MH-S小鼠肺泡巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不(bu)得用於臨床診斷！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落(luo)，然(ran)後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱(xiang)中培養；

壹(yi)、商品介紹(shao)：

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓(yuan)後加入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落(luo)，然(ran)後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放置於凍(dong)存管中；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存管放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可直接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養操作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存處理(li)僅供(gong)參考，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨貨產品說明書為主。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存管在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基(ji)混(hun)合(he)均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將所(suo)有(you)細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中培養過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培養基(ji)，培養過夜(ye)）。第二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中，使消化液(ye)浸(jin)潤(run)所有細胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置於37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速拿回(hui)操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕輕(qing)打勻(yun)後裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的含(han)8 mL培養基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶(ping)中，置於培養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞培養液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計(ji)數。

b、根據細(xi)胞數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存液(ye)，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做好(hao)標識(shi)。將凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記錄(lu)凍(dong)存管位(wei)置以(yi)便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司正在出售(shou)的(de)產(chan)品：

SK-N-BE(2) (人神(shen)經(jing)母(mu)細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 U937(組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)) 大鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白4(AQP-4)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 HSP-27  大鼠熱(re)休(xiu)克蛋(dan)白27 96T

NKCC1： 離(li)子(zi)轉(zhuan)運蛋(dan)白1抗(kang)體 人胚腎細(xi)胞(bao)-F克隆;293F

IL22 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 IL22 / IL-22 / Ierleukin 22 蛋(dan)白 大鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白3(AQP-3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 OT(Mouse oxytocin)  小鼠催(cui)產(chan)素(su) 96T

hydrogen exchanger 3： 離(li)子(zi)/氫離(li)子(zi)交換蛋(dan)白3抗(kang)體 RET Others Human 人 RET Kinase (aa 658-1114) 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

小鼠卵(luan)巢顆(ke)粒細胞(bao)培養基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)水通(tong)道蛋(dan)白3(AQP-3)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 NAP-2/CXCL7(Human neutrophil activating protein-2)  人中性(xing)粒細胞趨化蛋(dan)白2 96T

Inversin： 內(nei)臟器官(guan)發(fa)育轉(zhuan)位(wei)相關蛋(dan)白NPH2抗(kang)體 胰腺(xian)星(xing)狀(zhuang)細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105次(ci)方(1ml)

CXCL1 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋(dan)白 (His & NusA 標簽) 人β澱粉(fen)樣(yang)蛋(dan)白1-40(Aβ1-40)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CD63/MLA1 溶(rong)酶(mei)體膜糖(tang)蛋(dan)白抗(kang)原 0.5mg

Insulin receptor subunit beta： 胰島(dao)素(su)受(shou)體β抗(kang)體 NCF2 Others Human 人 NCF2 / NCF-2 / P67phox 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

人支(zhi)持(chi)細胞(bao)培養基(ji) 100mL 人β-促脂(zhi)素(su)(β-LPH)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 PTEN/MMAC1(CT)human, mo, rat, pig, dog, bovine, horse, chicken 壹種抑制(zhi)基(ji)因(yin)抗(kang)原(C端(duan)) 0.5mg

ITLN1： 內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)凝(ning)集(ji)素(su)HL1抗(kang)體 恒(heng)河(he)猴(hou)腎細(xi)胞(bao);RM-3 人卵巢透(tou)明細胞癌細(xi)胞(bao)，ES-2細(xi)胞 ZR-75-30(癌細(xi)胞(bao))

MH-S小鼠肺泡巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)RSBN1L： 細(xi)胞(bao)堿白1樣(yang)蛋(dan)白抗(kang)體 小鼠子(zi)細(xi)胞(bao);U14

CL-0255A875(人黑色(se)素(su)瘤(liu)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠半(ban)乳糖(tang)凝(ning)集(ji)素(su)7(GAL7)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3)  人促分裂(lie)素(su)原活化(hua)蛋(dan)白激酶(mei)激活的蛋(dan)白激酶(mei)3 96T

RNF： E3泛(fan)素(su)蛋(dan)白連接酶(mei)A抗(kang)體 AHSG Others Human 人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

人膀胱基(ji)質(zhi)成纖維(wei)細(xi)胞(bao)cDNAHBdSF cDNA 大(da)鼠(shu)半乳糖(tang)凝(ning)集(ji)素(su)3(Galectin3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme)  人血(xue)管(guan)緊張素(su)Ⅰ轉(zhuan)化(hua)酶(mei) 96T

RFX4： 轉(zhuan)錄(lu)調控(kong)因(yin)子(zi)RFX4抗(kang)體 非(fei)洲綠猴(hou)腎細(xi)胞(bao)系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後首先觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是否(fou)完好(hao)，培養液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等現象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請(qing)及時和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細(xi)胞說(shuo)明書，了解(jie)細(xi)胞相關信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形態(tai)、所用培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因子(zi)等，確保(bao)細(xi)胞培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出現問(wen)題，責任由 客戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於溫度(du) 變(bian)化及劇烈(lie)碰亡破(po)碎形成碎(sui)片(pian)，是正常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消化，懸浮(fu)細胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的(de)培養基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新的培養瓶(ping)或(huo)培養皿中，置於培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養基(ji)用於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到(dao)細胞後前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術部溝通(tong) 交流。由於運輸(shu)的(de)原因，個別敏感細胞會出(chu)現不(bu)穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及時和我(wo)們聯系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的技術人員跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的培養基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來培養細(xi)胞，請換用按照(zhao)說(shuo)明書細胞培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收到(dao)細胞後第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。