J774A.1小鼠單核(he)巨(ju)噬(shi)細胞(bao)

公(gong)司產品僅供(gong)科研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商品介(jie)紹：

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕吹(chui)打細(xi)胞使之脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存管中(zhong)；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產品說(shuo)明書(shu)為(wei)主(zhu)。將含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後將所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二(er)天換液並檢查(zha)細(xi)胞密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果細(xi)胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳代培養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消化液浸(jin)潤所(suo)有細胞，將培養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而(er)定(ding)），然後在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速拿(na)回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲幾下培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕打勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上(shang)清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細胞計數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存液，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管位置以(yi)便下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司正(zheng)在出售的(de)產品：

PKC delta： 蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)C亞(ya)性D型抗(kang)體(ti) SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)

小鼠肺大(da)動(dong)脈(mai)平滑(hua)肌細胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(CYCS)ELISA試劑(ji)盒 Mouse Slit2  小鼠Slit2 96T

Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375)： 0酸化μ-型(xing)受體(ti)抗(kang)體(ti) 95-D細胞(bao)，高(gao)轉(zhuan)移(yi)肺癌細(xi)胞 人喉(hou)癌細(xi)胞,M2e細胞 正常(chang)大(da)鼠腎細胞;NRK

MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照) 大(da)鼠細胞(bao)絨毛(mao)蛋(dan)白(bai)(CVL)ELISA試(shi)劑(ji)盒 EGF(Human Epidermal growth factor)  人表皮生(sheng)長因子 96T

Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222)： 0酸化原(yuan)活(huo)化蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)激(ji)酶(mei)1/2抗(kang)體(ti) 心(xin)臟微(wei)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)cDNAHCMEC cDNA

MSTO-211H(人肺癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感(gan) H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血(xue)凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照) 人單核細胞趨(qu)化(hua)蛋(dan)白(bai)3(MCP-3/CCL7)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血(xue)紅素氧(yang)合(he)酶(mei)-1/熱(re)休克蛋(dan)白(bai)-32抗(kang)原(yuan) 0.5mg

hnRNP L： 異質核(he)糖核蛋(dan)白(bai)L抗(kang)體(ti) 滋養(yang)層細(xi)胞培養(yang)基(ji)TM

CXCL13 Protein Canine 重組狗(gou) CXCL13 / BCA-1 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 人單核細胞趨(qu)化(hua)蛋(dan)白(bai)2(MCP-2/CCL8)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 HO-2(Heme oxygenase 2) 血(xue)紅素氧(yang)合(he)酶(mei)-2抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HER2 receptor(1A4)： HER2受體(ti)單克隆(long)抗(kang)體(ti) COLEC11 Others Mouse 小鼠 CL-K1 / COLEC11 桿狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)

人前列腺(xian)平滑(hua)肌細胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 人單核細胞趨(qu)化(hua)蛋(dan)白(bai)1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly) 異染(ran)色(se)質蛋(dan)白(bai)1(0酸(suan)化(hua)多肽(tai)) 0.5mg

J774A.1小鼠單核(he)巨(ju)噬(shi)細胞(bao)PAI1： 內皮細胞(bao)纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)激(ji)活(huo)抑制(zhi)蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti) DPP4 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴(hou) DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照)

NCI-H358 人非小細胞肺癌細(xi)胞 大(da)鼠低密度脂蛋(dan)白(bai)(LDL)ELISA試(shi)劑(ji)盒 INH-A(Human Inhibin)  人抑制素A 96T

PAGE1： 前列腺(xian)相關(guan)P抗(kang)原(yuan)家族成(cheng)員1抗(kang)體(ti) 3T3 swiss細胞(bao)，swiss鼠胚胎成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao) 人癌細(xi)胞,MB-271細胞 LDH細胞(bao)毒性檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒LDH

FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照) 大(da)鼠的牛(niu)血(xue)清白(bai)蛋(dan)白(bai)殘(can)留(liu)檢測(ce)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 SHBG(Human sex hormone-binding globulin)  人性激(ji)素結合(he)球(qiu)蛋(dan)白(bai) 96T

Phosphotyrosine： 0酸化酪(lao)酸(suan)抗(kang)體(ti) 婆羅(luo)門牛(niu)皮膚(fu)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞(bao);BOS-4

三(san)、培養(yang)註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好，培(pei)養(yang)液是否(fou)有漏液、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象 發生(sheng)請及時(shi)和我們(men)聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞說(shuo)明書(shu)，了(le)解細(xi)胞(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確(que)保(bao)細胞培(pei)養(yang)條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常現(xian)象。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞狀態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天各(ge)拍幾張細(xi)胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和我司技(ji)術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流。由於運(yun)輸(shu)的原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細(xi)胞會(hui)出現(xian)不穩(wen)定的情(qing)況，請及時(shi)和我們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我們(men)的技(ji)術(shu)人員跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解決。

7. 該細胞僅供(gong)科研使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養(yang)細胞(bao)，請換用(yong)按(an)照說(shuo)明書(shu)細胞(bao)培 養(yang)條件(jian)新(xin)配(pei)制的培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第壹(yi)次(ci)傳代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。