kyse150人(ren)食(shi)管鱗癌(ai)細(xi)胞(bao)

公司(si)產品(pin)僅供科研研(yan)究使用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再(zai)輕(qing)輕吹(chui)打細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例進行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱中(zhong)培養；

壹(yi)、商品(pin)介紹：

2、細胞(bao)凍存：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變圓後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存管中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存。使用(yong)程序

降溫盒可(ke)直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養凍存處理僅(jin)供參考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨產品(pin)說明(ming)書(shu)為主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅(xun)速(su)搖(yao)晃解凍，加4 mL培(pei)養基混合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含(han)適(shi)量培養基的培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基，培養過夜(ye)）。第二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞密度(du)。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代(dai)培(pei)養。

a、棄去(qu)培養上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離子(zi)的PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤所有細胞，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養箱中(zhong)消化1-2 min（視細胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養基終止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分(fen)到新的含(han)8 mL培(pei)養基的新皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)培養。 3) 細胞凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態良(liang)好時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞凍存。下面 T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行細胞計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數量加入(ru)無(wu)血(xue)清細胞(bao)凍存液(ye)，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支凍存管凍存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存管做好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管位置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售的產品(pin)：

MGLUR3： 代(dai)謝型谷酸受(shou)體-3抗(kang)體 小鼠(shu)肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞;P815

IL1RN Protein Human 重組人(ren) IL-1RA / IL1RN 蛋白(bai) (Fc 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠(shu)網膜(mo)素(su)(omein)ELISA試(shi)劑(ji)盒 M-AChR  大(da)鼠(shu)毒蕈堿(jian)型乙(yi)酰受體 96T

CXCL2： 巨(ju)噬細(xi)胞炎癥蛋白(bai)2( GROβ)抗(kang)體 RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸(xi)道(dao)合胞病(bing)毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

小(xiao)鼠(shu)淋巴成纖維細胞(bao)培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)網膜(mo)素(su)(omein)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9)  小鼠(shu)Toll樣(yang)受(shou)體9 96T

Metallothionein： 金(jin)屬(shu)硫(liu)蛋白(bai)抗(kang)體 KB細胞(bao)，口腔(qiang)表(biao)皮樣(yang)癌(ai)細(xi)胞(bao) 人(ren)食(shi)管癌(ai)細(xi)胞(bao),KYSE510細(xi)胞(bao) 家貓(mao)腎(shen)細胞;CATK1

CXCL10 Protein Human 重組人(ren) CXCL10 / Crg-2 蛋白(bai) 人(ren)補(bu)體蛋白(bai)4(C4)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促(cu)黃體生成(cheng)素(su)受(shou)體抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IQCE： IQCE蛋白(bai)抗(kang)體 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血(xue)凝素(su) (Hemagglutinin / HA) 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

人(ren)腸動脈(mai)內皮細(xi)胞培(pei)養基 100mL 人補(bu)體蛋白(bai)3(C3)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-組酸脫(tuo)羧(suo)酶(mei)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IBDV： 雞(ji)傳(chuan)染性(xing)法氏(shi)囊(nang)病(bing)病(bing)毒抗(kang)體 猴脈(mai)絡(luo)膜-視網膜(mo)(內(nei)皮)細(xi)胞;RF/6A 膠(jiao)質瘤(liu)細(xi)胞，SHG44細(xi)胞(bao) RD(惡(e)性(xing)胚胎橫(heng)紋肌瘤(liu)細(xi)胞)

ORM2 Others Human 人(ren) ORM2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 人補體7(C7)ELISA 試劑(ji)盒 LIF peptide 白血(xue)病(bing)抑制因子(zi)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

kyse150人(ren)食(shi)管(guan)鱗(lin)癌(ai)細(xi)胞(bao)體細胞(bao);HEL 人(ren)小腸平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞培養基 100mL 大(da)鼠(shu)釋(shi)放激素(su)(GH)ELISA試(shi)劑(ji)盒 SEP1(Human selenoprotein 1)  人硒(xi)蛋白(bai)1 96T

phospho-Rb (Ser249)： 0酸化視網膜(mo)母細胞瘤(liu)相關蛋白(bai)1抗(kang)體 卵巢(chao)顆粒細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml)

人(ren)海(hai)馬(ma)神(shen)經(jing)元 大(da)鼠(shu)釋(shi)放激素(su)(GH)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 SAA3(Human serum amyloid A3)  人血(xue)清澱粉(fen)樣(yang)蛋白(bai)A3 96T

Phospho-Rb (Ser608)： 0酸化視網膜(mo)母細胞瘤(liu)相關蛋白(bai)1抗(kang)體 NRP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

PC-3 人(ren)前(qian)列腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)促(cu)酰化蛋白(bai)(ASP)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Gbp4(Human guanylate nucleotide binding protein 4)  人鳥(niao)苷酸結合蛋白(bai)4 96T

三(san)、培(pei)養註意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞後(hou)首(shou)先觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是否完(wan)好，培(pei)養液(ye)是(shi)否有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和我們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞(bao)說明(ming)書(shu)，了解(jie)細胞(bao)相關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用(yong)培養基、血(xue)清比例、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等(deng)，確(que)保(bao)細胞培(pei)養條件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培(pei)養條件(jian)不(bu)壹(yi)致而導致細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責任由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問題(ti)，部分(fen)細胞(bao)由(you)於溫度(du) 變化及劇(ju)烈碰亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好(hao)細胞(bao)狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培養基重懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新的培養瓶(ping)或培(pei)養皿中，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進行培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養基用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建議客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態，便於和我司(si)技術部溝通(tong) 交流。由(you)於運(yun)輸(shu)的原因(yin)，個別敏感(gan)細(xi)胞會(hui)出(chu)現(xian)不穩(wen)定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及時(shi)和我們聯系(xi)，告(gao)知細胞 的具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的(de)技術人員跟蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解(jie)決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用(yong)的培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不能再(zai)用(yong)來培(pei)養細胞，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細胞(bao)培(pei) 養條件(jian)新配(pei)制的培(pei)養基來培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。