LLC小鼠(shu)肺癌細(xi)胞

公司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科研研(yan)究使(shi)用、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床診斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代：

1）細(xi)胞生長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱(dian)細(xi)胞用 1-2ml 培養基重懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進行(xing)分瓶(ping)傳代，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

壹(yi)、商品(pin)介(jie)紹：

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入培養液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用(yong)適量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞，並放(fang)置於(yu)凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存(cun)管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中(zhong)進行(xing)長期保(bao)存(cun)。使(shi)用程序(xu)

降(jiang)溫盒可直接(jie)放(fang)入-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以下細(xi)胞培養凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品(pin)說明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞懸液的(de)凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞懸液加(jia)入含(han)適量(liang)培養基的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培養過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸液加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約8 mL培養基，培養過(guo)夜）。第二(er)天換液(ye)並檢查細(xi)胞密度。

2) 細(xi)胞傳代：如果(guo)細(xi)胞密度達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生長狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養液(ye)，裝入無(wu)菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞計數。

b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加(jia)入無(wu)血清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置以便下次(ci)拿(na)取。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售的(de)產(chan)品(pin)：

Receptor： 巨(ju)噬(shi)細(xi)胞甘露(lu)糖受(shou)體抗(kang)體(ti) HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

CL-0183PA317(小(xiao)鼠(shu)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大鼠(shu)同型(xing)半(ban)胱(guang)酸(suan)(Hcy)ELISA 試劑盒 TGF Beta2  大鼠(shu)轉(zhuan)化(hua)生(sheng)長因(yin)子(zi)β2 96T

Mucin 5AC： 胃粘(zhan)液(ye)素抗(kang)體(ti) tTA基因修(xiu)飾的(de)小(xiao)鼠(shu)胰腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(B類(lei));Pan02-CAG-tTA-2D1

RBL-1(大鼠(shu)嗜堿性(xing)粒(li)細(xi)胞性白血(xue)病(bing)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 PC-3(人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞) 大鼠(shu)同型(xing)半(ban)胱(guang)酸(suan)(HA)ELISA試劑盒 MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha)  人(ren)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞炎白(bai)3α 96T

MMP-20： 基質金(jin)屬蛋白酶20抗(kang)體(ti) 人(ren)結(jie)直(zhi)腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞;SW620 [SW 620;SW-620]

IFI44L： 幹(gan)擾素誘(you)導蛋白44樣蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) 人(ren)細(xi)胞;Hela

PA317(小(xiao)鼠(shu)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 食(shi)蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 人半(ban)乳糖(tang)6酯(zhi)酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基質金(jin)屬蛋白酶-26抗(kang)原(yuan) 0.5mg

ITGB4： 整(zheng)合(he)素β4抗(kang)體(ti) 人(ren)尿(niao)道(dao)上(shang)皮細(xi)胞HUC

XCL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 XCL1 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽) 人半(ban)乳甘(gan)露(lu)聚糖(tang)(GM)ELISA試劑盒 MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質金(jin)屬蛋白酶-9抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IGKV A18： kappa輕(qing)鏈可變區(qu)抗(kang)體(ti) SHPK Others Human 人(ren) CARKL / SHPK 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

LLC小(xiao)鼠(shu)肺癌細(xi)胞CL-0394NCI-H2170(人(ren)肺鱗(lin)癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大鼠(shu)雌(ci)二醇(chun)(E2)ELISA試劑盒 CALD(Human Caldesmon)  人(ren)鈣調結(jie)合(he)蛋白(bai) 96T

phospho-RPS6KB1(Ser434)： 0酸(suan)化(hua)核(he)糖體S6蛋白(bai)激(ji)酶(mei)抗(kang)體(ti) HMGB1 Others Human 人(ren) HMGB1 / HMG1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

人(ren)腦血(xue)管周細(xi)胞RNAHBVP miRNA5 μg 大鼠(shu)雌(ci)二醇(chun)(E2)ELISA 試劑盒 CaN(Human calcineurin)  人(ren)鈣調0酸(suan)酶(mei) 96T

phospho-RPS6KB1(Ser421)： 0酸(suan)化(hua)核(he)糖體S6蛋白(bai)激(ji)酶(mei)抗(kang)體(ti) 恒河猴胚(pei)腎(shen)細(xi)胞;FRhK-4 [FRhK4]

人(ren)永生(sheng)化(hua)淋(lin)巴(ba)細(xi)胞;CNLMG-B5537LC 人肝實(shi)質(zhi)細(xi)胞培養基 100mL 大鼠(shu)垂體(ti)腺(xian)苷酸(suan)環(huan)化(hua)酶(mei)激(ji)活(huo)肽(ADCYAP1)ELISA試劑盒 Human CTX-2  人(ren)骨(gu)退化(hua)特(te)異(yi)標(biao)誌(zhi)物 96T

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培養液(ye)是(shi)否有漏液(ye)、渾濁等(deng)現象，若(ruo)有上(shang)述現象 發(fa)生請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明書(shu)，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細(xi)胞形態(tai)、所用(yong)培養基、血清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞培養條(tiao)件(jian)壹致，若(ruo)由於(yu)培養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而導致細(xi)胞出現問題(ti)，責任(ren)由 客戶自行承擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表面，顯微鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於溫度 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可以消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直接(jie)混勻收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培養基重懸 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養瓶(ping)或(huo)培養皿中，置於培養箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶用相(xiang)同(tong)條件(jian)的(de)培養基用於(yu)細(xi)胞培養。

6. 建議客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張細(xi)胞照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和(he)我(wo)司(si)技術(shu)部溝通 交流(liu)。由於(yu)運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞會出現不(bu)穩定的(de)情況，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細(xi)胞 的(de)具(ju)體情況，以便我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅供科研使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培養基 (灌液培養基) 不(bu)能再(zai)用(yong)來(lai)培養細(xi)胞，請(qing)換用(yong)按照(zhao)說明書(shu)細(xi)胞培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培養基來培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳代建議 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。