L929小(xiao)鼠(shu)成纖維細胞

公(gong)司產(chan)品僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用、不(bu)得用於臨床診(zhen)斷！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生(sheng)長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮變(bian)圓後加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止消化(hua)，再輕輕吹打細(xi)胞使(shi)之脫落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後按 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹、商(shang)品介紹：

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生(sheng)長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮變(bian)圓後加入(ru)培(pei)養(yang)液終

止消化(hua)，輕輕吹打細(xi)胞使(shi)之脫落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適量的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞，並(bing)放置於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞凍(dong)存(cun)管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮中進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用程(cheng)序

降溫(wen)盒可直接(jie)放入-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供參(can)考，具體(ti)操作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產(chan)品說明(ming)書為主。將含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻。然後將所(suo)有細胞懸(xuan)液加入含適量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液加入10 cm皿中，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中，使(shi)消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而(er)定），然後在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部分變(bian)圓並(bing)脫落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕輕打勻後裝入無菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹勻。

c、將細胞懸(xuan)液按1:2比例(li)分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時(shi)，可進(jin)行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶為例(li)；a、收集(ji)細胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝入無菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離(li)心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液氮灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出售的(de)產(chan)品：

MSH3： 錯配修復蛋白3抗(kang)體 HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 桿狀病毒(du)-昆蟲細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照)

小(xiao)鼠(shu)食(shi)管(guan)平(ping)滑肌細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠褪黑素(su)(MT/MLT)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) BetaOHB  大鼠β羥 96T

MCM7： 染色(se)體(ti)維持缺陷(xian)蛋白7抗(kang)體 Acc-2細(xi)胞，涎(xian)腺(xian)腺(xian)樣(yang)囊(nang)性(xing)癌細胞 人胃腺(xian)癌細胞,MGC-803細(xi)胞 兔(tu)晶體(ti)上(shang)皮細胞永(yong)生(sheng)系(xi);N/N1003A(RLE)

ALPI Others Human 人 Alkaline Phosphatase / ALPI 人細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 大鼠(shu)褪黑素(su)(MT)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) PPAR- Alpha(Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha)  小(xiao)鼠(shu)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶體(ti)增(zeng)殖物(wu)激(ji)活受(shou)體α 96T

MCP-2： 單核(he)細胞趨(qu)化蛋白2抗(kang)體 人食道上(shang)皮細胞裂解(jie)物(wu)HEEpiCL

人直結(jie)腸平滑(hua)肌細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人表面活白(bai)D(SP-D)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓(sui)樣(yang)細(xi)胞白(bai)血(xue)病-1抗(kang)原 0.5mg

IL-22R： 白(bai)介素(su)22受(shou)體抗(kang)體 長尾綠(lv)猴(hou)腎細胞;4647 紅(hong)白血(xue)病細(xi)胞，HEL細(xi)胞 SMC-1(胸(xiong)膜細(xi)胞瘤)

EFNB3 Others Rat 大(da)鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 人表面活白(bai)A(SP-A)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗(kang)原 0.5mg

IL-26/AK155： 白(bai)介素(su)26抗(kang)體 CM-R007大(da)鼠支(zhi)氣管(guan)上(shang)皮細胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

L1210細(xi)胞，小(xiao)鼠(shu)白(bai)血(xue)病細(xi)胞 多(duo)形擬(ni)桿菌 大(da)額牛(niu)腎(shen)細(xi)胞;BFR-K1 人變(MN) ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌細胞增(zeng)強因(yin)子(zi)2抗(kang)原 0.5mg

L929小(xiao)鼠(shu)成纖維細胞phospho-RAD9(Ser387)： 0酸(suan)化細(xi)胞周(zhou)期(qi)檢(jian)查(zha)控(kong)制蛋白質(zhi)抗(kang)體 虹(hong)膜色素(su)上(shang)皮細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(1ml)

mCF, 小(xiao)鼠(shu)心臟成纖維細胞 大(da)鼠促(cu)黃體激(ji)素(su)(LH)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ConA(Human concanavalin A)  人刀A 96T

phospho-RAD9(Tyr28)： 0酸(suan)化細(xi)胞周(zhou)期(qi)檢(jian)查(zha)控(kong)制蛋白質(zhi)抗(kang)體 IFNAR1 Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴(hou) IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照)

SGC-7901 人胃癌細胞 大(da)鼠促(cu)黃體激(ji)素(su)(LH)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin)  人遊離原卟啉 96T

phospho-c-Raf(Ser301)： 0酸(suan)化原癌基因(yin)c-Raf抗(kang)體 Coc2細(xi)胞，卵(luan)巢(chao)癌細胞 人卵巢(chao)癌細胞,OVAC細(xi)胞 人少突(tu)膠(jiao)質(zhi)前(qian)體細(xi)胞(懸(xuan)浮(fu)生(sheng)長)cDNAHOPC-os cDNA

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞後首先(xian)觀(guan)察細(xi)胞瓶是否完好，培(pei)養(yang)液是否有漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若有上述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞說明(ming)書，了解細胞相(xiang)關(guan)信息，如細胞形態(tai)、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所需 細胞因(yin)子(zi)等，確保(bao)細(xi)胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹致(zhi)，若由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞出現問(wen)題(ti)，責任由(you) 客戶自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶表面，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現象。觀(guan)察好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可以消化，懸(xuan)浮(fu)細胞直接(jie)混勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶收到細(xi)胞後前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張細胞照片，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便於和(he)我司技術部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細胞會(hui)出現不(bu)穩定的(de)情況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我們(men)的(de)技術人員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞僅(jin)供科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換用按照說明(ming)書細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞後第(di)壹次(ci)傳代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。