CAOV-3人(ren)卵(luan)巢腺(xian)癌(ai)細胞

公(gong)司產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用於(yu)臨床診斷！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中(zhong)進行(xing)長期保(bao)存。使用(yong)程(cheng)序

降溫(wen)盒可(ke)直接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細胞：以(yi)下細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考，具體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨貨產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將含有(you)1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中迅速(su)搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將所有細胞懸(xuan)液(ye)加入含(han)適量培(pei)養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或將細胞懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二天(tian)換液(ye)並檢查(zha)細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所有細胞，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落，迅速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例分(fen)到新的含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿(min)中或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可(ke)進行(xing)細胞凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量加(jia)入無血清(qing)細胞凍(dong)存液(ye)，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮灌儲存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

LI-cadherin： 肝腸鈣粘連蛋(dan)白抗(kang)體(ti) CDH5 Others Mouse 小鼠(shu) CDH5 / CD144 / VE-Cad 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

胰(yi)腺(xian)星狀(zhuang)細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml) 大(da)鼠(shu)再(zai)生(sheng)胰(yi)島(dao)衍生蛋(dan)白3α(REG3α)ELISA試(shi)劑盒 Goat Anti-human IgA/Gold 金(jin)標(biao)記羊抗(kang)人IgA(10nm/15nm) 0.5ml

Layilin： 透明質酸(suan)受體(ti)抗(kang)體(ti) 小鼠(shu)肝癌(ai)細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]

EB (NBL-4) (牛(niu)胚氣(qi)管(guan)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)垂(chui)體(ti)細胞RPC 大(da)鼠(shu)再(zai)生(sheng)基(ji)因(yin)蛋(dan)白IV(REG-4)ELISA試(shi)劑盒 IgA/Gold 金(jin)標(biao)記兔(tu)抗(kang)人IgA(10nm/15nm) 0.5ml

C17orf82： 17號染(ran)色體(ti)開(kai)放(fang)閱(yue)讀(du)框82抗(kang)體(ti) CM-M057小鼠(shu)腎系(xi)膜細胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

SF767細胞，人(ren)腦(nao)瘤細胞 陰溝腸桿(gan)菌 人(ren)主(zhu)動(dong)脈(mai)內皮細胞總(zong)RNAHAEC NA 人抗(kang)平滑肌抗(kang)體(ti)(ASMA)ELISA 試(shi)劑盒 apoA1 (Apolipoprotein/APOA1 protein )human 載(zai)脂蛋(dan)白A1抗(kang)原 0.5mg

HIAT1： 海(hai)馬(ma)豐(feng)富基(ji)因(yin)轉(zhuan)錄(lu)蛋(dan)白1抗(kang)體(ti) HA Others H5N1 甲型流(liu)感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

小(xiao)鼠(shu)腎集合管(guan)細胞(SV40轉(zhuan)化);M-1 人(ren)抗(kang)皮膚抗(kang)體(ti)(ASA)ELISA 試(shi)劑盒 Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝(ning)聚素α/β抗(kang)原 0.5mg

Histone H2A.Z： 組蛋(dan)白H2AZ抗(kang)體(ti) 人羊(yang)膜細胞;WISH

GBC-SD(人(ren)膽(dan)囊(nang)癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0312293ET(人(ren)胚(pei)腎細胞(SV40T和(he)EBNA1基(ji)因(yin)修(xiu)飾細胞))5×106cells/瓶(ping)×2 盤(pan)羊皮膚細胞;ASHS3 人(ren)抗(kang)凝血(xue)素抗(kang)體(ti)(aPT1/aPT2)ELISA 試(shi)劑盒 Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰(yi)島(dao)素受體(ti)-α(抗(kang)原) 0.5mg

CAOV-3人(ren)卵(luan)巢腺(xian)癌(ai)細胞人(ren)胚(pei)肺(fei)成纖維細胞;MRC-5 大(da)鼠(shu)基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)抑(yi)制(zhi)因(yin)子(zi)4(TIMP-4)ELISA 試(shi)劑盒 F-TESTO(Mouse Free Testoterone) 小(xiao)鼠(shu)遊離(li)睪(gao)酮 96T

Plexin A3： 神(shen)經(jing)叢(cong)蛋(dan)白A3抗(kang)體(ti) 狗腎細胞;Super Tube

大(da)鼠(shu)中(zhong)腦(nao)縫(feng)神(shen)經(jing)細胞(腦(nao)脊(ji))(RNr)(1×106) WM35, 人(ren)黑(hei)色素瘤細胞 Human 大(da)鼠(shu)基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)抑(yi)制(zhi)因(yin)子(zi)3(TIMP-3)ELISA試(shi)劑盒 T(Mouse Testoterone) 小(xiao)鼠(shu)睪(gao)酮 96T

phospho-PTPN6(Tyr564)： 0酸(suan)化(hua)蛋(dan)白酪(lao)酸(suan)0酸(suan)酶(mei)1C抗(kang)體(ti) 人淋(lin)巴成(cheng)纖維細胞cDNAHLF cDNA

TNFSF11 Protein Human 重(zhong)組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽) 大鼠(shu)基質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)抑(yi)制(zhi)因(yin)子(zi)3(TIMP-3)ELISA 試(shi)劑盒 PL12/AlaRS(Human anti-PL12-antibody)  人(ren)PL12抗(kang)體(ti) PARP1 Others Human 人 PARP-1 / PARP 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒-昆蟲(chong)細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

三、培(pei)養(yang)註意事項 

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶(ping)是否(fou)完好，培養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了解細胞相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形態、所用培養(yang)基(ji)、血清比(bi)例、所需 細胞因(yin)子(zi)等，確(que)保細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由(you)於(yu)溫(wen)度 變化及劇烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形成碎(sui)片，是正常(chang)現象(xiang)。觀察好細胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的培養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中，置於(yu)培養(yang)箱中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件的培養(yang)基(ji)用於(yu)細胞培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶(hu)收到細胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸的原因(yin)，個別(bie)敏(min)感細胞會出現(xian)不(bu)穩定的情(qing)況，請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系，告(gao)知(zhi)細胞 的具體(ti)情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技(ji)術人(ren)員跟(gen)蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用的培養(yang)基(ji) (灌液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請(qing)換用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的培養(yang)基(ji)來培養(yang)細胞。     收到細胞後第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。