MC38小鼠(shu)結(jie)腸癌(ai)細胞

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究使用、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打細胞使之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分瓶傳代(dai)，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹(chui)打細胞使之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並(bing)放(fang)置於(yu)凍存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存(cun)管(guan)放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入液氮(dan)中進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存。使用程序

降(jiang)溫盒(he)可直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細胞培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理僅供(gong)參考(kao)，具體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密度(du)達 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中，使消(xiao)化液浸(jin)潤所有(you)細胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞情況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細胞消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細胞大部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞凍存(cun)液，使細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註意(yi)凍存(cun)管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入液氮(dan)灌儲存。記錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置以便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品：

MTA1： 轉移相(xiang)關蛋白(bai)1抗(kang)體 人結(jie)直(zhi)腸腺癌(ai)細胞;COLO 320DM [COLO320DM]

IL11 Protein Human 重組人 IL11 / Ierleukin 11 / IL-11 蛋白(bai) 大鼠(shu)糖(tang)原(yuan)0酸(suan)化酶M(PYGM)ELISA試(shi)劑盒(he) Apo-E  大鼠(shu)載(zai)脂蛋白(bai)E 96T

MUC4： 粘(zhan)蛋白(bai)4抗(kang)體 TLK2 Others Human 人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772 ) 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照)

小鼠(shu)肝(gan)動脈(mai)內皮(pi)細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)糖(tang)原(yuan)0酸(suan)化酶L(PYGL)ELISA試(shi)劑盒(he) MCP-2/CCL8(Human monocyte chemotactic protein 2)  人單(dan)核(he)細胞趨(qu)化蛋白(bai)2 96T

Melamine： 三(san)聚(ju)胺(an)抗(kang)體 CBRH-7919細胞，肝癌(ai)細胞 人未(wei)分(fen)化胃癌(ai)細胞,HGC-27細胞 牛陀(tuo)螺(luo)狀細胞;BT

IQCG： IQCG蛋白(bai)抗(kang)體 EGFL6 Others Human 人 EGFL6 / EGF-L6 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照)

人肝(gan)動脈(mai)內皮(pi)細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人白(bai)細胞分化抗(kang)原(yuan)30(CD30)ELISA 試(shi)劑盒(he) NAP1 (nucleosome assembly protein 1) 核(he)小體組裝(zhuang)蛋白(bai)1(多肽(tai)) 0.5mg

IQCK： IQCK蛋白(bai)抗(kang)體 非洲綠(lv)猴腎(shen)細胞系(xi)/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- 畸(ji)胎(tai)瘤細胞，F9細胞 BEL-7404(肝癌(ai)細胞)

AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 人白(bai)細胞分化抗(kang)原(yuan)14(CDl4)ELISA 試(shi)劑盒(he) N-cadherin N-鈣粘(zhan)附(fu)分(fen)子抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Id1： DNA結(jie)合(he)抑制因(yin)子1抗(kang)體 CM-H095人骨骼肌細胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

MC38小鼠(shu)結(jie)腸癌(ai)細胞人類(lei)成纖維細胞系(xi);CNLMG-B5538SKIN 人肝(gan)星(xing)形(xing)細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)成(cheng)纖維細胞生(sheng)長(chang)因(yin)子19(FGF19)ELISA試(shi)劑盒(he) N-MID-OT(Human N-MID Osteocalcin)  人N端(duan)中段骨鈣素 96T

RAC2： G蛋白(bai)P21 RAC2抗(kang)體 肺(fei)泡(pao)上(shang)皮(pi)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 ×105次(ci)方(fang)(1ml)

mRTEC, 小鼠(shu)腎(shen)小管(guan)上(shang)皮(pi)細胞 大鼠(shu)成(cheng)纖維細胞生(sheng)長(chang)因(yin)子18(FGF18)ELISA試(shi)劑盒(he) LRP-6(Human low-density lipoprotein-receptor-related protein)  人低(di)密度(du)脂蛋白(bai)受體相(xiang)關蛋白(bai)6 96T

RAC1+RAC2： GTP結(jie)合(he)蛋白(bai)RAC1+RAC2抗(kang)體 AMY2A Others Cynomolgus 食(shi)蟹(xie)猴 AMY2A / Alpha-amylase 人細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照)

NCI-H460 人肺(fei)癌(ai)細胞 大鼠(shu)成(cheng)纖維細胞生(sheng)長(chang)因(yin)子15(FGF15)ELISA試(shi)劑盒(he) VLDLR(Human very low density lipoprotein receptor)  人極(ji)低(di)密(mi)度(du)脂蛋白(bai)受體 96T

三(san)、培(pei)養(yang)註意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首先(xian)觀察(cha)細胞瓶是否(fou)完好(hao)，培(pei)養(yang)液是否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞說明(ming)書，了解細胞相關信息，如細胞形(xing)態(tai)、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條件壹致，若由(you)於培(pei)養(yang)條件不壹(yi)致而(er)導(dao)致細胞出現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客戶自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶表面，顯微(wei)鏡下觀察(cha)細胞狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞由(you)於溫度(du) 變化及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到(dao)細胞後前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便(bian)於(yu)和我(wo)司技(ji)術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於運(yun)輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感(gan)細胞會出(chu)現(xian)不(bu)穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和(he)我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細胞僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請換(huan)用按(an)照說(shuo)明(ming)書細胞培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收到(dao)細胞後第(di)壹(yi)次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。