FU97細胞(bao)

公(gong)司產(chan)品(pin)僅供(gong)科研(yan)研(yan)究使(shi)用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回縮變圓後加入 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再輕(qing)輕吹(chui)打細(xi)胞使之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

壹(yi)、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回縮變圓後加入培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用(yong)適量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存(cun)。使用(yong)程序

降溫(wen)盒(he)可直接放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操(cao)作

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供(gong)參(can)考，具體操作步(bu)驟以(yi)隨貨產品(pin)說(shuo)明書為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適量(liang)培(pei)養基(ji)的(de)培(pei)養瓶中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置於(yu)37℃培(pei)養箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定），然(ran)後在顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞消化(hua)情況(kuang)，若細胞大部分變圓並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速拿(na)回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲幾下培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕(qing)打勻後裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細(xi)胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數。

b、根據細(xi)胞(bao)數量(liang)加(jia)入無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產品(pin)：

細胞(bao)半-4（CASPASE-4）活(huo)性(xing)熒光(guang)定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒

RPE蛋白標記(ji)試劑(ji)盒（不(bu)含(han)RPE）

組織人(ren)體鼻病(bing)毒（rhinovirus））定性(xing)檢測(ce)試劑(ji)盒

載玻(bo)片細胞(bao)CREB蛋白表達(da)NBT顯色(se)光學(xue)顯微(wei)鏡檢測(ce)試劑(ji)盒

轉基(ji)因棉花(hua)GK19品系(xi)基因(yin)檢測(ce)試劑(ji)盒

抗(kang)體熒光(guang)標記制(zhi)備(bei)試劑(ji)盒（見(jian)蛋白/抗(kang)體標記(ji)專題(ti)）

細胞(bao)蛋白磷酸(suan)酶(mei)2A（ PP2A）活(huo)性(xing)比(bi)色(se)法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒

100161012410112

全組織乙酰脂(zhi)酶活(huo)性(xing)染色(se)試劑(ji)盒

組織花(hua)生(sheng)四烯酸(suan)（arachidonic acid）高(gao)效液相(xiang)色(se)譜法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒

體外微(wei)管(guan)蛋(dan)白聚合(he)作用（polymerization）比(bi)色(se)法檢測試劑(ji)盒（300微(wei)克(ke)，標(biao)準(zhun)樣(yang)）

細胞(bao)N-乙酰轉移酶(mei)（NAT）活(huo)性(xing)比(bi)色(se)法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒

細胞(bao)CYP2B1蛋白表達(da)比(bi)色(se)法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒

組織基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)（MMP-12）活(huo)性(xing)熒光(guang)定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒

酚(fen)藏花紅(hong)（PHENOSAFRANINE）植物(wu)細(xi)胞繁殖(zhi)測定試劑(ji)盒

粘蛋(dan)白-1抗(kang)體

甘油(you)二(er)酯磷酸(suan)轉(zhuan)移(yi)酶(mei)抗(kang)體

去(qu)整合(he)素(su)樣(yang)金(jin)屬10（CD156c）單克(ke)隆抗(kang)體

Kelch樣蛋(dan)白14抗(kang)體

細胞(bao)角蛋白18單克(ke)隆抗(kang)體

ZSWIM3蛋白抗(kang)體

快速發(fa)育(yu)生(sheng)長因(yin)子(zi)同源(yuan)蛋白4抗(kang)體

FU97細(xi)胞(bao)ASTE1蛋(dan)白抗(kang)體

鋅(xin)指蛋(dan)白913抗(kang)體

三、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到細胞(bao)後首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是(shi)否有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象(xiang)，若有(you)上述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀細胞(bao)說(shuo)明書，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而導(dao)致細(xi)胞(bao)出現問題(ti)，責(ze)任由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶表面(mian)，顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接混勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件的(de)培(pei)養基(ji)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞(bao)後前 3 天(tian)各拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由(you)於(yu)運(yun)輸的(de)原因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細胞(bao)會(hui)出現不穩(wen)定的(de)情況(kuang)，請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體情況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅供(gong)科研(yan)使用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來培(pei)養細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按照(zhao)說(shuo)明書細(xi)胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。