ID8小(xiao)鼠(shu)卵(luan)巢(chao)上皮(pi)癌細(xi)胞

公司產品僅(jin)供科研(yan)研究使用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終止消化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例(li)進行分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

壹、商(shang)品(pin)介紹：

2、細(xi)胞凍存：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終

止消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並放(fang)置(zhi)於凍存管(guan)中(zhong)；

4）先將細(xi)胞凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行長(chang)期(qi)保存(cun)。使用(yong)程序(xu)

降溫(wen)盒(he)可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培養(yang)凍存處(chu)理(li)僅(jin)供參考(kao)，具體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨(huo)產品說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件下離心(xin)3 min，棄去上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適量培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二天換液(ye)並檢查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度達 80%-90%，即可進行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液(ye)浸潤(run)所有(you)細(xi)胞，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後在(zai)顯微鏡下觀察(cha)細(xi)胞消化情(qing)況，若細(xi)胞大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速(su)拿回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上(shang)清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待(dai)細(xi)胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞凍存。下面 T25 瓶為例(li)；a、收集細(xi)胞及細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下離心(xin)4 min，棄去上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清細(xi)胞凍存液(ye)，使細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存管(guan)做(zuo)好標識。將凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄凍存管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿(na)取。

公司正在(zai)出售的(de)產品：

Mkl1： myocardin相(xiang)關轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)抗體(ti) 雜(za)交瘤(liu)(B類(lei));Z1510A2G6A2F8

NCI-H2452(人(ren)間皮瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 SW620(結(jie)腸癌細(xi)胞) 大(da)鼠(shu)細(xi)胞因(yin)子(zi)信號(hao)轉(zhuan)導(dao)抑(yi)制因(yin)子(zi)1(SOCS-1)ELISA試劑盒(he) dsDNA  大鼠(shu)抗(kang)雙鏈(lian)DNA抗(kang)體 大鼠(shu)雪(xue)旺(wang)細(xi)胞;RSC96

IL1B Protein Canine 重(zhong)組(zu)狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白(bai) 大(da)鼠(shu)細(xi)胞因(yin)子(zi)信號(hao)轉(zhuan)導(dao)抑(yi)制因(yin)子(zi)1(SOCS1)ELISA試劑盒(he) TFPIHuman Tissue factor pathway inhibitor  人(ren)組(zu)織因(yin)子(zi)途徑抑(yi)制物 96T

MAP3K8： 原(yuan)活化蛋白(bai)激(ji)酶(mei)激(ji)酶(mei)8抗(kang)體(ti) TH Others Human 人(ren) TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

小(xiao)鼠(shu)支(zhi)氣(qi)管(guan)上(shang)皮細(xi)胞培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)細(xi)胞外(wai)信(xin)號(hao)調(tiao)節激酶(mei)2(ERK2)ELISA試劑盒(he) sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor)  小鼠(shu)可(ke)溶(rong)性血管(guan)內皮(pi)細(xi)胞蛋白(bai)C受(shou)體(ti) 96T

HP1 alpha： 異染(ran)色(se)質蛋白(bai)1-α(HP1α)抗(kang)體(ti) TNFRSF10B Others Mouse 小鼠(shu) AILR2 / TNFRSF10B 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

大(da)鼠(shu)胰(yi)腺(xian)外(wai)分(fen)泌(mi)腺(xian)細(xi)胞;AR42J 人(ren)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)B(PKB)ELISA 試劑盒(he) HGF(hepatocyte growth factor) 肝細(xi)胞生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)抗原(yuan) 0.5mg

Histone H4： 組(zu)蛋白(bai)H4抗(kang)體(ti) EB病毒轉(zhuan)化的(de)人(ren)B淋巴細(xi)胞;KMY0910

Molt-4(人(ren)急(ji)性淋巴母(mu)細(xi)胞白(bai)血病細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 小(xiao)鼠(shu) IFNA5 / IFNaG 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 人(ren)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)A(PKA)ELISA 試劑盒(he) HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人(ren)類(lei)皰疹(zhen)病毒8抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Acetyl-Histone H4(K12)： 乙酰(xian)化組(zu)蛋白(bai)H4抗(kang)體(ti) 間充質幹(gan)細(xi)胞軟(ruan)骨(gu)細(xi)胞分(fen)化培養(yang)基(ji)MCDM

ID8小(xiao)鼠(shu)卵(luan)巢(chao)上皮(pi)癌細(xi)胞PCDHB5： 原(yuan)鈣(gai)粘蛋白(bai)β5抗(kang)體(ti) IL1RL1 Others Human 人(ren) IL1RL1 / DER4 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

人(ren)胚肺二倍(bei)體(ti)細(xi)胞;KMB-17 大(da)鼠(shu)澱(dian)粉(fen)樣蛋白(bai)β前(qian)體(ti)蛋白(bai)結(jie)合(he)蛋白(bai)B3(APBB3)ELISA試劑盒(he) ACV-A  大鼠(shu)活化素(su)A 96T

PDCD7： 雕(diao)亡相關(guan)蛋白(bai)7抗(kang)體(ti) 猴源細(xi)胞

人(ren)正常細(xi)胞;Hs 578Bst 人(ren)前(qian)列腺(xian)上皮(pi)細(xi)胞培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)澱(dian)粉(fen)樣蛋白(bai)β前(qian)體(ti)蛋白(bai)結(jie)合(he)蛋白(bai)2(APPBP2)ELISA試劑盒(he) 8-iso-PG(Human 8-iso prostaglandin)  人(ren)8異前(qian)列腺(xian)素 96T

PEF1： 調(tiao)亡(wang)誘導(dao)因(yin)子(zi)家族(zu)蛋白(bai)PEF1抗(kang)體(ti) 外(wai)周(zhou)血白(bai)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

三(san)、培養(yang)註意(yi)事項 

1. 收到(dao)細(xi)胞後(hou)首(shou)先觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若有上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞相(xiang)關(guan)信息，如細(xi)胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培養(yang)基(ji)、血清比例(li)、所需(xu) 細(xi)胞因(yin)子(zi)等，確(que)保細(xi)胞培養(yang)條件壹致，若由於(yu)培養(yang)條件不壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞出現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡下觀察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分(fen)細(xi)胞由(you)於(yu)溫度 變化及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形(xing)成(cheng)碎片，是(shi)正常現(xian)象。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可(ke)以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行培養(yang)。

5. 請(qing)客戶用(yong)相(xiang)同條件的(de)培養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞會出現(xian)不穩(wen)定的(de)情(qing)況，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系，告知細(xi)胞 的(de)具體情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基(ji) (灌液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來培養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞培 養(yang)條件新(xin)配(pei)制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。