MFC小鼠(shu)前(qian)胃癌細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅(jin)供科(ke)研研(yan)究使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消化(hua)，再輕輕吹打細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

壹、商品介(jie)紹：

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加入(ru)培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消化(hua)，輕輕吹打細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管(guan)中(zhong)；

4）先將細(xi)胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中進行長期保存(cun)。使(shi)用程序(xu)

降溫盒(he)可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作步驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說明書(shu)為(wei)主。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解凍，加4 mL培養(yang)基(ji)混合(he)均勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹勻。然後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含適量(liang)培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密度達 80%-90%，即可進(jin)行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而定(ding)），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿回操(cao)作臺(tai)，輕敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消化(hua)。輕輕打勻後裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶(ping)中，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良好(hao)時(shi)，可進(jin)行細(xi)胞(bao)凍存。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意凍存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存。記錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置以(yi)便下(xia)次拿取。

公(gong)司正在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品：

P815小鼠(shu)肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) P815 mouse mastocytoma cell DMEM培養(yang)基(ji)+10%FBS 大鼠(shu)酸激(ji)酶(mei)M2型同工酶(M2-PK)ELISA試(shi)劑盒 HABP  大(da)鼠(shu)透明質(zhi)酸結合(he)蛋白(bai) 96T

NRAS： 原癌(ai)基(ji)因N-Ras抗(kang)體(ti) PDPN Others Mouse 小鼠(shu) Podoplanin 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

CL-0055Caov-3(人乳(ru)突(tu)狀(zhuang)卵(luan)巢腺癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠(shu)酸激(ji)酶(mei)M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試(shi)劑盒 IGF-1(Human insulin-like growth factors 1)  人(ren)1 96T

NF-ATc4： T細(xi)胞(bao)激(ji)活(huo)核轉錄因子(zi)4抗(kang)體 大(da)鼠(shu)肝(gan)細(xi)胞(bao)瘤;H-4-II-E

SF767(人腦(nao)瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 SHG44(膠質(zhi)瘤細(xi)胞(bao)) 大鼠(shu)酸激(ji)酶(mei)(PK)ELISA試(shi)劑盒 IFN- Gamma(Human Interferon Gamma)  人(ren)γ幹(gan)擾(rao)素(su) 96T

P3-X63-Ag8.653細(xi)胞(bao)，小鼠(shu)骨髓(sui)瘤細(xi)胞(bao) Ana-1(巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)) 人正(zheng)常上皮(pi)細(xi)胞(bao);MCF 10A 人γ幹(gan)擾(rao)素(su)(IFN-γ)ELISA 試(shi)劑盒 FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 纖(xian)維(wei)束(shu)蛋白(bai)同源物(wu)1/肌動蛋白(bai)集束(shu)蛋白(bai)/圓(yuan)線(xian)蟲(chong)紫癜 抗原(yuan) 0.5mg

phospho-IKK gamma (Ser376)： 0酸化(hua)KB抑(yi)制(zhi)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)γ抗體 GP140 Others HIV 人類免(mian)疫缺陷(xian)病(bing)毒(du)Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

EB病毒(du)轉化(hua)的(de)人(ren)B淋巴(ba)細(xi)胞(bao);KMY0908 人β-珠(zhu)蛋白(bai)(β-globin)ELISA試(shi)劑盒 Pepsinogen C peptide原(yuan)C蛋白(bai)抗原(yuan) 0.5mg

phospho-IKK beta(Ser466)： 0酸化(hua)KB抑(yi)制(zhi)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)β抗體 人急性(xing)早幼(you)粒白血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao);HL-60

RSC96(大鼠(shu)雪旺細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 人(ren) SLC27A4 / FATP4 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 人(ren)β血(xue)小板(ban)球(qiu)蛋白(bai)/β血(xue)栓環(huan)蛋白(bai)(β-TG)ELISA 試(shi)劑盒 PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)體(ti)增(zeng)殖物(wu)激(ji)活(huo)受體γ輔(fu)激(ji)活(huo)子1α抗原 0.2mg

MFC小鼠(shu)前(qian)胃癌細(xi)胞(bao)RIP3： 受體(ti)結合(he)絲(si)酸(suan)蘇酸(suan)激(ji)酶(mei)3抗體 IL1R2 Others Canine 狗 IL1R2 / IL1RB 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

293 人胚腎細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)別(bie)孕烯(xi)醇(chun)酮/3α,5α-四(si)氫(AP/3α,5α-THP)ELISA試(shi)劑盒 WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase)  人(ren)色(se)酰(xian)tRNA合(he)成(cheng)酶 96T

RIP5： 受體(ti)結合(he)絲(si)酸(suan)蘇酸(suan)激(ji)酶(mei)5抗體 SK-HEL-1細(xi)胞(bao)，皮膚(fu)黑色(se)素(su)瘤細(xi)胞(bao) 人子(zi)宮鱗(lin)癌(ai)細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua)),HCC 94細(xi)胞(bao) 人支氣管(guan)上(shang)皮細(xi)胞(bao)總RNAHBEpiC NA

IL6ST Others Rat 大鼠(shu) gp130 / IL6ST / CD130 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 大(da)鼠(shu)別(bie)孕烯(xi)醇(chun)酮(AP)ELISA試(shi)劑盒 HK3(Human hexokinase 3)  人(ren)己(ji)糖(tang)激(ji)酶(mei)3 96T

RBM15： RNA結合(he)蛋白(bai)15抗體(ti) KM小鼠(shu)子瘤株;U27

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若有(you)上(shang)述現(xian)象 發(fa)生請(qing)及時(shi)和我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說明(ming)書(shu)，了(le)解細(xi)胞(bao)相關信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條件(jian)壹(yi)致，若由(you)於(yu)培養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出現(xian)問題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫度 變化(hua)及劇烈(lie)碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現(xian)象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混勻收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相同條件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我司技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因，個別(bie)敏感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不穩定的(de)情況，請(qing)及時(shi)和我們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以(yi)便我們(men)的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回訪直(zhi)至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養(yang)條件(jian)新(xin)配(pei)制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第壹次(ci)傳代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。