BEWO人胎(tai)盤絨(rong)毛膜(mo)癌(ai)細(xi)胞(bao)

公司產品(pin)僅供科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再輕輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru)培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於凍存管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存管放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操作

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存處理僅供參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入含(han)適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

    a、棄去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶置於37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量(liang)加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意凍存管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置以(yi)便下(xia)次拿(na)取。  

公司(si)正(zheng)在(zai)出售的產(chan)品(pin)：

LDOC1： 亮酸(suan)拉(la)鏈下(xia)調(tiao)因(yin)子1抗(kang)體(ti) HAVCR1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

支氣管成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠(shu)脂蛋(dan)脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒(he) Rb Anti-FITC/RBITC 羅(luo)丹(dan)明(ming)標記(ji)兔抗(kang)FITC 0.3ml

LOXL2： 賴(lai)酰(xian)氧(yang)化酶相關(guan)蛋(dan)白2抗(kang)體(ti) 小(xiao)鼠(shu)淋巴(ba)瘤細(xi)胞(bao)(NK靶細(xi)胞(bao));YAC-1

COLO 320DM(人結(jie)直腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 人心(xin)臟成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)-心室(shi)HCF-av 大鼠(shu)脂蛋(dan)脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒(he) Goat Anti-human IgA/RBITC 羅(luo)丹(dan)明(ming)標記(ji)羊(yang)抗人IgA 0.3ml

Lumican： 基(ji)膜(mo)聚(ju)糖(tang)蛋白抗(kang)體(ti) T-101A(含(han)10mL 酶解(jie)緩(huan)沖液(ye))1mL

ECV-304細(xi)胞(bao)，人臍(qi)靜(jing)脈(mai)內皮(具(ju)有(you)T24細(xi)胞(bao)特性(xing)) 葡(pu)萄(tao)球菌(jun) 人牙(ya)齦(yin)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)總RNAHGF NA 人抗(kang)細(xi)胞(bao)膜(mo)DNA抗體(ti)(cmDNA)ELISA 試劑盒(he) ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2) 血管(guan)位(wei)蛋白樣(yang)2/血(xue)管生(sheng)成(cheng)素(su)樣蛋(dan)白-2(多肽(tai)) 0.5mg

HBA1： 血紅(hong)蛋白α1/α-Globin抗(kang)體(ti) HA Others Influenza B 乙(yi)型(xing)流感(gan) (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

BALB/C小鼠(shu)肝瘤(liu)株;BNL 1ME A.7R.1 人抗(kang)胃壁(bi)細(xi)胞(bao)抗體(ti)(AGPA/PCA)ELISA 試劑盒(he) GLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素(su)樣肽(tai)-2(多肽(tai)抗原) 0.5mg

HIPK2： Fas相互(hu)作用(yong)蛋白激酶2抗(kang)體(ti) 人淋(lin)巴細(xi)胞(bao);1301

WB-F344(大鼠(shu)肝上(shang)皮樣幹細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0271D283 Med(人腦(nao)髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 豹(bao)貓肺成(cheng)纖(xian)維(wei)樣細(xi)胞(bao);LCL3 人抗(kang)網(wang)硬(ying)蛋白抗(kang)體(ti)(ARA)ELISA 試劑盒(he) GRP94 (gp96) 94kDa 糖調(tiao)節蛋(dan)白(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

BEWO人胎(tai)盤絨(rong)毛膜(mo)癌(ai)細(xi)胞(bao)人臍(qi)靜(jing)脈(mai)內皮細(xi)胞(bao)(HVVEC)( 5×105 ) SK-MEL-1, 人皮膚(fu)黑色素(su)瘤細(xi)胞(bao) Human 大鼠(shu)甲羥5-焦(jiao)0酸脫(tuo)羧(suo)酶(MDD)ELISA試劑盒(he) T4(Mouse thyroxine)  小鼠(shu)甲狀(zhuang)腺(xian)素(su) 96T

PATJ： PSD95相關(guan)緊(jin)密(mi)連(lian)接蛋白PATJ抗(kang)體(ti) 人心(xin)肌細(xi)胞(bao)-心房cDNAHCF-aa cDNA

LTA Protein Human 重組(zu)人 TNF-beta / TNFSF1 / Lymphotoxin alpha 蛋(dan)白 大(da)鼠(shu)甲基(ji)化酶(Methylase)ELISA試劑盒(he) ABM-Ab(Human alveoli basement membrane zone antibody)  人抗(kang)肺泡基(ji)底膜(mo)抗體(ti) ANGPTL5 Others Human 人 ANGPTL5 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

HCCC-9810 人膽(dan)管(guan)細(xi)胞(bao)型(xing)肝癌(ai)細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)甲基(ji)化酶(Methylase)ELISA 試劑盒(he) TE  大鼠(shu)端(duan)粒酶 96T

PTGER1： 前列腺(xian)素(su)EP1受體(ti)抗(kang)體(ti) HEL細(xi)胞(bao)，紅白血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao) 人肺(fei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)系,PG49細(xi)胞(bao) 表皮角化細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

三、培養(yang)註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好(hao)，培養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和(he)我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所用(yong)培養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養條件不(bu)壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面，顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度 變化及(ji)劇(ju)烈碰亡破(po)碎形成(cheng)碎片，是正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸浮細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相同(tong)條件的(de)培(pei)養基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建議(yi)客戶收到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各拍幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我司技(ji)術部(bu)溝通 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出現不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請及(ji)時(shi)和(he)我們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以(yi)便我們的技(ji)術人員跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再用(yong)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條件新(xin)配制的培養基(ji)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次傳(chuan)代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。