JAR人(ren)胎(tai)盤(pan)絨(rong)毛(mao)癌(ai)細胞(bao)

公司產品僅供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消化，再輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然(ran)後按 1:2 比例進行(xing)分瓶傳代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

壹、商品介紹：

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液(ye)終

止(zhi)消化，輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管(guan)中；

4）先(xian)將細(xi)胞凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中進(jin)行(xing)長期保存。使用程(cheng)序

降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下細胞培養凍存處(chu)理僅供參考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴中迅(xun)速搖晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹勻(yun)。然(ran)後將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過夜（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培養基，培養過夜）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代：如(ru)果(guo)細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳代培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中，使消化液(ye)浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然(ran)後在顯微鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)消化情(qing)況，若(ruo)細胞(bao)大部分變圓(yuan)並脫落(luo)，迅(xun)速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下培養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養基終止(zhi)消化。輕輕打勻後裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待細(xi)胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍存。下面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞計(ji)數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍存管(guan)做(zuo)好標(biao)識。將凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍存管(guan)位置(zhi)以(yi)便下次拿取。

公司正(zheng)在出售(shou)的(de)產品：

Myotilin： 肌收縮(suo)蛋(dan)白(bai)MYOT抗(kang)體(ti) 小(xiao)鼠(shu)誘(you)導性多潛(qian)能(neng)幹細胞(bao);PUMC-mips-A5

NCI-H524(人非(fei)小細(xi)胞肺癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 HUVEC(人(ren)臍(qi)靜脈(mai)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞(bao)) 大(da)鼠細胞(bao)間粘(zhan)附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 sE-selectin(Human soluble E-selectin)  人(ren)可(ke)溶性E選擇(ze)素(su) 96T

phospho-MAP4K4(Ser631)： 0酸(suan)化原活化蛋(dan)白(bai)激酶(mei)MAP4K4抗(kang)體(ti) tTA基因修飾(shi)的(de)小(xiao)鼠畸胎(tai)瘤細(xi)胞(B類(lei));P19-CAG-tTA-1F3

IL1B Protein Mouse 重組(zu)小鼠(shu) IL-1 beta / IL1B 蛋(dan)白(bai) 大鼠(shu)細胞間粘(zhan)附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1)  人(ren)可(ke)溶性細胞(bao)間(jian)粘(zhan)附分子1 96T

RNF59： 環指蛋(dan)白(bai)59抗(kang)體(ti) PLK1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) PLK1 / PLK-1 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照)

Calu-6細胞，人(ren)退(tui)行(xing)性癌(ai)細胞(bao) 克(ke)雷伯(bo)肺炎(yan)桿(gan)菌 敘(xu)利亞(ya)倉鼠腎細胞(bao);BHK-21 人大(da)皰(pao)性類天(tian)皰(pao)瘡(chuang)抗(kang)體(ti)(BP)ELISA 試劑盒 HSP47(Heat shock protein-47) 熱(re)休克(ke)蛋(dan)白(bai)-47抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Hepatocyte(2H5)： 人肝細(xi)胞(bao)單克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti) ACVR2A Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) ACVR2A / AcIIa 人細胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照)

雜交瘤(B類(lei));C3110D2E11 人大(da)內(nei)皮(pi)素(Big ET)ELISA 試劑盒 HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 熱(re)休克(ke)蛋(dan)白(bai)90α抗(kang)體(ti) EB病毒轉(zhuan)化的(de)人(ren)B淋巴細胞(bao);KMY0908

NCI-H1299(人非(fei)小細(xi)胞肺癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 甲(jia)型流(liu)感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照) 人(ren)大(da)腸菌素(su)(colicin)ELISA 試劑盒 HSP-105 (heat sock protein-105) 熱(re)休克(ke)蛋(dan)白(bai)HSP105抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Hepcidin-25： 鐵(tie)調(tiao)節(jie)蛋(dan)白(bai)/鐵(tie)調(tiao)素抗(kang)體(ti) 黑(hei)色素細(xi)胞(bao)培養基MelM

JAR人胎(tai)盤(pan)絨(rong)毛(mao)癌(ai)細胞(bao)P2X3： 三0酸(suan)腺苷(gan)受(shou)體(ti)受(shou)體(ti)P2X3抗(kang)體(ti) SV40轉(zhuan)化的(de)非(fei)洲綠猴腎(shen)細(xi)胞;COS-1

人正常(chang)上皮(pi)細胞(bao);MCF 10A 人(ren)胰腺星(xing)狀(zhuang)細(xi)胞培(pei)養基 100mL 大鼠(shu)蛋(dan)白(bai)聚(ju)糖4(PRG4)ELISA試劑盒 MT(Human Melatonin)  人(ren)褪(tui)黑(hei)素 96T

PAPPA： 相(xiang)關(guan)血漿蛋(dan)白(bai)A抗(kang)體(ti) 腎(shen)實(shi)質細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

人臍(qi)帶血單個核細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)抑制(zhi)因子γ(PKIγ)ELISA試劑盒 6-K-PG(Human 6-keto-prostaglandin)  人(ren)6酮(tong)前(qian)列(lie)腺(xian)素(su) 96T

PPT1： 棕櫚酰(xian)蛋(dan)白(bai)硫(liu)酯酶(mei)1抗(kang)體(ti) MSR1 Others Rat 大(da)鼠(shu) MSR1 / SCARA1 人細胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照)

三、培養註意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後首先(xian)觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基、血清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子等，確(que)保(bao)細胞(bao)培養條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而導致細胞出現問題，責任由(you) 客(ke)戶(hu)自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表面，顯微鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題，部分細胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度 變化及劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎形成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正常現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精消毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以消化，懸浮細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養基重懸(xuan) 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同條(tiao)件的(de)培(pei)養基用於(yu)細(xi)胞培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我司技術(shu)部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會出現不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們(men)的(de)技術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至(zhi)問題解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用的(de)培(pei)養基 (灌液(ye)培養基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按照說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養基來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細胞後第壹(yi)次傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。