CW-2人結(jie)腸(chang)癌(ai)細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品僅供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不得用(yong)於(yu)臨床診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培養(yang)

液終止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入培養(yang)液終

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存管(guan)中；

4）先將細胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後將其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後轉入液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期(qi)保存(cun)。使(shi)用程(cheng)序

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細胞(bao)培養(yang)操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存處(chu)理(li)僅供(gong)參考，具體(ti)操作步(bu)驟以隨貨(huo)產(chan)品說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍存管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後將所(suo)有(you)細胞(bao)懸液加(jia)入含(han)適量(liang)培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜(ye)）。第(di)二天換(huan)液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將培養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿(na)回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕打勻後裝入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將細胞(bao)懸液按(an)1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置於培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態良好時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細胞(bao)培養(yang)液，裝入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下離心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量加(jia)入無血清細(xi)胞(bao)凍存液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍存管(guan)做好標識(shi)。將凍存管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍存管(guan)位置以便下(xia)次拿(na)取。

公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產(chan)品：

大(da)鼠腎系(xi)膜(mo)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠載脂蛋(dan)白(bai)B-48(ApoB48)ELISA試劑(ji)盒(he) NGB(Rat Neuroglobin,NGB)  大(da)鼠腦紅蛋(dan)白(bai) 96T

LZTS1： 假(jia)定抑(yi)制亮(liang)酸拉(la)鏈(lian)蛋(dan)白(bai)1抗體(ti) U-2 OS, 人骨肉瘤(liu)細(xi)胞(bao) 神經(jing)母細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao),LAN-6細(xi)胞(bao) COS-7(SV40轉(zhuan)化(hua)的(de)非洲綠(lv)猴(hou)腎細胞(bao))

C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 大(da)鼠載脂蛋(dan)白(bai)B48(Apo B48)ELISA試劑(ji)盒(he) PCDH1(Human Interleukin-2 receptor,IL-2R)  人原(yuan)鈣黏(nian)素(su)1 96T

LDHC(Cancer,testis antigen 32)： 乳(ru)酸脫(tuo)氫(qing)酶(mei)LDH-C(/抗原32)抗體(ti) 小(xiao)鼠B細(xi)胞(bao)雜交(jiao)瘤(liu)細(xi)胞(bao);W6/32

L6大(da)鼠成(cheng)肌細胞(bao) L6 rat skeletal myoblasts DMEM培養(yang)基(ji)+10%FBS 大(da)鼠載脂蛋(dan)白(bai)B100(apo-B100)ELISA試劑(ji)盒(he) SCT(Salmon calcitonin)   96T

Romas(人淋(lin)巴瘤(liu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人抗0脂抗體(ti)(Apl/APA)ELISA 試劑(ji)盒(he) Leptin 瘦(shou)素(su)(多肽(tai)抗原) 0.5mg

HOXA11： 同(tong)源盒(he)蛋(dan)白(bai)HOXA11抗體(ti) KLRK1 Others Human 人 NKG2D / CD314 / KLRK1 CHO細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

SK-N-SH人神經(jing)母細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) SK-N-SH human neuroblastoma cells MEM培養(yang)基(ji)(GIBCO)+10%FBS 人抗0壁酸抗體(ti)(TA)ELISA 試劑(ji)盒(he) Leptin receptor(long) 瘦(shou)素(su)受(shou)體(ti)(長(chang))(抗原) 0.5mg

HRH1： 組(zu)胺受(shou)體(ti)H1抗體(ti) 兔(tu)源細胞(bao) 長(chang)鼻(bi)袋鼠(shu)腎細胞(bao)，Pt K1細(xi)胞(bao) RBL-1細(xi)胞(bao)，大(da)鼠嗜堿性粒細(xi)胞(bao)性白(bai)血病細(xi)胞(bao)

IL17RA Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴(hou) IL17RA / IL17R 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 人抗淋巴細胞(bao)球(qiu)蛋(dan)白(bai)(ALG)ELISA 試劑(ji)盒(he) phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激(ji)素(su)受(shou)體(ti)(多(duo)肽(tai)) 0.5mg

CW-2人結(jie)腸(chang)癌(ai)細(xi)胞(bao)人胚(pei)肺(fei)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao);WI-38 [WI38] 大(da)鼠基質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)7(MMP-7)ELISA 試劑(ji)盒(he) ICAM-2/CD102  大(da)鼠細胞(bao)間(jian)粘(zhan)附(fu)分子(zi)2 96T

PLEKHM1： 石(shi)骨癥(zheng)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)PLEKHM1抗體(ti) 犬(quan)腎細胞(bao)系(xi)/野(ye)生型(xing);MDCK/wild

大(da)鼠海馬趾(zhi)神經(jing)細(xi)胞(bao)(RHh)(1×106) WM451, 人黑(hei)色素(su)瘤(liu)細(xi)胞(bao) Human 大(da)鼠基質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)5(MMP-5)ELISA試劑(ji)盒(he) E2(Mouse Estradiol) 小(xiao)鼠雌(ci)二醇 96T

PLEKHM2： 血小(xiao)板白細(xi)胞(bao)C激(ji)酶(mei)底物(wu)同(tong)源結(jie)構(gou)域(yu)M2抗體(ti) 人少(shao)突(tu)膠(jiao)質前體(ti)細(xi)胞(bao)cDNAHOPC cDNA

CD70 Protein Human 重組(zu)人 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋(dan)白(bai) (Fc 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠基質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)5(MMP-5)ELISA 試劑(ji)盒(he) BP180-Ab(Human anti-Bullous Pemphigoid 180 antibody)  人抗BP180抗體(ti) PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

三、培養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養(yang)液是(shi)否有(you)漏液、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請及(ji)時和我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血清比例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等，確(que)保(bao)細胞(bao)培養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養(yang)條件不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致細胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察好細胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培養(yang)基(ji)重懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條件的培養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天各拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸的(de)原(yuan)因，個別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的(de)技術(shu)人員跟蹤回訪直至(zhi)問題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運輸用(yong)的(de)培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照說明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養(yang)條件新(xin)配制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。