C-33A人(ren)宮頸癌細胞

公(gong)司(si)產品僅供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用、不得用於臨(lin)床(chuang)診斷！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培養

液(ye)終止消化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細胞使(shi)之脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養箱(xiang)中培養；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入培養液(ye)終

止消化，輕(qing)輕(qing)吹打細胞使(shi)之脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於凍存(cun)管中；

4）先將(jiang)細胞凍存(cun)管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移(yi)入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使用程序

降(jiang)溫盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二、細胞培養操(cao)作

1) 復蘇細胞：以下(xia)細胞培養凍存(cun)處理僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體(ti)操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨貨產品說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養基混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適量培養基的(de)培養瓶(ping)中培養過(guo)夜（或將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養基，培養過(guo)夜）。第二天換液並檢(jian)查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上清，用不含(han)鈣、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細胞，將(jiang)培養瓶(ping)置於37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部分(fen)變(bian)圓並脫落，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲幾下(xia)培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止消化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培養基的(de)新(xin)皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培養箱(xiang)中培養。 3) 細胞凍存(cun)：待細胞生(sheng)長(chang)狀態良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培養液(ye)，裝入無(wu)菌離(li)心管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血清細胞凍存(cun)液，使細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍存(cun)管凍存(cun)1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意凍存(cun)管做(zuo)好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍存(cun)管放入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄凍存(cun)管位置以便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售的產品：

Laminin Beta 1： 層粘(zhan)連蛋白β1抗(kang)體 CM-M088小(xiao)鼠破骨細胞培養基100mL

NOV Protein Cynomolgus 重組(zu)食(shi)蟹猴(hou) / 恒(heng)河(he)猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biao)簽) 大(da)鼠粘(zhan)蛋白5AC(MUC5AC)ELISA試(shi)劑盒 IgG/RBITC 羅(luo)丹明(ming)標(biao)記(ji)豬(zhu)IgG 0.3ml

LPLUNC1： 鼻咽癌癌基因(yin)抗(kang)體 RNASET2 Others Human 人(ren) RNASET2 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)

大鼠卵(luan)巢(chao)上皮細胞培養基 100mL 大(da)鼠(shu)粘(zhan)蛋白3(MUC3)ELISA 試(shi)劑盒 Mink IgG/RBITC 羅(luo)丹明(ming)標(biao)記(ji)水貂IgG 0.3ml

LIFR： 白血病(bing)抑制因(yin)子(zi)受體抗(kang)體 A549/DDP, 人(ren)肺(fei)腺(xian)癌耐(nai)藥細胞株(zhu) 小細胞肺(fei)癌細胞,LIEP-P細胞 DT40(雞淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細胞)

FaDu(人咽鱗(lin)癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0299NCI-H460(人(ren)肺癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2 兔晶(jing)體(ti)上皮細胞永(yong)生(sheng)系;N/N1003A(RLE) 人(ren)抗(kang)神(shen)經(jing)元(yuan)核抗(kang)體(ti)1型(xing)/抗Hu抗體(ti)(ANNA-1/Hu)ELISA 試劑(ji)盒 alpha Adaptin/AP1 銜(xian)接(jie)蛋白α抗(kang)原 0.5mg

HAS2： 透明(ming)質(zhi)酸(suan)合(he)成酶(mei)2抗(kang)體(ti) 人胚肺(fei)成纖(xian)維(wei)細胞;MRC-5

RKO-AS45-1(人結腸(chang)癌轉(zhuan)基因(yin)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)抗神(shen)經母細胞瘤(liu)抗(kang)體(ti)(NB-Ab)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激(ji)活的脫氧核糖(tang)核(he)酸酶(mei)抑制劑(ji)(抗(kang)原) 0.5mg

HOXA3： 同(tong)源(yuan)盒基因(yin)HOXA3蛋白抗(kang)體 NA Others H9N2 甲(jia)型(xing)流感(gan) H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神(shen)經(jing)酶(mei) (Neuraminidase / NA) 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)

KP-N-NS人腎(shen)上腺神(shen)經(jing)母細胞瘤(liu)細胞(腦(nao)轉移(yi)) KP-N-NS human adrenal neuroblastoma cells (brain metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 人抗(kang)抗(kang)體(GM1)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 IDE 胰(yi)島(dao)素降(jiang)解(jie)酶(mei)(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

C-33A人宮頸癌細胞人羊膜細胞;WISH 大(da)鼠(shu)激(ji)動異(yi)構(gou)酶(mei)/細胞分(fen)裂(lie)素(su)MB(CKMB)ELISA試(shi)劑(ji)盒 FS(Mouse Follistatin) 小(xiao)鼠(shu)卵泡(pao)抑素 96T

PRDX3： 過氧化還原酶(mei)3抗(kang)體(ti) 犬腎(shen)細胞;MDCK(NBL-2)

大鼠垂(chui)體(ti)細胞(RPC)(1×106) A549/DDP, 人(ren)肺(fei)腺癌耐(nai)藥細胞株(zhu) Human 大鼠(shu)激(ji)動異(yi)構(gou)酶(mei)/細胞分(fen)裂(lie)素(su)MB(CKMB)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 sVCAM-1  大(da)鼠(shu)可(ke)溶(rong)性血管細胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1 96T

PSAP： 前列腺(xian)酸(suan)性0酸酶(mei)抗(kang)體(ti) 人小氣(qi)道(dao)上皮細胞cDNAHSAEpiC cDNA

CD40LG Protein Human 重組(zu)人(ren) CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標(biao)簽) 大(da)鼠基質(zhi)細胞衍(yan)生因子(zi)4(SDF4)ELISA試(shi)劑(ji)盒 hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody)  人(ren)異(yi)質(zhi)型(xing)核糖(tang)核(he)蛋白復合(he)物/抗(kang)RA33抗體(ti) CDK2 Others Human 人 CDK2 / p33 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)

三、培養註(zhu)意事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養液(ye)是否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時和我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細胞相(xiang)關信息(xi)，如(ru)細胞形態、所(suo)用培養基、血清比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞培養條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培養條(tiao)件不壹(yi)致而(er)導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細胞瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀態。因運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部分(fen)細胞由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化及(ji)劇烈碰(peng)亡破碎(sui)形成碎(sui)片，是正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀態後(hou)，75%酒精消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞可(ke)以消化，懸(xuan)浮細胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的(de)培養基重懸(xuan) 細胞，並接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的培養瓶(ping)或培養皿(min)中，置(zhi)於培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶用相同(tong)條(tiao)件的培養基用於細胞培養。

6. 建議(yi)客戶收(shou)到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍幾張細胞照片，記(ji)錄細胞狀態，便於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現(xian)不穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時和我(wo)們(men)聯(lian)系，告(gao)知細胞 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的(de)技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至問題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科研使用。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用的培養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不能(neng)再(zai)用來培養細胞，請(qing)換(huan)用按照說(shuo)明(ming)書細胞培 養條(tiao)件新(xin)配制的培養基來(lai)培養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。