時和我(wo)們(men)聯系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以便我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題(ti)解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使用。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的培養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培養細胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明書細胞(bao)培 養條(tiao)件新配(pei)制的培養基(ji)來(lai)培養細胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。