AV3人宮(gong)頸(jing)癌細(xi)胞(bao)

公司產品(pin)僅供科研研究使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終止(zhi)消化，再輕輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液終

止(zhi)消化，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍存管中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍存管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保存。使(shi)用程(cheng)序

降溫盒(he)可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養凍存處理僅供參考(kao)，具體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養基混合(he)均勻。在1000 rpm條件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養基的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培養過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基，培養過夜(ye)）。第(di)二天(tian)換(huan)液並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代培養。

    a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置於(yu)37℃培養箱中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲幾下培養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養基終止(zhi)消化。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養液後吹(chui)勻(yun)。        

     c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液，裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

     b、根據細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍存管做(zuo)好標識。將(jiang)凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置以便下次拿取。  

公司正(zheng)在(zai)出售的(de)產(chan)品(pin)：

Lunatic Fringe： 信(xin)號(hao)轉導分(fen)子(zi)SCDO3抗體(ti) B16-F10, 小鼠黑色(se)素(su)瘤高轉移細(xi)胞(bao) 皮(pi)膚黑色(se)素(su)瘤細(xi)胞(bao),SK-HEL-1細(xi)胞(bao) HCCLM3(肝(gan)癌細(xi)胞(bao))

TNFRSF17 Others Rat 大(da)鼠(shu) TNFRSF17 / BCMA 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)脂(zhi)聯(lian)素(Acrp30/ADP)ELISA試(shi)劑盒(he) IgA/HRP 辣根過氧化物酶(mei)標記(ji)兔抗人IgA 0.1ml

LEO1： RNA聚(ju)合酶(mei)相(xiang)關蛋(dan)白(bai)LEO1抗體(ti) 大(da)鼠(shu)骨(gu)髓瘤細(xi)胞(bao);Y3-Ag 1.2.3

V79倉(cang)鼠(shu)肺(fei)細(xi)胞(bao) V79 hamster lung cells RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS 大(da)鼠(shu)脂(zhi)肪型脂(zhi)肪酸結合(he)蛋(dan)白(bai)(FABP)ELISA試(shi)劑盒(he) Protein A/HRP 辣根過氧化物酶(mei)標記(ji)的(de)蛋(dan)白(bai)A 0.1ml

LCMV： 淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)性(xing)脈絡(luo)叢腦膜(mo)炎病(bing)毒蛋(dan)白(bai)抗體(ti) FCGR1 Others Human 人 CD64 / FCGR1A 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照)

原(yuan)代(dai)心(xin)肌細(xi)胞(bao)特(te)制無血清(qing)添(tian)加(jia)劑Many types of cells包裝(zhuang)：1ml 人抗(kang)乙(yi)型肝(gan)炎(yan)病(bing)毒核(he)心(xin)抗(kang)體(ti)(HBcAb)ELISA 試(shi)劑盒(he) FoxP3 叉頭(tou)蛋(dan)白(bai)3-T細(xi)胞(bao)轉錄因(yin)子(zi)(多(duo)肽(tai)抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

Phospho-HER2 (Tyr1221 + Tyr1222)： 0酸化HER2受(shou)體(ti)抗體(ti) 猞猁(li)皮膚成纖維樣(yang)細(xi)胞(bao);ELS1 大(da)鼠(shu)腎細(xi)胞(bao)，NRK細(xi)胞(bao) NBTF細(xi)胞(bao)，新(xin)生(sheng)牛眼Tenon's囊成纖維細(xi)胞(bao)

HGF Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照) 人抗(kang)乙(yi)型肝(gan)炎(yan)病(bing)毒核(he)心(xin)IgM抗(kang)體(ti)(HBcAb-IgM)ELISA 試(shi)劑盒(he) GAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長(chang)相關蛋(dan)白(bai)-43(抗原(yuan)) 0.5mg

phospho-HDAC8 (Ser39)： 0酸化組(zu)蛋(dan)白(bai)去(qu)乙(yi)酰化酶(mei)8抗(kang)體(ti) SGC-7901, 人胃(wei)腺癌細(xi)胞(bao)系(xi)

HUVEC(原(yuan)代(dai))細(xi)胞(bao)，人臍(qi)靜(jing)脈血管(guan)內皮細(xi)胞(bao) HPVl6 E6、E7和(he)ras基因(yin)共(gong)轉化的(de)C57BL/C(H-2b)小(xiao)鼠(shu)肺(fei)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao),TC-1細(xi)胞(bao) 人雪(xue)旺(wang)細(xi)胞(bao)總RNAHSC NA 人抗(kang)乙(yi)型肝(gan)炎(yan)病(bing)毒核(he)心(xin)IgG抗(kang)體(ti)(HBcAb-IgG)ELISA 試(shi)劑盒(he) Gastrin 胃泌素(su)(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

AV3人宮(gong)頸(jing)癌細(xi)胞(bao)Phospho-PKR (Thr446 + Thr451)： 0酸化蛋(dan)白(bai)激酶(mei)R抗(kang)體(ti) 豹貓皮膚成纖維樣(yang)細(xi)胞(bao);LCS5

人臍(qi)帶間葉(ye)幹細(xi)胞(bao)(臍(qi)帶)(HUMSC) (5×105) AGS人胃(wei)腺癌細(xi)胞(bao) Human 大(da)鼠(shu)間羥(qiang)去(qu)甲(NMN)ELISA試(shi)劑盒(he) NN-T4(Mouse Neonatal Thyroxine) 小鼠(shu)新(xin)生(sheng)甲(jia)狀(zhuang)腺素(su) 96T

Phospho-PLCG2(Tyr1217)： 0酸化0酯酶(mei)Cγ2抗(kang)體(ti) 人神(shen)經(jing)元(yuan)總RNAHN NA

TNFSF11 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小鼠(shu) RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋(dan)白(bai) (Fc 標簽) 大(da)鼠(shu)間羥(qiang)(MN)ELISA試(shi)劑盒(he) ALA/LCA(Human anti-lymphocytotoxic antibody)  人抗(kang)淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)毒(du)抗體(ti) HA Others H7N7 甲型流(liu)感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血(xue)凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照)

HAL-01 人急性(xing)混(hun)合型白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)間羥(qiang)(MN)ELISA試(shi)劑盒(he) TRH  大(da)鼠(shu)促(cu)甲(jia)狀(zhuang)腺素(su)釋放激(ji)素(su) 96T

三(san)、培養註(zhu)意事項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培養液是否(fou)有漏液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時(shi)和我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培養基、血清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等，確保細(xi)胞(bao)培養條件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培養條件(jian)不(bu)壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責(ze)任由(you) 客戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸問題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫度 變化及(ji)劇烈碰亡破(po)碎形成碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒精消毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消化，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培養瓶(ping)或培養皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶用相同條件(jian)的(de)培養基用於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天(tian)各拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流。由(you)於(yu)運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現不(bu)穩(wen)定的(de)情況，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以便我們的(de)技(ji)術(shu)人員(yuan)跟蹤回訪(fang)直至問題解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的(de)培養基 (灌(guan)液培養基) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培養基來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。