NCI-H1299人(ren)非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao)

公司(si)產品僅(jin)供科研(yan)研究(jiu)使用(yong)、不得用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養凍存處理僅(jin)供參考，具(ju)體操(cao)作步驟以(yi)隨貨產(chan)品說明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍存管在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適量(liang)培養基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過夜（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中，加(jia)入約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜）。第二(er)天換液(ye)並檢查細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如果細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清，用不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而定），然(ran)後(hou)在顯(xian)微鏡下觀察細胞(bao)消(xiao)化情況，若細胞(bao)大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落，迅(xun)速拿(na)回操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分(fen)到(dao)新的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中或者瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀態良好時，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血清細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻，每支凍(dong)存管凍存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存管做好標(biao)識。將(jiang)凍存管放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記錄凍存管位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿(na)取。

公司(si)正(zheng)在出售的產(chan)品：

P19小(xiao)鼠(shu)畸(ji)胎瘤細胞(bao) P19 mouse teratoma cells a-MEM(肌(ji)醇 43.2mg/l, 8.82mg/l)+7.5%BCS+2.5%FBS 大鼠(SS)ELISA 試劑盒(he) CNP  大鼠C型尿肽 96T

NET1： 神經上(shang)皮(pi)細胞(bao)轉(zhuan)化基(ji)因1抗(kang)體 RK1 Others Human 人(ren) kA / RK1 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照)

CM-M125小(xiao)鼠(shu)牙(ya)細胞(bao)培(pei)養基(ji)100mL 大鼠生(sheng)長停(ting)滯(zhi)特異性蛋(dan)白6(GAS6)ELISA試劑盒(he) NT-4(Mouse Neurotrophin 4)  小(xiao)鼠神經生(sheng)長因子(zi)4 96T

Nectin 3： 細胞(bao)粘附分(fen)子(zi)3抗(kang)體 大鼠胰(yi)島β細胞(bao)瘤細胞(bao);RIN-m5F

SW 1990(人(ren)胰腺癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 NCL-H460(非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺癌(ai)) 大鼠生(sheng)長停(ting)滯(zhi)DNA損傷可(ke)誘導(dao)蛋(dan)白α(GADD45α)ELISA試劑盒(he) Alpha-GST  大鼠αS轉(zhuan)移(yi)酶 96T

IL-28R： 白(bai)細胞(bao)介(jie)素(su)28受(shou)體抗(kang)體 CD1d1 Others Mouse 小鼠(shu) CD1D / R3G1 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照)

人(ren)胚(pei)肺成(cheng)纖(xian)維細胞(bao);MRC-5 人(ren)T細胞(bao)受(shou)體(TCR)ELISA 試劑盒(he) SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0酸(suan)協(xie)同轉(zhuan)運蛋(dan)白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IKB zeta： KB抑制(zhi)蛋(dan)白激酶Ζ抗(kang)體 人(ren)腦(nao)瘤細胞(bao);SF126

SHZ-88(大鼠癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 大鼠 EphA3 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照) 人(ren)T細胞(bao)生(sheng)長因子(zi)-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA 試劑盒(he) SMN1(survival of motor neuron 1) 運(yun)動(dong)神經元生(sheng)存蛋(dan)白1抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Islet 1： 胰(yi)島素(su)基(ji)因增強結(jie)合(he)蛋(dan)白1抗(kang)體 視(shi)網膜(mo)神經節細胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

NCI-H1299人(ren)非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao)mRTEC, 小(xiao)鼠(shu)腎小管上(shang)皮(pi)細胞(bao) 大鼠白(bai)三烯C4(LTC4)ELISA 試劑盒(he) OCT(Human ornithine carbamoyl transferase)  人(ren)鳥酸(suan)基(ji)甲酰轉移(yi)酶 96T

RanBP2： RAN結(jie)合(he)蛋(dan)白2/核(he)孔(kong)蛋(dan)白抗(kang)體 GFRA3 Others Mouse 小鼠(shu) GFRA3 / GFR-alpha-3 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照)

Ana-1 小(xiao)鼠(shu)巨(ju)噬(shi)細胞(bao) 大鼠白(bai)三烯B5(LTB5)ELISA 試劑盒(he) vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor)  人(ren)內臟(zang)脂肪特異性絲酸(suan)抑制(zhi)劑 96T

RNF11： 環(huan)指(zhi)蛋(dan)白11抗(kang)體 LAN-5細胞(bao)，神經母細胞(bao)瘤細胞(bao) 人(ren)胎盤(pan)絨毛癌(ai)細胞(bao),JAR細胞(bao) 人(ren)表皮角質(zhi)細胞(bao)RNAHEK miRNA5 μg

CDH1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CDH1 / E-cad / CD324 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照) 大鼠白(bai)三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒(he) PP(Human Protein Phosphatase)  人(ren)蛋(dan)酸(suan)酶 96T

三、培(pei)養(yang)註意事項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁等現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明書，了解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細胞(bao)形(xing)態、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血清比例、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養條件壹致，若由(you)於(yu)培養(yang)條件不壹(yi)致而導(dao)致細胞(bao)出現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦拭細胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡下觀察細胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀察好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細胞(bao)直(zhi)接混勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接種(zhong)到新的培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件的培養(yang)基(ji)用於(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便於和(he)我司(si)技術部(bu)溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的原(yuan)因，個別敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩(wen)定的情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況，以(yi)便我們(men)的(de)技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請(qing)換用按照說明書細胞(bao)培(pei) 養條件新配制(zhi)的培養(yang)基(ji)來培(pei)養細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。