HUT-78人T淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)白血(xue)病(bing)細胞(bao)

公司產品僅(jin)供(gong)科研研究使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養瓶中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後加(jia)入 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例(li)進行分(fen)瓶傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中培養；

壹(yi)、商品介紹(shao)：

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養瓶中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後加(jia)入培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存(cun)管中；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中進行長(chang)期保存(cun)。使(shi)用程序(xu)

降溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離(li)心3 min，棄去上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後將所有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養基(ji)的(de)培(pei)養瓶中培養過(guo)夜（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加入約8 mL培養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜）。第二天換液並檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細胞密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄(qi)去培養上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞，將培(pei)養瓶置(zhi)於37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而定），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻後裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶中，置於培(pei)養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管中，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄去上清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根據細胞數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標(biao)識。將凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位(wei)置(zhi)以(yi)便下次(ci)拿取(qu)。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

IL36B Protein Mouse 重(zhong)組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白 大(da)鼠細胞周期3(Cyclin-D3)ELISA 試劑(ji)盒(he) MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III )  小鼠主要組織相(xiang)容(rong)性(xing)復合體(ti)Ⅲ類(lei) 96T

MLH1： 錯配修復蛋白1抗體(ti) PARP3 Others Human 人 PARP-3 / PARP3 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

小(xiao)鼠氣管平滑(hua)肌(ji)細胞(bao)培養基(ji) 100mL 大(da)鼠細胞周期3(CCND3)ELISA試劑(ji)盒(he) E-Cad(Mouse E-Cadherin)  小鼠E鈣粘(zhan)著蛋白/上(shang)皮(pi)性(xing)鈣黏(nian)附蛋白 96T

Angiotensin II Type 2 Receptor： 血(xue)管緊(jin)張(zhang)素Ⅱ2型受(shou)體(ti)相(xiang)互(hu)作(zuo)用蛋(dan)白抗體(ti) QG-56細(xi)胞(bao)，肺(fei)扁平上(shang)皮(pi)癌細胞 人口(kou)腔(qiang)上皮癌長春新(xin)堿(jian)耐(nai)藥(yao)株(zhu),KB/V細(xi)胞 小鼠誘導性(xing)多潛能(neng)幹(gan)細(xi)胞(bao);PUMC-mips-C2

EFNB1 Others Rat 大(da)鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠細胞周期2(Cyclin-D2)ELISA試劑(ji)盒(he) IL-27(human Interleukin 27)  人白介素27 96T

MGC80-3(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠 FGFR2 / CD332 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 人蛋(dan)白質(zhi)二硫(liu)鍵異(yi)構酶(mei)(PDI)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) HA tag HA tag標(biao)簽(qian)多(duo)肽(tai) 0.5mg

HEBP2： Heme結(jie)合(he)蛋(dan)白2抗體(ti) 星形膠(jiao)質(zhi)細胞(bao)培養基(ji)AM-prf

CCL23 Protein Human 重(zhong)組人 CCL23 / MIP 3 蛋(dan)白 人蛋(dan)白脂(zhi)質(zhi)蛋白抗體(ti)(PLP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) HA tag(map) HA tag標(biao)簽(qian)(分(fen)支(zhi)多肽(tai)) 0.5mg

HEPACAM2： 肝(gan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)2抗體(ti) BCCIP Others Human 人 BRCA2 / BCCIP 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

人呼吸道(dao)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)培養基(ji) 100mL 人蛋(dan)白脂(zhi)蛋(dan)白抗體(ti)(PLP-Ab)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝細(xi)胞(bao)生(sheng)長因子(zi)激(ji)活物(wu)抑制因子(zi)抗原 0.5mg

HUT-78人T淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)白血(xue)病(bing)細胞(bao)PMCA3： ATP酶(mei)鈣離(li)子(zi)轉運(yun)蛋白PMCA3抗體(ti) 小(xiao)梁網(wang)細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

THPO Protein Human 重(zhong)組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠雕(diao)亡誘(you)導因子(zi)(AIF)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) BMPR-1A  大鼠骨成(cheng)型蛋(dan)白受(shou)體(ti)1A 96T

Pumilio 1： PUM1蛋(dan)白抗體(ti) CALCB Others Human 人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

NCI-H1650 人非(fei)小細(xi)胞肺(fei)癌細胞 大鼠雕(diao)亡信(xin)號調節(jie)激(ji)酶(mei)I(ASK-1)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha)  人糖(tang)皮(pi)質(zhi)激素受(shou)體(ti)α 96T

PTBP1： 核(he)糖(tang)結(jie)合(he)蛋(dan)白1抗體(ti) MCF7B細(xi)胞(bao)，人癌細胞 人癌Tamoxifen耐(nai)藥(yao)株(zhu),LCC2細(xi)胞 脂肪細(xi)胞(bao)生(sheng)長添(tian)加(jia)物PAGS

三(san)、培(pei)養註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首(shou)先(xian)觀察細胞(bao)瓶是否完好，培(pei)養液(ye)是否有漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現象，若有上(shang)述(shu)現象 發生(sheng)請及時(shi)和我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞(bao)說明(ming)書(shu)，了解(jie)細(xi)胞相關信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所用培(pei)養基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所需(xu) 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出(chu)現問(wen)題(ti)，責任由 客戶(hu)自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細胞(bao)狀態。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於溫(wen)度 變化及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象。觀察好細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養瓶或(huo)培養皿(min)中，置於培(pei)養箱(xiang)中進行培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同條件的(de)培(pei)養基(ji)用於細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態，便於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原因，個別(bie)敏(min)感細胞(bao)會(hui)出(chu)現不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和我們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科研使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培(pei)養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請換用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞後第(di)壹次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。