CCK-81細胞(bao)

公司產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用(yong)、不得(de)用於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止(zhi)消化，再輕(qing)輕吹(chui)打細胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸，然(ran)後按 1:2 比例(li)進行(xing)分瓶傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品介紹：

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終

止(zhi)消化，輕(qing)輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後轉入(ru)液(ye)氮中進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使(shi)用程序(xu)

降溫(wen)盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處理僅(jin)供(gong)參考，具體操(cao)作步驟(zhou)以隨(sui)貨產品說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹勻(yun)。然(ran)後將所有細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第二天(tian)換液(ye)並檢(jian)查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代：如(ru)果細胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子(zi)的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所有細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消化情(qing)況，若細胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅速拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終止(zhi)消化。輕(qing)輕打勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸液(ye)按1:2比例(li)分到新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的新皿(min)中或(huo)者瓶中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌儲存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以便下次拿(na)取(qu)。

公司正在(zai)出售的(de)產品：

細胞(bao)單胺(an)氧(yang)化酶(mei)B型（MAO－B）活性(xing)熒光(guang)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

3′端(duan)DNA轉移酶(mei)標記試(shi)劑盒(he)

細胞(bao)WNV（WEST NILE）病毒(du)定(ding)性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

MYC蛋(dan)白免(mian)疫(yi)共(gong)沈澱(dian)分析試(shi)劑盒(he)

植物遊(you)離氨(an)基酸(suan)含(han)量(liang)熒光(guang)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

全組織(zhi)免(mian)疫(yi)熒光(guang)顯微(wei)鏡(jing)直(zhi)接(jie)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)(含熒光(guang)壹抗)

細胞(bao)LCK激酶活性(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)（A/B/C）

植物細胞(bao)周(zhou)期M期同(tong)步（SYNCHRONY）處理試(shi)劑盒(he)

細胞(bao)/組織(zhi)高粘性(xing)多聚賴載玻片(pian)制備試(shi)劑盒(he)

通用型(xing)乙酰酯(zhi)酶活性(xing)化學(xue)發光(guang)法定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

魚(yu)類(lei)受(shou)精卵細胞(bao)凍(dong)存試(shi)劑盒(he)（超(chao)低溫(wen)）

細胞(bao)色素P450亞(ya)酶(mei)2C8（PACLILAXEL）活性(xing)高效液(ye)相色譜(pu)法（HPLC）定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

細胞(bao)鈣(gai)鈉交換體（NCX）蛋(dan)白表(biao)達流式(shi)細胞(bao)儀(yi)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

組織(zhi)基質金屬抑制(zhi)劑1（TIMP-1）活性(xing)熒光(guang)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

胚胎幹細胞(bao)（ES）凍(dong)存試(shi)劑盒(he)

載脂蛋(dan)白E抗體

鈣(gai)依賴分泌(mi)激活(huo)蛋(dan)白2/自閉(bi)癥(zheng)的(de)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白抗體

驅動(dong)蛋(dan)白C3抗體

I型膠(jiao)原單克隆抗體

細胞(bao)分裂(lie)周(zhou)期蛋(dan)白CDC123抗體

X染色體開放(fang)閱讀(du)框34抗體

跨膜(mo)蛋(dan)白29抗體

CCK-81細胞(bao)APC標記人(ren)CD71單克隆抗體

鋅(xin)指(zhi)蛋(dan)白769抗體

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶是(shi)否完好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾濁等(deng)現象(xiang)，若有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明(ming)書，了(le)解(jie)細胞(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基、血清比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因子等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由於培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任由 客戶自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞(bao)由於溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇烈(lie)碰亡破(po)碎形成(cheng)碎片，是(shi)正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可以消化，懸浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養(yang)基重懸 細胞(bao)，並接種到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶收(shou)到細胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各拍幾張(zhang)細胞(bao)照片，記錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便於和我(wo)司技術部(bu)溝通 交流(liu)。由於運(yun)輸的原因，個(ge)別(bie)敏感細胞(bao)會出現不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請及時和我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知細胞(bao) 的具體情(qing)況，以便我(wo)們的(de)技術人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的培(pei)養(yang)基 (灌液(ye)培(pei)養(yang)基) 不能再用(yong)來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換用按照說明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新(xin)配制的培(pei)養(yang)基來培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到細胞(bao)後第壹次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。