Marc145非(fei)洲綠猴(hou)胚(pei)胎(tai)腎(shen)細胞

公(gong)司產(chan)品僅(jin)供科(ke)研研究使用、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳代：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶傳代，最後(hou)放入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹：

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕吹(chui)打細胞使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進行長期(qi)保(bao)存。使(shi)用(yong)程序

降溫盒可直接放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下細胞培(pei)養凍存處理僅(jin)供參考，具體(ti)操(cao)作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說(shuo)明書(shu)為主。將(jiang)含有1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基混合均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞懸(xuan)液加入(ru)含適(shi)量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養過夜（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查(zha)細胞密度。

2) 細胞傳代：如果(guo)細胞密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行傳代培養(yang)。

a、棄去(qu)培養上清，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞，將(jiang)培養瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況，若細胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞生(sheng)長狀(zhuang)態良好(hao)時，可進行細胞凍(dong)存。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細胞及(ji)細胞培(pei)養液，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍，棄盡PBS，進行細胞計(ji)數。

b、根據細胞數(shu)量加入(ru)無(wu)血清細胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍存管(guan)做好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下次(ci)拿取。

公(gong)司正在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品：

Metronidazole： 抗體(ti) SERPINB6 Others Human 人(ren) SerpinB6 / PI-6 桿狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

小鼠(shu)肝實質細胞培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)糖原0酸(suan)化(hua)酶同(tong)工(gong)酶(mei)MM(GP-MM)ELISA 試(shi)劑盒 MIC-1 human  人巨噬(shi)細胞抑(yi)制因(yin)子-1 ELISA 試(shi)劑盒 96T

MAGE-A4： 黑(hei)色素(su)瘤相(xiang)關抗原4抗體(ti) HeLa 229細胞，細胞 人(ren)低分(fen)化(hua)胃癌(ai)細胞,MKN-45細胞 鼬肺上(shang)皮(pi)細胞;MV-1-Lu

ASGR1 Others Human 人(ren) ASGPR1 / ASGR1 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠(shu)糖原0酸(suan)化(hua)酶同(tong)工(gong)酶(mei)II(GP-II)ELISA試(shi)劑盒 CAM  大鼠(shu)鈣調素(su) 96T

CAB39： 鈣(gai)結合蛋(dan)白(bai)39抗體(ti) NeuroFectagen? 神(shen)經(jing)細胞轉(zhuan)染試(shi)劑盒

eIF3A： 真(zhen)核(he)翻(fan)譯起(qi)始因(yin)子3A抗體(ti) 非(fei)洲綠猴(hou)腎(shen)細胞系(xi)/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+ 非小細胞肺癌(ai)，NCL-H460細胞 NCI-H460 [H460](大(da)細胞肺癌(ai)細胞)

TMED1 Others Human 人(ren) TMED1 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 人(ren)白(bai)細胞活(huo)化(hua)黏附因(yin)子(ALCAM)ELISA 試(shi)劑盒 MYSM1(Myb-like, SWIRM and MPN domain-containing protein 1) MYSM1抗原 0.5mg

phospho-eIF4G (ser1185)： 0酸(suan)化(hua)真(zhen)核(he)翻(fan)譯起(qi)始因(yin)子4G抗體(ti) CM-H103胎(tai)兒(er)真(zhen)皮(pi)成(cheng)纖(xian)維細胞培(pei)養基100mL

L6565細胞，小鼠(shu)白血病(bing)克隆細胞系(xi) 破傷(shang)風桿菌(jun)/梭菌(jun)Closidium tetani 猴(hou)脈(mai)絡膜(mo)-視(shi)網(wang)膜(mo)(內(nei)皮)細胞;RF/6A 人(ren)白細胞共(gong)同(tong)抗原(LCA/CD45)ELISA 試(shi)劑盒 MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原 0.5mg

Integrin alpha 4+Beta 7： 整(zheng)合素(su)α4β7抗體(ti) CPB1 Others Mouse 小鼠(shu) CPB1 / PCPB 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

Marc145非(fei)洲綠猴(hou)胚(pei)胎(tai)腎(shen)細胞MLF, 小鼠(shu)淋巴(ba)成纖(xian)維細胞 大(da)鼠(shu)成纖維(wei)細胞生(sheng)長因(yin)子3(FGF3)ELISA試(shi)劑盒 CTX(Human Cyclophosphamide)  人環0酰胺(an) 96T

RBP4： 醇(chun)結合蛋(dan)白(bai)4抗體(ti) EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴(hou) EphB1 / EPHT2 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

MG-63 人(ren)成骨(gu)肉瘤(liu)細胞 大(da)鼠(shu)成纖維(wei)細胞生(sheng)長因(yin)子23(FGF23)ELISA試(shi)劑盒 1,3-DPG(Human 1,3-Disphosphoglycerate,  人1,3-二0酸(suan)甘(gan)油(you)酸(suan) 96T

REG1A： 胰島(dao)細胞再(zai)生(sheng)因(yin)子ICRF抗體(ti) HCT-116細胞，低(di)分(fen)化(hua)結腸腺癌(ai)細胞 人(ren)子宮(gong)內(nei)膜腺(xian)癌(ai)細胞,HEC-1-A細胞 人(ren)肺成(cheng)纖(xian)維細胞cDNAHPF cDNA

ARG1 Others Human 人(ren) Arginase-1 / ARG1 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠(shu)成纖維(wei)細胞生(sheng)長因(yin)子23(FGF-23)ELISA試(shi)劑盒 1,5-AG(Human 1,5-anhydroglucitol)  人1,5-脫水(shui)葡(pu)萄(tao)糖醇(chun)/1,5-脫水(shui)山梨(li) 96T

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請及時和我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀細胞說(shuo)明書(shu)，了解(jie)細胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如細胞形態、所(suo)用培(pei)養基、血清比(bi)例、所(suo)需 細胞因(yin)子等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養條件(jian)壹(yi)致，若由於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而(er)導(dao)致細胞出(chu)現問題，責任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問題，部(bu)分(fen)細胞由(you)於溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片，是(shi)正常現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮細胞直接混勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基重懸(xuan) 細胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行培養。

5. 請客戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍幾張(zhang)細胞照(zhao)片，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個別(bie)敏感細胞會(hui)出現不(bu)穩定的(de)情(qing)況，請及時和我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具體(ti)情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至問題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅(jin)供科(ke)研使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液培養基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞培(pei) 養條件(jian)新配制的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳代建議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。