HT-22小(xiao)鼠(shu)海馬(ma)神經(jing)元細胞

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅供科(ke)研研(yan)究(jiu)使(shi)用、不得(de)用於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終止消(xiao)化，再輕輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重懸，然後按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

壹(yi)、商品(pin)介紹：

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液終

止消(xiao)化，輕(qing)輕吹打細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並(bing)放(fang)置於(yu)凍(dong)存管中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞凍(dong)存管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期保存。使用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細胞培養凍(dong)存處理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明(ming)書(shu)為主。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混合(he)均勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後吹勻。然後將所(suo)有細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養基的培養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或將細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養基，培養過夜）。第二天換(huan)液並(bing)檢查細(xi)胞(bao)密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去培養上(shang)清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使消化液(ye)浸潤所有細胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然後在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞消化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿回(hui)操作(zuo)臺，輕敲幾下培養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養基終止消(xiao)化。輕(qing)輕打勻後裝(zhuang)入無菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液後吹勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的含(han)8 mL培養基的新(xin)皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細胞凍(dong)存：待細(xi)胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為例；a、收集細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液，裝(zhuang)入無菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細胞數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存液，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入液氮(dan)灌儲(chu)存。記錄凍(dong)存管位(wei)置以便下次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出(chu)售的產(chan)品(pin)：

1-Mar： 膜相關(guan)環(huan)指蛋白1抗體(ti) 小(xiao)鼠(shu)肺(fei)腺(xian)癌低(di)轉移細胞(bao)(綠(lv)色(se)熒(ying)光(guang)蛋白標記);LA1-GFP

NCTC 1469(小(xiao)鼠(shu)正(zheng)常(chang)肝(gan)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 HCT 116(結(jie)腸(chang)癌細胞(bao)) 大(da)鼠(shu)白原α鏈(lian)(Fga)ELISA試劑盒(he) KGF(Human Keratinocyte Growth Factor)  人角化細(xi)胞生(sheng)長(chang)因子 96T

2-Mar： 膜相關(guan)環(huan)指蛋白2抗體(ti) 倉(cang)鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao);Lec1

IL36A Protein Human 重(zhong)組(zu)人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 標簽) 大(da)鼠(shu)白原α(FGα)ELISA試(shi)劑盒 ACE(Mouse Angiotensin converting enzyme)  小(xiao)鼠(shu)血(xue)管緊(jin)張(zhang)素(su)轉化酶(mei) 96T

3-Mar： 膜相關(guan)環(huan)指蛋白3抗體(ti) AARS Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) AARS / alanyl-NA syhetase 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

中(zhong)國倉(cang)鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao)(亞(ya)系克(ke)隆);CHO-HCV-p7 人丁型(xing)肝(gan)炎IgG(HDV IgG)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) GLUT3(Glucose transporter 3) 葡(pu)萄(tao)糖(tang)轉運(yun)蛋(dan)白3抗原(yuan) 0.5mg

HDX： 高(gao)度發(fa)散同源(yuan)異型(xing)盒蛋(dan)白抗體(ti) EB病毒轉化的(de)人B淋(lin)巴細胞(bao);KMYM

MDCK(犬(quan)腎細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小(xiao)鼠(shu) CRELD2 人細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 人丁肝(gan)抗原(yuan)(HDV-Ag)ELISA試(shi)劑(ji)盒 GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒細(xi)胞(bao)-巨噬細胞克(ke)隆刺(ci)激因子(zi)抗(kang)原 0.5mg

Adenovirus hexon protein： 腺(xian)病毒六(liu)鄰(lin)體(ti)蛋白抗體(ti) 間(jian)充質(zhi)幹(gan)細(xi)胞(bao)成(cheng)骨細胞分化培養基MODM-prf

XCL1 Protein Canine 重(zhong)組(zu)狗 XCL1 蛋(dan)白 (His 標簽) 胸(xiong)苷(gan)(AZT)ELISA 試劑(ji)盒 GPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋(dan)白A33(跨膜)抗原(yuan) 0.5mg

HT-22小(xiao)鼠(shu)海馬(ma)神經(jing)元細胞Phospho-PTEN(Ser380)： 0酸(suan)化抑(yi)制基(ji)因(yin)PTEN抗(kang)體 大額(e)牛與(yu)婆羅(luo)門(men)牛雜交(jiao)F1代皮(pi)膚成(cheng)纖維(wei)樣細(xi)胞;BOS-6

人羊膜細胞(bao);HA 人淋(lin)巴血管內(nei)皮(pi)細胞(bao)培養基 100mL 大鼠(shu)多(duo)巴胺轉運(yun)蛋(dan)白(DAT)ELISA 試劑(ji)盒 LATS(Human Long acting thyroid stimulator)  人長(chang)效甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)刺(ci)激素 96T

Phospho-PTEN(Ser380 + Thr382 + Thr383)： 0酸(suan)化抑(yi)制基(ji)因(yin)PTEN抗(kang)體 原代成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao)特制基(ji)礎培養基Many types of cells包裝(zhuang)：500/250/100ml

SERPINF1 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠(shu) SerpinF1 / PEDF 蛋(dan)白 (His 標簽) 大(da)鼠(shu)多(duo)巴胺受體D4(DRD4)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) IL-18  大(da)鼠(shu)白介素18 96T

Paxillin： 樁(zhuang)蛋白Paxillin抗體(ti) BTN3A3 Others Human 人 BTN3A3 人細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到細胞(bao)後首先觀察(cha)細胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培養液是(shi)否有漏液(ye)、渾濁等(deng)現象，若有上(shang)述(shu)現象 發(fa)生(sheng)請及時和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了解(jie)細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細胞形(xing)態、所(suo)用培養基、血清比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培養條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由(you)於(yu)培養條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現象。觀察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可以消(xiao)化，懸浮(fu)細胞(bao)直接(jie)混勻收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養基重懸 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的培養瓶(ping)或培養皿中(zhong)，置於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶用相同條件(jian)的(de)培養基用於(yu)細胞(bao)培養。

6. 建議客(ke)戶收到細胞(bao)後前 3 天(tian)各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流。由(you)於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不穩定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時和(he)我(wo)們聯系，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的技(ji)術人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的培養基 (灌液培養基) 不能(neng)再用來培養細胞，請換(huan)用按照(zhao)說明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養條件(jian)新(xin)配(pei)制的(de)培養基來培養細胞。     收到細胞(bao)後第壹(yi)次(ci)傳代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。