MPC-5小(xiao)鼠腎足(zu)細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研研(yan)究使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕吹打細胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期保存。使用程序(xu)

降溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體操作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速搖晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天換液並檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代：如果細(xi)胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而(er)定），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若細胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕打勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生長狀態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位置以(yi)便下次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品(pin)：

EFNA5 Others Rat 大(da)鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠瘦素(su)受體(ti)(LEPR)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) aFGF-1(Human acidic fibroblast growth factor 1)  人酸(suan)性(xing)成纖(xian)維細(xi)胞(bao)生長因(yin)子1 96T

NIRF： 環(huan)指蛋(dan)白(bai)107抗體(ti) 平(ping)滑肌細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)SMCM-sf-prf

TM3小(xiao)鼠間質(zhi)細胞(bao) TM3 mouse Leydig cells D-MEM/F-12培(pei)養(yang)基(ji)(GIBCO)+5%馬(ma)血(xue)清(qing)+2.5%FBS 大鼠瘦素(su)(Leptin)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) visfatin  大(da)鼠內脂(zhi)素(su)/內臟(zang)脂肪(fang)素(su) 96T

Netrin G1 ligand： 軸(zhou)突生長誘向(xiang)因(yin)子G1配體抗體 FCGR4 Others Mouse 小(xiao)鼠 CD16-2 / FCGR4 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

CL-00074T1(小(xiao)鼠癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠瘦素(su)(LEP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) CD3(Rat Troponin T)  小(xiao)鼠CD3分子 96T

CD16： FC段(duan)γ受(shou)體3/免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)G Fc段(duan)受(shou)體III抗體(ti) 非洲(zhou)綠猴(hou)腎細(xi)胞(bao)系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2

B16F1細(xi)胞(bao)，小(xiao)鼠黑(hei)色(se)素(su)瘤細胞(bao) MRC-5(胚肺(fei)細(xi)胞(bao)) Asp2人胚(pei)胎(tai)腎(shen)細胞(bao)轉(zhuan)化(hua)細(xi)胞(bao);FC33 人α-突(tu)觸核(he)蛋(dan)白(bai)(a-Synuclein)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核(he)受體(ti)RXRα抗(kang)原(yuan) 0.5mg

phospho-IRAK4 (Thr345)： 0酸(suan)化(hua)白(bai)介(jie)素(su)-1受體(ti)相關激(ji)酶(mei)4抗體(ti) VNN1 Others Human 人 VNN1 / Vanin-1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

穩定(ding)表達(da)EBNA1的人胚(pei)腎細(xi)胞(bao);293E 人α乳(ru)清(qing)蛋(dan)白(bai)(α-La)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶(mei)抗原(yuan) 0.5mg

IQCF1： IQCF1蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 人小(xiao)細(xi)胞(bao)肺(fei)癌(ai)細(xi)胞(bao);NCI-H209

MPC-5小(xiao)鼠腎足(zu)細(xi)胞(bao)RNF128： 環(huan)指蛋(dan)白(bai)128抗體(ti) PC-12(高(gao)分化(hua))，PC12，大(da)鼠腎上(shang)腺(xian)髓質(zhi)嗜鉻(ge)瘤分化(hua)細(xi)胞(bao)株(高(gao)分化(hua))

MN-s, 小(xiao)鼠紋(wen)狀體(ti)神經元 大(da)鼠白(bai)血病(bing)抑(yi)制因(yin)子(LIF)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5)  人周期素(su)依賴(lai)性(xing)激(ji)酶(mei)5 96T

Rab27a： RAM-11抗(kang)體 CX3CL1 Others Canine 狗(gou) Fractalkine / CX3CL1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

3T6 Swiss albion小(xiao)鼠胚胎(tai)成(cheng)纖維細(xi)胞(bao) 大鼠白(bai)細胞(bao)抗原(yuan)DR(HLA-DR)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) KLK 10(Human Kallikrein 10)  人10 96T

Rbms3： 抑(yi)癌(ai)基(ji)因(yin)Rbms3抗體 U-937細(xi)胞(bao)，淋(lin)巴(ba)瘤細胞(bao) 人前(qian)列(lie)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao),DU-145細胞(bao) 人間充(chong)質(zhi)幹(gan)細胞(bao)-骨髓總(zong)RNAHMSC-bm NA

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請及時和(he)我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞(bao)說明書(shu)，了(le)解細胞(bao)相關信(xin)息(xi)，如細胞(bao)形態、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因(yin)子等，確(que)保細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運輸問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰亡(wang)破碎形(xing)成碎片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶用相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各拍幾張細胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和(he)我(wo)司(si)技術部(bu)溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感細胞(bao)會出(chu)現不(bu)穩定(ding)的(de)情(qing)況，請及時和(he)我(wo)們(men)聯系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體情(qing)況，以(yi)便我(wo)們(men)的(de)技術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運輸用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請換用按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配(pei)制的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次(ci)傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。